国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-42-G11)
- 作品数：36 被引量：122H指数：6
- 相关作者：邵华斌罗青平张腾飞王红琳温国元更多>>
- 相关机构：湖北省农业科学院长江大学华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项湖北省农业科技创新中心资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 六株湖北省ALV-J地方分离株的gp85基因序列分析
- 2015年
- 通过对ALV-J病毒gp85基因进行分析,发现6个湖北分离株与国际标准的肉鸡分离毒株HPRS103株核苷酸序列相似性为93.9%~98.2%,氨基酸序列相似性为88.8%~97.8%。其中Hu B09XZ01株、Hu B09JY03株、Hu B09JY04株与HPRS103株核苷酸序列相似性达到98.1%~98.2%,氨基酸序列相似性达到97.4%~97.8%。系统遗传进化表明,湖北分离株Hu B09XZ01株、Hu B09JY03株、Hu B09JY04株与ALV-J国际标准毒株HPRS103遗传距离最近。通过分析表明,湖北省ALV-J主要来源于肉鸡,大都通过引种感染,这对于湖北省禽白血病的净化以及家禽品种的选育具有重要参考意义。
- 汪宏才罗青平温国元张腾飞杨峻艾地云
- 关键词：禽白血病J亚群进化树
- 湖北地区禽源性空肠弯曲菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：5
- 2015年
- 为了解湖北省禽源空肠弯曲菌的流行病学及耐药性情况,从武汉市及其周边地区采取禽源样品276份,其中肛拭子175份,盲肠内容物101份。共分离出50株空肠弯曲菌,分离率为18.12%,其中肛拭子分离20株,盲肠内容物分离30株。结果显示,不同采样途径空肠弯曲菌的分离率不同,盲肠内容物分离率高于肛拭子。采用定性测定纸片扩散法对以上分离的菌株进行药敏试验,50株空肠弯曲菌分离株对氨基糖苷类药物敏感性最高(S≥66.0%),其次分别是红霉素(S=70.0%)和磺胺甲基异恶唑(S=58.0%)。对喹诺酮类药物耐药性最强(R=100%)。
- 董俊韩梅邵华斌罗青平刘国平张腾飞
- 关键词：弯曲菌耐药性
- 湖北省地方鸡主要疾病流行病学调查被引量：6
- 2013年
- 通过对2009~2012年湖北省部分地区农村规模化饲养地方鸡主要疾病进行实地调查和分析,共调查了146个养鸡户(场),329 230只雏鸡及青年鸡和成年鸡的主要疾病流行情况。调查表明,雏鸡及青年鸡的主要疾病有新城疫、禽流感、白痢等9种疾病,共调查144 300只,发病48 480只,发病率为33.6%;死亡15 440只,病死率31.8%。成年鸡主要疾病有新城疫、禽流感和巴氏杆菌病等7种疾病,共调查184 930只,发病54 575只,发病率29.5%,死亡16 388只,病死率30.0%。
- 杨峻罗青平温国元王红琳罗玲艾地云张蓉蓉汪宏才张腾飞邵华斌
- 关键词：地方鸡流行病学调查病原分离鉴定
- 中国鸽病的流行及防控现状被引量：14
- 2015年
- 对危害养鸽业的主要疫病的流行及防控现状进行了综述,重点对鸽新城疫、鸽流感、鸽痘、鸽沙门氏杆菌病、鸽大肠杆菌病、鸽毛滴虫病、鸽念珠菌病的流行特点、防控措施进行了阐述,为深入研究鸽病的防控提供思路和参考。
- 罗青平温国元王红琳张蓉蓉汪辉邵华斌
- MPN-PCR法定量检测武汉鸡肉制品中的空肠弯曲菌被引量：1
- 2015年
- 空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）是引起人类细菌性腹泻的主要人畜共患病原菌之一,严重时可导致人类格林-巴利综合征。其中鸡肉污染导致的食源性传播是人类感染的重要原因。为了调查武汉市鸡肉制品的空肠弯曲菌污染情况,运用最可能数法（MPN）及聚合酶链式反应（PCR）技术结合,即MPNPCR方法 ,对市场采集的128份鸡肉样品进行了空肠弯曲菌的定量检测,结果阳性检出率为18.75%,其中鲜鸡肉检出率为28.26%,冻鸡肉检出率为13.41%,含菌量范围为3.6-92.0 MPN/g。
- 韩梅董俊邵华斌罗玲罗青平潘玲张腾飞
- 新城疫活疫苗(V4/HB92克隆株)对鹌鹑、鸽临床试验被引量：1
- 2014年
- 应用兽药GMP车间生产的3批新城疫活疫苗(V4/HB92克隆株)中试产品分别在安陆和云梦对7 500只鹌鹑和4 500只鸽进行了临床效力试验。安全试验结果表明,3批疫苗用10倍剂量分别对30日龄的鹌鹑和鸽滴鼻,观察10 d,无任何毒副反应。免疫效力试验分为滴鼻和饮水2种方法,3批疫苗滴鼻免疫3 000只鹌鹑,免疫后2周抗体开始上升,ND-HI达3.9 log2,抗体持续16周;饮水免疫的3 000只鹌鹑,2周抗体为3.1 log2,抗体持续8周。三批疫苗滴鼻免疫1 500只鸽,免疫2周ND-HI抗体达4.1log2,抗体持续8周;饮水免疫的1 500只鸽,免疫后2周抗体为3.8 log2,持续8周抗体仍然为4.1 log2。试验攻毒保护力测定结果与ND-HI抗体水平呈正相关。
