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国家自然科学基金(30771886)

作品数:4 被引量:2H指数:1
相关作者:陆慧君陈启军尹继刚姜宁孙喜东更多>>
相关机构:吉林大学解放军第208医院天津工业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇原虫
  • 3篇疟原虫
  • 3篇恶性疟
  • 3篇恶性疟原虫
  • 3篇DBL
  • 2篇特性分析
  • 2篇红细胞
  • 1篇蛋白
  • 1篇血型
  • 1篇血型抗原
  • 1篇原核表达
  • 1篇软骨
  • 1篇硫酸软骨素A
  • 1篇膜蛋白
  • 1篇抗原
  • 1篇功能分析
  • 1篇恶性疟原虫海...
  • 1篇肝素
  • 1篇PLASMO...
  • 1篇CLONED

机构

  • 3篇吉林大学
  • 2篇解放军第20...
  • 1篇天津工业大学
  • 1篇中国农业科学...

作者

  • 3篇姜宁
  • 3篇尹继刚
  • 3篇陈启军
  • 3篇陆慧君
  • 2篇孙喜东
  • 1篇刘妍
  • 1篇张岩
  • 1篇杨春
  • 1篇常志广

传媒

  • 2篇中国寄生虫学...
  • 1篇寄生虫与医学...
  • 1篇Asian ...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 2篇2011
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
Analysis of var genes cloned from a Plasmodium falcivarum isolate in China
2012年
Objective:To analyse the rar gene repertoire and characterise the rhondroitin sulphate A (CSA)-binding activity of the Duffy-binding like(I)BI.) domains encoded by the var2csa gene of a Plasmodium falciparum(P.falciparum) isolate in Hainan Province,China.Methods:The sequences of var DBL1 regions were PCR-amplified,sequenced and the sequence characteristics was bioinformalically analysed.Recombinant proteins encoded by the var2csa genes were expressed and purified.The binding activities of the recombinant proteins to CSA receptor was detected by ELISA assays.Results:Fifty six unique DBI.a sequences were obtained,and the sequences represented similar diversity to the var genes of the genome parasite 3D7.There are two var2csa genes in the P.falciparum isolated from Hainan Province.Unlike in other falciparum parasites such as HB3,the two var2csa genes are more diverged.The receptor-binding capacity of DBL-5εand DBI.-6 e domains of HN var2CSA was studied.Conclusions:This work represented the diversity of rar genes of a P.falciparum isolate in China.
Ning JiangLi MengHui-Jun LuWei KangShuai PengWei-Qing PanJi-Gang YinQi-Jun Chen
关键词:MALARIAPLASMODIUMFALCIPARUMVARIATION
恶性疟原虫红细胞表面膜蛋白1DBLα区不同区段与血型抗原的结合特性分析被引量:1
2011年
根据大肠杆菌密码子组成特点,重新优化并合成FCR3S1.2株恶性疟原虫红细胞表膜蛋白1(PfEMPI)DBLα区基因序列,利用PCR的方法,将优化后的基因序列分为3段。分别将全长基因和3个基因片段在大肠杆菌中表达、纯化。通过重组蛋白与血型抗原的亲和试验,分析功能区与血型抗原是否具有亲和力。结果表明,重组的PfEMPl一DBLα全长蛋白质及分段表达的重组蛋白对血型抗原A、B均有特异性的亲和力。本实验结果为揭示恶性疟原虫的主要致病分子与人体细胞相互作用机制提供了实验依据。
张岩孙喜东刘妍尹继刚姜宁陆慧君陈启军
关键词:恶性疟原虫血型抗原
恶性疟原虫海南株var2csa基因DBL区蛋白的原核表达及功能分析被引量:1
2011年
目的克隆、表达恶性疟原虫海南株变异抗原基因(var)家族之一var2csa基因的血型抗原结合基团(duffy anti-gen-binding ligand,DBL)4、DBL5、DBL6区,比较其与硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)黏附能力的差异。方法 PCR扩增恶性疟原虫海南株基因组DNA中3个目的片段,将扩增产物与pMD18-T克隆载体连接,经酶切、测序鉴定正确后克隆至表达载体pET-22b上,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,并用组氨酸标签融合蛋白纯化柱(His GraciTrap)纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹(Western blotting)检测目的蛋白。ELISA检测不同DBL区重组蛋白与CSA的结合情况。结果 PCR扩增获得目的片段分别为996、859和894bp,酶切及DNA测序结果均显示重组质粒构建成功,在大肠埃希菌BL21(DE3)中成功表达并纯化3个DBL区重组蛋白,DBL4区、DBL5区和DBL6区的相对分子质量分别为Mr 439800,Mr 34500,Mr 36000。West-ern blotting检测结果显示,目的蛋白具有反应原性。ELISA结果显示,不同蛋白浓度条件下DBL5区均明显比其他两个DBL区的吸光度(A405值)高(P<0.05),表明DBL5区与CSA的黏附能力较强。结论 var2csa基因3个DBL区重组蛋白表达成功,DBL5区与CSA的黏附能力较强。
康巍常志广陆慧君姜宁尹继刚陈启军
关键词:恶性疟原虫DBL硫酸软骨素A
恶性疟原虫红细胞表面膜蛋白1 DBLα区不同区域与肝素的结合特性分析
2013年
目的克隆、表达恶性疟原虫红细胞表面膜蛋白1 DBα(PfEMP1-DBLα)及其3个分段区域编码基因,筛选出PfEMP1-DBα区与红细胞表面受体-肝素/硫化肝素亲和力最强的序列。方法根据大肠埃希菌密码子组成特点,重新优化并合成恶性疟原虫FCR3S1.2株PfEMP1-DBLα1245基因序列,采用PCR方法,将优化后的基因序列分DBLαA、DBLαB和DBLαC等3段扩增。分别将全长基因和3个片段基因亚克隆至PGEX-4T-1载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达。用谷胱甘肽-S-转移酶标签亲和层析法纯化表达产物。通过重组蛋白与肝素的亲和试验及糖胺聚糖(GAG)抑制试验,分析功能区与肝素的亲和力情况。结果含重组质粒的4个表达菌株(BL21-GEX-DBLα1245、BL21-GEX-DBLαA、BL21-GEX-DBLαB和BL21GEX-DBLαC)经IPTG诱导,获得以可溶形式存在的重组蛋白,相对分子质量(M_r 73 600、M_r 41 600、M_r 42500和M_r 41 500)与预测的融合蛋白大小相符。重组蛋白与肝素的亲和试验及GAG抑制试验结果表明,在PfEMP1-DBLα分段表达的3个功能区中,DBLα1245、DBLαA(1~142 aa)、DBLαB(143~284 aa)和DBLαC(285~415 aa)等4个重组蛋白均可与肝素结合,阴性对照GST不与肝素结合,其中DBLαC对肝素的亲和力最强。结论 PfEMP1-DBLα区与肝素/硫化肝素亲和力最强的序列为Q_(285)~Y_(415)(即DBLαC),该段序列在恶性疟原虫感染的红细胞与周围红细胞的黏附过程中起关键作用。
张岩孙喜东杨春张雅那宋盟陆慧君姜宁尹继刚陈启军
关键词:恶性疟原虫膜蛋白肝素
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