辽宁省自然科学基金(201202287)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：杨会军杨宁惠莲姜学钧更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SOX2在5-氟尿嘧啶处理的人喉癌Hep-2细胞中的表达及作用机制被引量：1
- 2014年
- 目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对人喉癌Hep-2细胞中干细胞转录因子SOX2表达的影响及机制,并分析SOX2拮抗5-FU诱导的细胞凋亡作用。方法 CCK-8法检测48 h内不同浓度5-FU对Hep-2细胞生长的抑制作用,统计抑制率和IC50值。Western blot法检测5-FU作用不同时间后SOX2的表达量,并检测PI3K/AKT信号活化情况。Hoechst染色法检测细胞凋亡。结果5-FU对Hep-2细胞生长抑制作用明显,IC50值为20.92μg/mL。随着时间的延长SOX2表达增高,48 h达到最大值,磷酸化AKT活化也随着时间的延长逐渐增加。使用PI3K/AKT信号特异性抑制剂LY294002处理后,SOX2表达被下调;Hoechst染色法显示细胞凋亡数增多。同时检测凋亡相关蛋白表达变化,结果显示Survivin、Bcl-2、BAX在5-FU处理的Hep-2细胞中表达均上升,但PI3K/AKT信号抑制后抗凋亡蛋白Survivin、Bcl-2被显著下调,凋亡蛋白BAX表达继续上调。结论 PI3K/AKT信号活化诱导SOX2表达在Hep-2细胞拮抗5-FU诱导的细胞凋亡中发挥了重要作用。
- 杨宁惠莲杨会军姜学钧
- 关键词：人喉癌SOX25-氟尿嘧啶P13KAKT
- RNAi沉默SOX2表达增强Hep-2化疗药物敏感性作用研究被引量：1
- 2014年
- 目的:研究SOX2表达对人喉癌上皮细胞Hep-2化疗敏感性的影响。方法:设计合成RNAi-SOX2序列,瞬时转染Hep-2细胞,Western blot法筛选沉默效率最好的RNAi-SOX2构建pGCsi-H1-SOX2质粒,并构建其对照质粒pGCsi-H1-NC,分别转染Hep-2细胞建立稳定沉默SOX2表达细胞株psiSOX2-Hep-2及其对照细胞株psiNC-Hep-2。CCK-8法检测SOX2表达沉默对Hep-2细胞对化疗药物敏感性的影响;Hoechst染色法检测SOX2表达沉默对化疗药物诱导Hep-2细胞凋亡的影响;Western blot法检测SOX2表达沉默对凋亡相关基因Survivin、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3表达的影响。结果:成功获取SOX2表达沉默细胞株psiSOX2-Hep-2及其对照psiNC-Hep-2细胞株,与psiNC-Hep-2细胞相比,psiSOX2-Hep-2中SOX2表达下降78%。SOX2表达沉默后,psiSOX2-Hep-2细胞对5-FU和紫杉醇的敏感性均增强,psiSOX2-Hep-2细胞48h的IC50值分别下降到8.12μg/ml和5.16μg/ml;同时,psiSOX2-Hep-2细胞凋亡数增多;抗凋亡基因Survivin、Bcl-2表达下降明显,凋亡基因Bax、cleaved caspase-3表达显著上升。结论:RNAi沉默SOX2表达将显著增强人喉癌上皮细胞Hep-2对5-FU和紫杉醇的敏感性。
- 杨宁惠莲杨会军姜学钧
- 关键词：喉肿瘤SOX2HEP-2药物敏感性