- 杨峻王红琳温国元罗青平汪宏才艾地云张蓉蓉罗玲张腾飞邵华斌
- 关键词：新城疫活疫苗鹌鹑
- 肉鸽H9亚型禽流感的诊断与病毒分离及鉴定被引量：1
- 2015年
- 通过分子PCR检测,初步证明在湖北一发病肉鸽群感染H9亚型禽流感病毒。病原分离后,盲传3代,其血凝效价达到109~1011,经生物学特性进行测定,其鸡胚半数致死量为107.5,9日龄鸡胚平均致死时间为54.3 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数为1.8,6周龄小鸡静脉接种致病指数为2.0,证明该H9亚型禽流感为毒力较强。将该病毒回归非免疫肉鸽,能产生典型的H9亚型禽流感症状,采集其肺、喉头、泄殖腔等病变组织进行病毒分离,均可分离到H9亚型AIV。
- 罗青平汪辉张蓉蓉温国元王红琳邵华斌
- 关键词：肉鸽H9亚型禽流感病毒
- 产气荚膜梭菌肠毒素cpe阳性双重荧光定量PCR方法的建立及应用被引量：3
- 2017年
- 为了建立一种双重荧光定量PCR方法检测肠毒素cpe阳性的产气荚膜梭菌,试验通过对部分发表在NCBI中的产气荚膜梭菌序列进行比对,找到其α毒素和肠毒素cpe相对保守的序列,根据保守序列设计合成2对引物和1对探针,以构建的含有α毒素和cpe序列的克隆载体作为标准品,进行系列条件优化及特异性、灵敏性和重复性试验。结果表明:该方法具有很好的特异性和重复性,外毒素cpa的灵敏度为1.5×10^(-2)ng/m L,且在1.5×104~1.5×10^(-2)ng/m L内Ct值与阳性质粒浓度的对数值呈很好的线性关系,R2值达到0.991;肠毒素cpe的灵敏度为1.8×10^(-2)ng/m L,且在1.8×103~1.8×10^(-2)ng/m L内Ct值与阳性质粒浓度的对数值呈很好的线性关系,R2值达到0.996;该方法对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌等细菌核苷酸无交叉反应;批间和批内重复性良好;同时对实验室保存的临床分离的疑似菌株用建立的荧光定量方法进行检测,结果临床分离菌株均为A型产气荚膜梭菌。说明该双重荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性强和重复性好。
- 张蓉蓉张腾飞艾地云罗青平温国元王红琳邵华斌
- 关键词：产气荚膜梭菌
- 禽霍乱禽霍乱、新城疫二联灭活疫苗免疫攻毒试验与HI试验的平行关系研究被引量：3
- 2016年
- 对8批禽霍乱、新城疫二联灭活疫苗进行新城疫组分的效力检验,在检测新城疫血凝抑制效价(HI)的同时,进行新城疫病毒强毒攻击试验,旨在寻找抗攻毒保护与HI抗体效价之间的平行关系。结果表明:免疫剂量与HI抗体效价和攻毒保护率呈正相关,免疫40、20、10、5μL剂量组攻毒保护率和HI抗体效价分别为94.9%(75/79)、5.2 log_2,87.5%(70/80)、4.4 log_2,29.1%(23/79)、2.7 log_2,11.4%(9/79)、2.1 log_2;对照组攻毒保护率为0(0/10),HI抗体效价≤2.0 log_2;新城疫HI抗体效价与攻毒保护率也呈正相关,当HI<3.0 log_2,攻毒保护率为4.1%;HI=3.0 log_2,攻毒保护率为22.9%;HI=4.0 log_2,攻毒保护率为87.7%;HI=5.0 log_2,攻毒保护率为94.4%;HI=6.0 log_2,攻毒保护率为100%。本研究为制定疫苗质量标准中新城疫病毒株的效力检验方法和标准提供实验室理论依据。
- 王红琳汪宏才杨峻温国元罗青平罗玲艾地云张蓉蓉张腾飞邵华斌
- 关键词：新城疫禽霍乱疫苗攻毒保护率HI抗体效价
- 致禽肾脏、肠道病变大肠杆菌菌影的制备及其裂解效率的测定
- 2017年
- 为制备高裂解效率的致禽肾脏、肠道病变大肠杆菌菌影,本研究通过编码15个柔性氨基酸linker采用融合PCR法将噬菌体中Φ174的裂解蛋白E基因和金黄色葡萄球菌核酸酶A基因(SN)串联(E-15L-SN),插入温控表达质粒pBV220,构建重组温控双裂解表达质粒(pBV-ES),采用PCR扩增其温控双基因裂解表达盒(DLS-ES)插入E.coli-Pasteurella(大肠杆菌和巴氏杆菌)穿梭质粒pBA1100,构建重组温控双基因裂解穿梭质粒pBA1100-DLS-ES。该质粒可以通过温控制备高裂解率的E.coli和Pasteurella两种菌的菌影。本实验将构建的pBA1100-DLS-ES电转化至致禽肾脏、肠道病变E.coli中,28℃集菌,42℃温控诱导裂解蛋白E和核酸酶A表达。OD_(600nm)值及电镜结果表明,双基因裂解率高于单基因,同时收集菌影时间也比单基因裂解短,42℃诱导2 h含双裂解基因的菌液处理菌体裂解率达到99.9999%,本实验利用菌影形成机制将含青霉素抗性的致禽肾脏、肠道病变E.coli制备成菌影,为新型菌影疫苗的制备提供实验依据。
- 赵星程伊洛卢琴邵华斌杨玉莹罗青平
- 关键词：穿梭质粒
