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国家社会公益研究专项计划(202DIA50034-03)

作品数:4 被引量:8H指数:2
相关作者:徐宝梁王珣曹际娟董薇段玉玺更多>>
相关机构:中国检验检疫科学研究院辽宁出入境检验检疫局沈阳农业大学更多>>
发文基金:国家社会公益研究专项计划国家质检总局科技计划项目国家标准化管理委员会项目更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 4篇转基因
  • 4篇基因
  • 3篇转基因小麦
  • 3篇小麦
  • 2篇实时荧光
  • 2篇实时荧光PC...
  • 2篇PCR
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白检测
  • 1篇蛋白亚基
  • 1篇亚基
  • 1篇油菜
  • 1篇实时PCR
  • 1篇转基因油菜
  • 1篇基因成分
  • 1篇谷蛋白
  • 1篇谷蛋白亚基
  • 1篇高分子量谷蛋...
  • 1篇高分子量谷蛋...
  • 1篇SYBR

机构

  • 1篇黑龙江省农业...
  • 1篇沈阳农业大学
  • 1篇中国检验检疫...
  • 1篇辽宁出入境检...

作者

  • 1篇邱驰
  • 1篇徐宝梁
  • 1篇段玉玺
  • 1篇董薇
  • 1篇曹际娟
  • 1篇王珣

传媒

  • 2篇麦类作物学报
  • 1篇东北农业大学...
  • 1篇沈阳农业大学...

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2007
  • 1篇2005
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
转基因小麦的定性PCR筛选检测技术被引量:3
2007年
为了建立转基因小麦的PCR检测方法标准,以B73、B72、B102三个被转入外源高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)基因的转基因小麦品系为材料,对目前国内外转基因小麦中通用的标记基因bar和uid A、NOS终止子和Ubiquitin启动子进行了定性PCR的筛选检测,在国内外首次找到了小麦中特有的内参照基因麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D),设计并合成了麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D)和Ubiquitin启动子的引物序列,并对PCR反应条件进行了优化,PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后,可以检测到预期大小的目的片段。同时对PCR产物用实时荧光定量PCR进行了确证实验,并得到预期的结果。定性PCR最低检测灵敏度为0.5%(w/w)。建立的转基因小麦定性PCR筛选检测方法具有通用性。
栾凤侠张洪祥白月
关键词:小麦转基因PCR
SYBR~ Green I实时荧光PCR鉴定检测转基因油菜RT73品系被引量:1
2007年
根据转基因油菜RT73品系转入的外源基因质粒图谱,设计品系鉴定的特异性引物,进行SYBR!Green I实时PCR检测,建立转基因油菜品系鉴定的SYBR Green I实时PCR方法。同时针对油菜FatA基因设计出内源基因。结果表明:应用实时PCR技术,利用SYBR Green I染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到RT73品系特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,且通过溶解曲线确定其熔点值为80.2(±0.5)。SYBR Green I实时PCR能通过溶解曲线有效地区分特异性产物、非特异性产物以及引物二聚体,是鉴定转基因油菜RT73品系的新方法。
邱驰董薇曹际娟段玉玺
关键词:SYBR转基因油菜
高分子量谷蛋白亚基转基因小麦检测技术的研究被引量:3
2005年
针对该实验材料转入的外源基因选择了标准中通用的外源基因CaMV35S,NOS,bar和植物内源基因tRNALeu作为特异性引物,对影响定性PCR检测(反应体系:氯化镁浓度,引物和模板浓度;反应条件:退火温度和时间,循环数等)的主要条件进行了实验优化和选择,同时对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果表明,可以检测到CaMV35S,NOS,bar外源基因预期大小的目的条带,表明定性PCR检测所优化的条件适合转基因小麦。实验还测定了定性PCR最低检测灵敏度为1%(w/w)。同时对转入外源目的基因进行了表达蛋白的检测,蛋白电泳结果表明检测出1Dx5亚基和1Dy10亚基。
栾凤侠张洪祥徐宝梁白月
关键词:转基因小麦蛋白检测
小麦中转基因成分PCR与实时荧光PCR的定性检测低限被引量:1
2009年
为了确定小麦转基因成分PCR和实时荧光PCR方法的定性检测低限,将转基因小麦B73与非转基因小麦(检测外源基因)、小麦与大米(检测内源基因)分别进行质量分数配比后提取DNA用于测定相对检测低限,再将100%转基因小麦B73的DNA进行浓度稀释用于测定绝对检测低限,并应用已知的NOS、bar、ubiquitin,ui-dA(GUS)外源基因和Wx012、GAG56 D内源基因的引物和探针对模板DNA分别进行PCR与实时荧光PCR扩增。结果表明,最终确定PCR方法检测小麦转基因成分的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.5 ng/μL;实时荧光PCR方法的相对检测低限为0.1%(质量分数),绝对检测低限为0.01 ng/μL。所确定的检测低限可满足国家对转基因产品的最低标识要求。
白月栾凤侠王珣
关键词:转基因小麦PCR
共1页<1>
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