国家自然科学基金(30771934)
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
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- 体外培养毛乳头细胞的versican基因表达变化
- 2009年
- 目的探讨versican基因及蛋白在体外培养的毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPC)中的表达变化,并研究其对DPC凝集性生长特性的影响。方法利用酶消化法分离培养DPC,并进行体外培养传代,观察不同代次DPC凝集性生长特性的变化。应用Western blot、RT-PCR检测DPC的β-catenin、versican的表达情况,对比研究其与DPC凝集性生长的关系。结果随着DPC由低代向高代分化,其凝集性生长特性逐渐减弱,versican表达水平逐渐降低。Wnt途径上调versican基因的表达,能够使高代DPC表达β-catenin、versican增强。结论versican基因和蛋白水平的表达与DPC凝集性生长呈正相关;versican基因是调控DPC凝集性生长的重要基因,versican的表达对毛囊(hair follicle,HF)的形成起着十分重要的作用,并在维护HF周期中扮演重要角色。
- 杨亚东伍津津李元朝毕建军朱堂友
- 关键词：DPC凝集性生长VERSICANΒ-CATENIN
- pH值对毛乳头细胞凝集性生长的影响
- 2009年
- 毛乳头细胞（dermal papilla cells，DPC）是一群位于毛囊基底部的真皮源性细胞，在毛囊发育和周期性再生捌控中起主导作用。诱导毛囊形成是DPC最为显著的功能特征，实验证明，体外传代培养的DPC仍保留有诱导毛囊形成的能力。但毛乳头细胞诱导毛囊形成的能力与其凝集性生长特性密切相关，即体外培养的毛乳头细胞在融合前相互聚集形成相互重叠的小簇。因此探明影响毛乳头细胞凝集性生长的影响因素将为毛囊发育、再生及重建打下重要基础：目前影响毛乳头细胞凝集性生长的因素尚不明确。我们在实验中发现，当培养基pH值过高时毛乳头细胞会失去凝集性生长特性，当这些细胞用pH值较低的培养基培养时其凝集性生长特性会重新恢复。
- 倪冬冬伍津津唐书谦苏楠杨涛王兵强
- 关键词：毛乳头细胞凝集性生长PH值体外传代培养CELLS
- Wnt-3a信号途径对毛乳头细胞聚集性生长作用的初步研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨Wnt-3a信号途径对体外培养的毛乳头细胞聚集性生长特性的影响。方法构建重组腺病毒pAdEasy-1／Wnt-3a，并以该重组腺病毒感染体外培养的毛乳头细胞，观察细胞生长特性的改变；应用激光共聚焦技术和Western印迹检测β-连环素及相关蛋白多功能蛋白聚糖的表达情况。结果Wnt-3a的过表达可以有效诱导毛乳头细胞聚集性生长。激光共聚焦显微镜检查提示，Wnt～3a过表达的毛乳头细胞β-连环素和多功能蛋白聚糖的荧光强度分别由34．16±9．62和18．81±9．59升高至87．35±17．28和92．18±18．39（t值分别为11．98，17．88，P值均〈0．01）；Western印迹也提示，Wnt-3a过表达的毛乳头细胞β-连环素和多功能蛋白聚糖的表达强度由15．27±2．17和19．32±2．46升高至60．09±7．24和58．46±2．78（t值分别为10．10，20．63，P值均〈0．01）。结论Wnt-3a是调节毛乳头细胞聚集性生长的重要分子，主要通过以β-连环素为核心蛋白的经典途径发挥调节作用，多功能蛋白聚糖作为Wnt信号途径的重要相关基因，是该调节的重要环节。
- 杨亚东伍津津李元朝朱堂友陈凌
- 关键词：WNT蛋白质类毛囊Β-连环素
- Versican基因RNAi慢病毒载体的构建及其对毛乳头细胞聚集性生长的干预作用
- 2015年
- 目的构建Versican基因RNAi慢病毒载体并研究Versican对毛乳头细胞聚集性生长的干预作用。方法根据人Versican基因序列,构建4个携带RNAi序列的慢病毒载体,利用293T细胞进行慢病毒包装。实验分为Control组(不做处理)、NC组(用空慢病毒载体包装的病毒转染细胞)和KD1、KD2、KD3、KD4 Versican RNAi慢病毒感染组。应用KD1、KD2、KD3、KD4 Versican RNAi慢病毒及NC慢病毒感染H1299细胞,荧光显微镜下观察感染效率,应用Real-time PCR检测Versican的表达,筛选出感染效率和特异性最高的慢病毒载体进行下一步研究。用慢病毒感染毛乳头细胞后,用Real-time PCR检测Versican基因的表达,并用Western blot检测Versican、ADAMTS4、p-c-JUN蛋白的表达,应用光镜观察毛乳头的生长情况。结果成功构建4种慢病毒载体,其中KD2慢病毒感染H1299细胞较其他慢病毒、Control和NC组显著下调Versican mRNA的表达(P<0.01)。应用KD2慢病毒感染毛乳头细胞后,较Control和NC组明显下调毛乳头细胞Versican mRNA和蛋白的表达(P<0.01),ADAMTS4、p-c-JUN蛋白的表达较Control组明显下调(P<0.01),毛乳头细胞聚集性生长的特性消失。结论成功构建了Versican基因RNAi慢病毒载体。Versican基因通过c-JUN-ADAMTS-4通路调控毛乳头细胞的聚集性生长。
- 封明霞伍津津杨桂红
- 关键词：RNA干扰慢病毒毛乳头细胞
