湖南省自然科学基金(05JJ40115)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：中南大学湘雅二医院湖南师范大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 铅对HK-2细胞转分化及纤维化相关因子表达的影响
- 2008年
- 目的探讨铅在人肾小管上皮细胞表型转化中的作用及对纤维化相关因子的影响。方法体外培养人类近端肾小管上皮细胞系（HK-2）细胞，以2．5、5．0、10．0μmol／L醋酸铅剂量染毒，以0μmol／L醋酸铅剂量组为对照组，应用形态学、间接免疫荧光-流式细胞术、反转录-聚合酶链反应（RTPCR）观察醋酸铅染毒72hHK-2细胞形态、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和纤维连接蛋白（FN）表达的改变，以及对纤维化相关因子转化生长因子（TGF—β1）、结缔组织生长因子（CTGF）的影响。结果5．0、10．0μmol／L醋酸铅可使肾小管上皮细胞形态发生明显改变。5．0、10．0μmol／L醋酸铅组α-SMA阳性细胞率分别为9．32％和6．98％，明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；与对照组比较，5．0、10．0μmol/L醋酸铅组FN蛋白表达增高，差异有统计学意义（P〈0．01）。与对照组比较，5．0、10．0μmol／L醋酸铅组细胞TGF-β1 mRNA以及蛋白质表达明显增强，2．5、5．0、10．0μmol／L醋酸铅组CTGFmRNA以及蛋白质表达明显增强，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．05）。结论铅在体外可诱导。肾小管上皮细胞转分化并能增强TGF-β1、CTGF、FN表达。
- 周桂凤蒋云生彭佑铭胡白瑛刘栋乔玉峰
- 关键词：铅肾小管上皮细胞转化生长因子Β
- 铅结合蛋白研究进展被引量：4
- 2006年
- 铅结合蛋白(PbBPs)是与铅有高亲和力,与细胞对铅的适应性、反应性相关的细胞内铅受体和靶点蛋白质。本文主要从铅调高或诱导蛋白质表达、铅与锌依赖蛋白结合、与钙结合蛋白结合3个方面综述了目前发现的主要铅结合蛋白的结构与功能、分离鉴定、铅结合位点、铅结合能力以及结合铅以后对其功能的影响的研究进展。
- 周桂凤刘栋蒋云生
- 关键词：铅分子机制
- 铅对体外培养HK-2细胞毒性及碘化钾的拮抗作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究醋酸铅对人肾小管上皮细胞系HK-2细胞毒性剂量-反应关系及碘化钾(KI)的拮抗作用。方法体外培养HK-2细胞分为不同剂量染铅组:分别加入浓度为0,2.5,5,10,20和40μmol/L的醋酸铅;KI干预组:加入终浓度为40 mg/L的KI、37℃孵育30 min后加入上述不同剂量的醋酸铅。染毒72 h后,利用噻唑蓝法(MTT)测定各组细胞的存活率;用相差显微镜观察细胞形态改变;Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡并用Hoechst33258染色、荧光显微镜观察细胞凋亡形态。结果细胞存活率与醋酸铅浓度存在剂量-反应关系(r=-0.878,P<0.01),其IC50为15.68μmol/L;低剂量铅组部分细胞形态拉长呈长梭形,随着铅剂量增加,细胞变小、变圆,直至无完整细胞形态、细胞成团,脱壁漂浮;与对照组(0μmol/L铅)比较,各种剂量铅染毒组HK-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05),凋亡细胞核染色加深呈高亮蓝色、模糊、核明显固缩和碎裂;各剂量铅组加40 mg/L的KI,可使细胞存活率增加,IC50上升了3.33倍,细胞凋亡率下降,细胞形态改变明显改善。结论醋酸铅对HK-2细胞毒性存在明显剂量-反应关系,KI可部分拮抗铅的细胞毒性。
- 周桂凤刘栋乔玉峰彭佑铭杨波蒋云生
- 关键词：铅碘化钾HK-2细胞细胞毒性
- 铅抑制NF-κB、Bcl-2蛋白表达诱导人肾小管上皮细胞凋亡被引量：6
- 2008年
- 目的研究醋酸铅对人肾小管上皮细胞系HK-2细胞NFκB、Bcl-2表达的影响及与细胞凋亡的关系。方法体外培养HK-2细胞分为0、2.5、5、10、20μmol/L醋酸铅组,分别染毒72h,应用间接免疫荧光-流式细胞术检测HK-2细胞NF-κB、Bcl-2蛋白表达的改变,用Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡。结果随着染铅剂量增加HK-2细胞NF-κB、Bcl-2蛋白表达逐步降低,NF-κB与Bcl-2降低显著相关(r=0.71,P<0.01);细胞凋亡率随着铅剂量增加而增加,在5、10、20μmol/L铅组与对照组比较差别有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡率与NF-κB、Bcl-2蛋白表达呈明显负相关(r=-0.625,P<0.01;r=-0.709,P<0.01)。结论醋酸铅能下调HK-2细胞NF-κB、Bcl-2基因的表达,这可能是其诱导HK-2细胞凋亡的途径之一。
- 周桂凤蒋云生胡白英杨波乔玉峰刘栋
- 关键词：醋酸铅肾小管上皮细胞NF-ΚB凋亡
