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羽衣甘蓝泛素结合酶ubc7基因分离、原核表达及纯化被引量：2: 2013年; 为分离羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)自交不亲和系(S13-b S13-b)泛素结合酶7(ubc7)基因,探讨Ubc7重组蛋白的原核表达及纯化。利用CTAB的方法提取羽衣甘蓝柱头总RNA,通过RT-PCR的方法分离ubc7基因,将编码ubc7基因的cDNA序列亚克隆到pET-14b原核表达载体中,将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS中,利用IPTG进行诱导表达,并通过Ni2+-NTA树脂进行亲和层析的方法纯化重组蛋白。结果表明,获得的Boubc7含有一个长度为501 bp的开放读码框,编码一个含有166个氨基酸残基的蛋白质。预测BoUbc7的相对分子质量约为18.7 kDa,理论等电点(pI)为5.35。利用IPTG诱导的细菌蛋白中,SDS-PAGE显示出在分子量大小23 kDa处有蛋白特异性的表达,这与预测的His6融合的BoUbc7蛋白分子量相符;利用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析纯化后,成功获得了BoUbc7融合蛋白。该试验分离了羽衣甘蓝ubc7基因,并通过原核表达系统获得了BoUbc7重组蛋白,为进一步分析其生物学功能奠定了基础。; 蓝兴国李晓屿杨佳王艳红李玉花; 关键词：羽衣甘蓝泛素结合酶原核表达

单克隆抗体在植物研究中的应用: 2013年; 单克隆抗体是现代生命科学研究的重要工具。随着分子生物学的发展,单克隆抗体在植物研究中发挥着越来越重要的作用。本文综述了单克隆抗体在蛋白表达、蛋白定位、蛋白相互作用、植物成分的定性与定量、植物成分纯化、植物病害检测、标签抗体等方面研究中的应用。; 李晓屿李玉花蓝兴国; 关键词：植物单克隆抗体蛋白表达蛋白定位蛋白质相互作用

羽衣甘蓝柱头酵母双杂交cDNA文库的构建与分析被引量：1: 2010年; 目的:构建应用于酵母双杂交系统的羽衣甘蓝柱头cDNA文库。方法:以羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系为材料,提取柱头的总RNA,用亲和层析法分离纯化mRNA,利用CytoTrapXR建库试剂盒构建羽衣甘蓝柱头cDNA文库。结果:羽衣甘蓝柱头cDNA原始文库的库容量为2.5×105;扩增后文库的库容量约为4×108,重组率为96%,插入片段大小为0.4～3kb,平均长度在0.8kb左右。结论:构建了应用于酵母双杂交系统的羽衣甘蓝自交不亲和系柱头的cDNA文库,为探讨芸苔属植物自交不亲和的分子机理奠定了基础。; 杨佳王艳红李玉花蓝兴国; 关键词：羽衣甘蓝柱头 CDNA文库酵母双杂交

羽衣甘蓝S_(13-b)位点受体激酶基因的克隆及激酶结构域的原核表达被引量：1: 2010年; 目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构域的原核表达载体并进行重组蛋白质的原核表达和纯化。方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头的RNA,用RT-PCR法分离SRK13-b基因;将编码SRK13-b激酶结构域的序列插入大肠杆菌表达载体pET-14b中,构建原核表达质粒pET-SRK13-bCT,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,经0.1mmol/LIPTG诱导,用Ni-NTA亲和层析柱对SRK13-b激酶结构域蛋白进行纯化。结果:分离获得羽衣甘蓝SRK13-b基因的长度为2571bp,编码856个氨基酸,GenBank收录号为EU180597;对SRK13-b激酶结构域蛋白进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE显示相对分子质量约43×103的蛋白质特异表达,对表达产物进行分离纯化,获得了SRK13-b激酶结构域的融合蛋白。结论:羽衣甘蓝SRK13-b基因的克隆及激酶结构域的原核表达,为研究SRK的功能及自交不亲和性奠定了基础。; 蓝兴国杨佳王艳红李玉花; 关键词：羽衣甘蓝自交不亲和原核表达纯化

羽衣甘蓝授粉过程中柱头蛋白质的泛素化被引量：6: 2010年; 分析自花授粉与异花授粉后的羽衣甘蓝柱头蛋白质泛素化变化的结果表明,自花授粉30min后的柱头蛋白质泛素化水平显著增加,45min时达到峰值;异花授粉的柱头蛋白质泛素化水平没有变化。; 蓝兴国杨佳赵昕于凯李玉花; 关键词：羽衣甘蓝自交不亲和柱头

SRK-SCR转基因拟南芥自交不亲和性的研究进展被引量：3: 2013年; 十字花科植物自交不亲和性(SI)受S-位点(S-locus)编码的SRK和SCR控制,它们分别是柱头和花粉中的SI特异识别因子。野生型拟南芥不具有SI,而近来通过转基因手段将外源SRK-SCR基因转入野生型拟南芥可以使其表现SI,由此建立了一个可用于十字花科SI研究的新型模式植物。本文综述了利用这种转基因拟南芥在SI机制及进化方面取得的进展,包括SI新基因的挖掘、候选基因功能分析和拟南芥生殖模式的转变等。; 郝艾馨蓝兴国王宇李玉花; 关键词：自交不亲和性拟南芥 SRK SCR

植物富含半胱氨酸蛋白的研究进展: 2011年; 富含半胱氨酸蛋白(cystein-rich proteins,CRPs)是动植物中广泛存在的一类小的分泌性蛋白,具有广泛的生物学功能,如防御、蛋白酶抑制、重金属解毒等。人们在深入研究植物CRPs防御功能的同时,发现CRPs还参与调节植物的生长、发育、生殖等。本文综述了植物CRPs的分类、结构及其在植物生长发育、生殖信号转导等方面的研究进展。; 赵昕李玉花蓝兴国; 关键词：生长发育

芸苔属植物自交不亲和性S-受体激酶的内吞作用及信号传递网络被引量：4: 2012年; 文章就芸苔属植物自交不亲和性反应中S-受体激酶的内吞作用以及下游信号传递网络的研究进展作一综述。; 杨佳李玉花蓝兴国; 关键词：自交不亲和性内吞作用细胞骨架

植物类受体胞质激酶的结构和功能被引量：5: 2010年; 本文介绍植物类受体胞质激酶的结构及其在植物的抗病、抗逆、生长发育、自交不亲和、油菜素内酯信号转导等方面的功能。; 于凯李玉花蓝兴国; 关键词：抗病性抗逆性自交不亲和

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