国家自然科学基金(81172792)
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 相关作者：姜国胜任霞张之勇潘素飞宋冠华更多>>
- 相关机构：山东省医学科学院济南大学山东省千佛山医院更多>>
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- PMA诱导K562细胞向单核细胞分化机制探讨被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨佛波酯(phorbol-12-myristate-13-ace-tate,PMA)诱导K562细胞向单核/巨噬细胞分化的作用机制。方法:采用CCK8法检测0、6.25、12.5、25、50、100和200nmol/L PMA对K562细胞增殖的影响,应用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化,采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b和CD14的表达变化,采用RT-PCR分析TGF-β1及其下游基因SMAD3和SMAD4在基因水平的表达趋势,并采用蛋白质印迹法检测TGF-β1在蛋白水平的表达变化。结果:K562细胞经6.25nmol/L PMA处理后72h增殖抑制率为(22.03±2.7)%,12.5nmol/L为(31.04±4.3)%,25nmol/L为(35.03±3.5)%,50nmol/L为(47.01±4.1)%,100nmol/L为(55.06±5.2)%,200nmol/L为(76.72±5.4)%,差异有统计学意义,F=2.24,P<0.05。PMA能抑制K562细胞的增殖并能促进其分化,作用效果随剂量的加大逐渐增强;细胞形态学上趋向于成熟分化;细胞表面分子CD11b和CD14的表达量升高。在mRNA水平,TGF-β/SMAD信号通路因子TGF-β1的表达量随时间的延长逐渐升高其下游因子SMAD3和SMAD4的表达也呈上升趋势;在蛋白水平,TGF-β1的表达亦呈上升趋势。结论:PMA可通过促进TGF-β/SMAD信号的传导诱导白血病细胞株K562细胞向单核/巨噬细胞分化。
- 潘素飞任霞史美燕禹林昌张之勇姜国胜
- 关键词：佛波酯K562分化TGF-ΒSMAD
- 纳米抗体在肿瘤诊断和治疗中的应用及其前景被引量：3
- 2019年
- 纳米抗体(Nb)最早发现于羊驼的外周血液中,与传统抗体相比,Nb具有体积小、稳定性好、免疫原性低、组织渗透性强、易于通过基因工程生产等特点,是目前已知最小的功能性抗原特异性结合片段,因此Nb近年来被认为是一种极具开发价值的蛋白质,在基础研究、新药研发、疾病治疗等多个领域得到了广泛的应用。本文重点综述Nb的结构特点和生化特性、在肿瘤诊断和治疗等领域的研究进展,同时预测Nb的应用前景。
- 王冠徐文娟姜国胜
- 关键词：肿瘤
- sox4不同结构域的真核表达质粒的构建和鉴定
- 2014年
- 目的：构建并鉴定sox4四段不同结构域的重组真核表达质粒。方法：以HL-60细胞的总RNA为模板，用RT—PCR方法扩增出sox4基因cDNA，将产物克隆进真核载体pCMV—Flag质粒内，构建含sox4不同结构域的重组真核表达质粒。将pCMV—Flag—sox4重组质粒转染293T细胞，Westernblot检测sox4蛋白表达。结果：核酸序列分析sox4已成功插入pCMV—Flag载体中，转染pCMV—Flag-sox4的293T细胞中检测到表达的sox4蛋白。结论：成功构建了含sox4基因的重组真核表达质粒。
- 史露露宋冠华潘素飞禹林昌史美燕任霞郭强姜国胜
- 关键词：HL-60
- 蛇床子素诱导HL-60细胞凋亡及其分子机制研究
- 2014年
- 目的 研究蛇床子素对急性髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用的分子机制.方法 CCK8实验检测蛇床子素对HL-60细胞的增殖抑制作用,Hoechst染色观察药物8h作用后细胞的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况,反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测HL-60细胞的Bcl-2、Bax mRNA表达变化,Western bolt检测HL-60细胞的活性caspase-3、caspase-8、caspase-9、Fas、FasL蛋白表达变化.结果 蛇床子素可明显抑制HL-60细胞增殖并诱导其发生凋亡,抑制率最高达（90.7±4.5）％,F=138.46,P=0.000;总凋亡率为33.6％,F=27.75,P=0.006.诱导后Bcl-2 mRNA表达下调,Bax mRNA表达上调,Bax/Bcl-2比值升高（F=210.12,P=0.000）,活性caspase-3、caspase-8、caspase-9、Fas、FasL蛋白表达水平随药物作用时间延长而升高.结论 蛇床子素可抑制HL-60细胞增殖并诱导凋亡,其诱导凋亡机制与同时激活线粒体途径和死亡受体途径相关.
- 王岩姜国胜任霞黄宁毕可红
- 关键词：蛇床子素白血病细胞凋亡
- 全反式维甲酸联合丙戊酸钠诱导白血病细胞分化过程中BRD4表达变化及其作用的研究
- 2013年
- 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)联合丙戊酸钠(VPA)诱导HL-60细胞分化过程中BRD4表达调控的分子机制。方法建立ATRA联合VPA诱导白血病细胞株HL-60的分化模型,瑞氏-吉姆萨(Wright-Gimesa)染色观察HL-60细胞形态,流式细胞术检测细胞表面分化抗原的表达,蛋白质印记从蛋白水平检测HL-60细胞经药物诱导24、48、72h后BRD4表达的变化。结果单独应用ATRA或VPA均能够明显抑制白血病细胞生长,诱导细胞分化,倒置显微镜下可观察到HL-60细胞向成熟粒细胞方向分化,细胞表面的分化抗原表达升高,联合诱导分化模型中细胞表面分化抗原表达升高更明显,两者均有统计学意义,在蛋白水平BRD4的表达逐渐降低,联合诱导分化模型中降低更明显,两者有统计学意义。结论 VPA可以明显的促进ATRA诱导白血病细胞的分化作用,BRD4基因的表达在随着分化程度的加强出现逐渐降低的趋势。
- 韦若颍毕可红姜国胜宋冠华张之勇张文郭燕王岩邱效东潘素飞史露露
- 关键词：白血病诱导分化全反式维甲酸丙戊酸钠
- 天然免疫分子LILRA1和LILRB2结合并调控HLA—B27的比较性研究
- 2014年
- 目的：探讨天然免疫分子LILRA1，LILRB2与HLA-1类抗原HLA-B27的结合及其调控作用机制。方法：构建LILRA1，LILRB2的真核表达载体和慢病毒载体，利用流式细胞术检测LILRA1，LILRB2在293T细胞系和221-B27细胞系中的表达，利用HLA—B27同源四聚体检测表达在细胞膜表面的LILRA1，LILRB2与HLA—B27分子结合能力，将LILRA1，LILRB2慢病毒载体分别转入HLA—B27稳定转染221细胞后，通过特异性抗体HC10和W6／32检测HLA—B27表达的差异性。结果：测序结果表明LILRA1与LILRB2载体序列正确，LILRA1与LILRB2均能特异性结合HLA—B27同源四聚体，而LILRB2结合HLA—B27能力强于LILRA1；LILRB2稳定转梁的221-B27细胞中HLA—B27分子在细胞膜的表达降低，而L1LRA1的转染对HLA—B27分子在细胞膜的表达无显著性影响。结论：LILRA1，LILRB2均可在细胞膜表面特异的与HLA-B27同源四聚体相结合，LILRB2在细胞内的高表达将抑制HLA—B27分子在细胞膜的表达。
- 张之勇任霞宋冠华俞林昌史美艳郭强李莲莲张晓瑜姜国胜毕可红
- 关键词：慢病毒
