国家自然科学基金(30500172)
- 作品数：7 被引量：21H指数：2
- 相关作者：肖波黄志凌吴刘亦文杨璞吴小妹更多>>
- 相关机构：中南大学中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马EphA5及ephrinA3的表达及意义被引量：1
- 2007年
- 目的探讨颞叶癫痫发作后海马EphA5及ephrinA3基因的表达变化和轴突出芽的关系。方法建立氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型,利用原位杂交方法检测致痫后12h、24h、7d、15d、30d、60d海马CA3区、CA1区EphA5及ephrinA3 mRNA的表达,快速Golgi染色观察CA1区的轴突出芽。结果致痫后,EphA5 mRNA在CA3区表达下调,ephrinA3 mRNA在CA1区表达下调,均在7d降至最低点,与对照组相比差异有显著意义(P<0.01),此后逐渐回升,但15d时仍低于对照组(P<0.05),在30d和60d与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。快速Golgi染色显示,对照组大鼠CA1区轴突走行正常,匹罗卡品致大鼠SE后7dCA1区锥体细胞层出现显著增多的轴突染色。结论CA3区的EphA5和CA1区的ephrinA3的表达下调可能与CA1区的轴突出芽、突触重建有关。
- 刘卫平肖波李蜀渝卢晓琴
- 关键词：颞叶癫痫匹罗卡品轴突出芽
- 颞叶癫痫大鼠海马Akt蛋白表达变化的研究被引量：6
- 2007年
- 目的动态观察颞叶癫痫大鼠神经元磷酸化Akt(phospho-Akt)蛋白的表达变化,探讨其在癫痫发生发展中的作用。方法清洁级SD雄性成年大鼠36只,随机分为正常对照组、诱发大鼠癫痫持续状态(statusepilepticus,SE)后3h、6h、12h、24h、3d组。用氯化锂LiCl和匹罗卡品(PILO)制备癫痫动物模型,应用免疫组织化学染色技术检测致痫后各时间点磷酸化Akt蛋白表达情况。结果免疫组织化学法显示正常组与假手术组大鼠海马CA1、CA3区可见少量磷酸化Akt阳性细胞,两组间差异无统计学意义(P>0.05);模型组可见CA1、CA3区Akt阳性细胞增加(P<0.01),6h达到高峰,3d回到对照组水平。结论上调磷酸化Akt蛋白表达有利于减少海马神经元凋亡,可能是保护神经损伤的机制之一。
- 吴志国毕方方黄志凌李国良肖波
- 关键词：氯化锂匹罗卡品癫痫模型马来酸桂哌齐特
- 姜黄素对癫痫持续状态后海马内质网应激相关分子表达的影响被引量：10
- 2007年
- 目的探讨姜黄素对癫痫持续状态(SE)后海马内质网应激(ERS)标志分子免疫球蛋白结合蛋白(BiP)和ERS相关促凋亡分子如生长停滞、DNA损害可诱导基因153(GADD153)表达的影响。方法将90只SD大鼠随机分入SE组、姜黄素组和对照组。建立氯化锂-匹罗卡品大鼠SE模型。应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)动态观察SE后海马BiP和GADD153的转录状况。结果(1)与对照组相比,SE组SE后2、4、6、24h BiP mRNA表达升高(P<0.01),6 h达高峰,24 h开始下降(P<0.01),72 h恢复至正常水平;姜黄素组BiPmRNA表达的动态变化同SE组类似,但显著低于SE组(P<0.05或0.01)。(2)与对照组比,SE组SE后2、4、6、247、2 h GADD153 mRNA显著上调(P<0.01),SE后2 h达高峰,24 h开始下降(P<0.01)。姜黄素组仅于SE后2、4 h GADD153 mRNA表达明显高于对照组(P<0.01),且较SE组低(P<0.01)。结论姜黄素有可能成为在体抑制ERS的有效药物;减轻ERS、抑制GADD153表达可能是姜黄素在SE后发挥神经元保护作用的重要机制。
- 黄志凌肖波王蓉张贺
- 关键词：姜黄素癫痫持续状态内质网应激
