国家自然科学基金(30500117)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：华中科技大学中国科学院东北林业大学更多>>
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- Sec-10影响神经肌肉接头突触后敏感性的研究(英文)被引量：3
- 2009年
- exocyst复合物在分泌过程中起重要作用.可是分子机理尚未研究透彻.通过TMP/UV的基因敲除方法,得到了exocyst复合物中一种组分sec-10的缺陷型线虫.药学结果显示这种线虫神经信号传递存在缺陷,可是电生理的方法证明在神经肌肉接头处的已报道离子型受体和野生型相比并未发生改变.因此猜测,sec-10并未直接影响神经肌肉接头处的离子型受体,而是通过其他途径来行使功能.
- 章雷李江丽高尚邦吴政星张蓉颖徐涛
- 关键词：神经肌肉接头
- 碳纤维超微盘电极的制备及对单囊泡胞吐动力学的高分辨研究被引量：2
- 2009年
- 利用改良的电化学腐蚀方法制备了碳纤维超微盘状电极,具有方法简便,电极尺寸可控、可多次使用等优点。扫描电镜和伏安表征实验表明电极密封效果良好、电化学性能优良。在鼠嗜铬神经瘤PC12细胞上,用超微盘电极实现了高时空分辨、高保真度的单囊泡胞吐测定。与常规微电极相比,能更准确地反应囊泡融合这一超快过程(毫秒级)的动力学过程。
- 李雷李照玉万敏张蓉颖
- 关键词：超微盘电极电化学检测囊泡胞吐
- 秀丽线虫基因敲除突变库中sec-10突变种系的筛选
- 2010年
- 从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的基因突变库中筛选出目的基因的突变种系,并对其进行分子机制的研究,是研究不同基因及其蛋白产物作用机制的一项基本技术.以sec-10突变种系的成功筛选为例,详细描述如何通过PCR检测方法从笔者实验室所构建的国内第一个秀丽线虫基因敲除突变库(可进行多达几百次的筛选量)中筛选出目的基因的突变种系,同时证明突变库的可用性.根据sec-10基因序列设计多套针对不同靶点的含干扰引物的巢式引物,通过凝胶电泳正确判断扩增产物的特异性和干扰引物对长片段产物的抑制特性,以选择有效的检测引物.简化了线虫复苏后的饲养方法,以取代恒温恒湿培养箱的使用.通过纯和致死平衡子的引入,克服了sec-10基因突变致死所导致的无法稳定传代的问题.总结了从秀丽线虫基因突变库中筛选突变种系的注意要点,为国内其它线虫基因突变库的筛选提供重要的参考意见.
- 李江丽张蓉颖
- 关键词：秀丽隐杆线虫基因敲除PCR检测
- 施硒对暗棕壤硒状况和森林蔬菜硒积累的影响被引量：4
- 2007年
- 以培育富硒森林蔬菜为目标，在暗棕壤上进行了荚果蕨、小叶芹、小根蒜、婆婆丁等4种山野菜施硒试验。硒肥种类为亚硒酸钠，施硒量为0．10～10．00mgkg^-1，直接施肥范围为0～15cm表土。经过一个完整的生长周期（1a）后测定土壤和植物硒指标。结果表明，典型暗棕壤对外源亚硒酸钠态硒具有较强吸收与保持能力，从低剂量至高剂量施人的硒有90％～70％以上仍保留在原施硒土层内；其中H2O可溶态硒占全硒的6．03％～3．78％，KH2PO4浸提的有效态硒占全硒的19．36％～37．54％，而且土壤全硒、KH2PO4浸提的有效态硒及H2O可溶态硒皆与最初的施硒量呈线性正相关。在土施强化供硒条件下，4种山野菜均能高量富集硒，其含硒量为对照的1．7～158．9倍；不同植物的富硒能力有差异，它们在递增施硒情况下高量富集硒的变化模式也各有特点。总体来看，山野菜含硒量与施硒量之间为非线性正相关关系，但在一定的较低施硒量范围内这种关系则是线性的，线性范围因植物而异；土壤的可溶态硒、KH2PO4浸提的有效硒甚至全硒等指标与山野菜含硒量之间亦均呈明显的非线性正相关，且施硒量较低时其关系亦表现为线性。初步得出，典型暗棕壤控制施硒是在近自然条件下培育富硒森林蔬菜并获取高富硒生物资源的有效途径；不过，强烈搅动的砂砾质暗棕壤却不利于硒肥保持和植物吸收，不适于富硒森林蔬菜栽培。
- 崔晓阳曹楷郝敬梅
- 关键词：暗棕壤亚硒酸钠土壤硒森林蔬菜
- PC12细胞中Synaptotagmin Ⅶ的沉默抑制了致密核心大囊泡的分泌
- 2009年
- Syt Ⅶ,因其具有比Syt Ⅰ和Syt Ⅸ更高的钙离子亲和力,以及在与脂质结合后表现出更慢的解离动力学过程,被认为在致密核心大囊泡分泌的慢速动力学过程中起着钙离子感受器的作用,而并不参与突触囊泡的快速分泌过程.然而迄今为止,Syt Ⅶ的亚细胞定位和其在胞内具体的生理学功能尚未完全清楚.在本研究中,我们首先应用全内反射荧光显微镜技术表明,在PC12细胞中Syt Ⅶ定位于致密核心囊泡.通过综合运用高时间分辨率的细胞膜电容测量和碳纤维微电极安培检测,确定了单独沉默内源性的Syt Ⅶ就可以明显减少PC12细胞中钙触发的致密核心囊泡和质膜的融合和抑制了融合孔的开放,特别是减少了致密核心大囊泡胞吐触发相的幅值,而对于其持续成分的速率则几乎没有影响.这些发现提示我们Syt Ⅶ在PC12细胞致密核心囊泡融合机制中作为钙感受器,对可释放致密核心大囊泡库的形成和维持起着非常重要的作用.
- 李江丽肖扬周围吴政星张蓉颖徐涛
- 关键词：SYNAPTOTAGMIN胞吐
- Sec-10基因敲除导致的线虫产卵障碍的研究被引量：2
- 2009年
- Exocyst复合物是由SEC-3、SEC-5、SEC-6、SEC-8、SEC-10、SEC-15、EXO-70和EXO-84共8种蛋白亚基组成的重要囊泡栓系因子.尽管已经被广泛地研究,但是对于该复合物的认识仍然有限.通过基因敲除的方法,获得了Sec-10基因突变的线虫,并发现该线虫存在产卵障碍的表型.在对性腺形态、精子功能、卵黄吸收、AC细胞的融合以及神经对产卵区域肌肉控制等产卵途径中若干关键因素的进一步研究中,发现Sec-10基因突变的线虫与野生型相比不存在明显区别.因此需要进一步的研究来阐明该表型产生的原因.
- 章雷张蓉颖
- 关键词：线虫EXOCYST产卵突变体
- SEC-10在秀丽线虫逆行行为中功能的研究
- 2010年
- 秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)是一种研究行为和神经系统相互关系的良好的模式生物,可以在实验条件下给予它物理、化学等多种外部刺激,也可以在分子水平改变其基因结构以改变线虫的行为方式,从而进一步研究神经系统中与行为相关的分子机制.以sec-10突变为遗传背景,采用一种秀丽线虫逆行行为的简单测定方式,研究发现sec-10突变导致线虫逆行动作增多,初步探讨了在突变体线虫的神经系统中重新表达野生型SEC-10可以回复该逆行行为缺陷.
- 李江丽张蓉颖
- 关键词：秀丽线虫