- 大鼠脑内突触后致密物蛋白质的提取及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的提取纯度高、易分离溶解的突触后致密物(PSD)蛋白质。方法应用蔗糖密度梯度离心法,逐次获取P2,突触小体和PSD-1;应用Western blot检测PSD-1蛋白质的纯度;对PSD-1运用膜顺序提取法获取可溶性蛋白PSD-2;应用双向凝胶电泳技术分离PSD-1与PSD-2蛋白质点,PDQuest软件分析比较其数目差异。结果突触后标志分子PSD-95在P2成分、突触体和PSD-1 3组成分中均呈免疫染色阳性,而突触前标志分子突触素在PSD-1成分中呈免疫阴性。从PSD-1蛋白中电泳分离到286±25个蛋白质点而显著低于从PSD-2中分离到720±17个蛋白质点(P<0.01)。结论蔗糖密度梯度离心联合膜顺序提取法可获得纯度高、易分离溶解的PSD蛋白质。
- 周颖黄志凌肖波吴小妹吴刘亦文杨璞
- 关键词：双向凝胶电泳
- 预防癫痫的实验研究进展被引量：1
- 2007年
- 近年来,以癫痫发生期出现的一系列神经生物学改变为靶点,从保护神经元、抑制苔藓纤维出芽、干预胶质细胞相关分子、炎症免疫等角度,已开展了大量实验研究,旨在预防癫痫。本文对此进行综述。
- 黄志凌王剑虹肖波
- 关键词：癫痫
- 颞叶癫痫相关突触后致密物蛋白质的蛋白质组学筛选研究被引量：2
- 2008年
- 目的筛选颞叶癫痫（TLE）相关突触后致密物（PSD）蛋白分子。方法建立氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型；收集颞叶癫痫组（TLE组）、非颞叶癫痫组（非TLE组）以及正常对照组（Norm）3组的新鲜全脑组织，联合应用蔗糖密度梯度离心和膜顺序提取技术提取PSD；进行双向凝胶电泳，并通过PDQuest图像分析软件比较分析，筛选TLE组特异性和差异性表达的蛋白质点；选取部分差异蛋白质点进行取MALDI—TOF—MS质谱鉴定；应用Western验证部分所鉴定蛋白质在PSD中的表达状况。结果与Norm和非TLE组比较，TLE组中存在40个差异表达蛋白质点，表达上调的主要有热休克蛋白27（HSP-27）、果糖二磷酸醛缩酶（FBA）、肌酸激酶（CK）、甲状腺受体相互作用蛋白6（TRIP6）、髓鞘碱性蛋白S（MBP）、LIM结构域（LIM）；表达下调的主要有细胞骨架蛋白、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶（PPIase）、分选连接蛋白3（SNX3）、乌头酸水合酶（ACO）、甘油醛三磷酸脱氢酶（GAPDH）、琥珀酸辅酶A连接酶（SCOAL）。HSP27和微管蛋白仅、SNX3在TLE、非TLE和Norm3组PSD中均免疫染色阳性。结论TLE组PSD蛋白质差异性表达可能是脑损伤后可塑性反应的结果，但其表达量改变的程度可能与颞叶癫痫形成有关，可视为促／抗TLE形成的重要候选分子。
- 黄志凌周颖肖波吴军吴小妹杨璞吴刘亦文
- 关键词：癫痫颞叶蛋白质组学
- 颞叶癫痫大鼠突触后致密物中差异性表达蛋白的筛选和鉴定
- 2008年
- 目的筛选和鉴定颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)大鼠模型突触后致密物(postsynaptic density,PSD)中差异性表达的蛋白质。方法建立氯化锂-毛果芸香碱TLE大鼠模型,收集TLE组和健康对照组大鼠新鲜全脑组织,联合应用蔗糖密度梯度离心和膜顺序提取技术提取PSD蛋白质,进行双向凝胶电泳,通过PDQuest图像分析软件筛选TLE组差异性表达的蛋白质点,并应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对其进行鉴定。结果与健康对照组比较,TLE组存在70个差异性表达PSD蛋白质点,其中表达上调的蛋白质主要包括果糖二磷酸醛缩酶、肌酸激酶和热休克蛋白27,表达下调的蛋白质主要包括微管蛋白、肌动蛋白、中间丝蛋白α和脯氨酰顺反异构酶。结论TLE大鼠PSD中存在差异性表达蛋白质,其异常表达可能与TLE的形成、发作或神经元保护有关。
- 黄志凌周颖肖波吴小妹吴刘亦文杨璞
- 关键词：颞叶癫痫蛋白质谱双向凝胶电泳
