国家高技术研究发展计划(2006AA10Z316)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 相关作者：何国庆阮晖郭钦张伟苏忠锐更多>>
- 相关机构：浙江大学温州医学院江苏大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 酿酒酵母表面展示表达系统及应用被引量：10
- 2008年
- 酵母细胞表面展示表达系统是一种固定化表达异源蛋白质的真核展示系统,即把异源靶蛋白基因序列与特定的载体基因序列融合后导入酵母细胞,利用酿酒酵母细胞内蛋白转运到膜表面的机制(GPI锚定)使靶蛋白定位于酵母细胞表面并进行表达。它利用细胞表面展示技术使外源蛋白固定化于细胞表面,从而生产微生物细胞表面蛋白,可应用于生物催化剂、细胞吸附剂、活疫苗、环境治理、蛋白质文库筛选、高亲和抗体、生物传感器、抗原/抗体库构建、免疫检测及亲和纯化、癌症诊断等领域。主要介绍了该技术的基本原理、研究现状、应用及发展前景。
- 郭钦张伟阮晖何国庆
- 关键词：酿酒酵母凝集素
- 酿酒酵母表面展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶学性质研究被引量：2
- 2014年
- 固定化酶是酵母表面展示技术的1个重要应用方向。本文应用食品级酵母展示表达系统进行表达,成功获得具有生物活性且固定在酿酒酵母细胞表面的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,并测定其酶学性质。结果表明,与分泌表达的自由酶相比,展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质发生了改变。其最适温度为60℃,热稳定性增强。50℃保温3 h,对酶活几乎没有影响。60℃保温1 h后的酶活为初始酶活的129.2%。随着该温度下保温时间的延长,酶活迅速下降,保温3h后的酶活为初始酶活的64.6%。70℃保温1 h,酶活增加到初始酶活的109.2%;1 h后酶活开始下降;70℃保温3 h后残留酶活仅为初始酶活的35.8%。展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶最适pH为6.0,在pH 4-7范围内酶的稳定性较好。
- 郭钦阮晖张伟何国庆
- 关键词：Β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶学性质酿酒酵母
- 基于α-半乳糖苷酶基因为筛选标记的酿酒酵母诱导型表达载体的构建及应用
- 2012年
- 以α-半乳糖苷酶基因为筛选标记,构建GAL1诱导型启动子介导的酿酒酵母表达载体YGM-α-gal质粒,将枯草芽孢杆菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆到此载体中,构建质粒YGMPA-α-gal,转化宿主酵母后,实现β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酿酒酵母中的分泌表达.结果表明:在2%半乳糖诱导下,摇瓶发酵24h后分泌表达的β-葡聚糖酶活性达到411.9U爛mL-1,而在培养60h后,发酵液中α-半乳糖苷酶活性可达64.2U爛mL-1.说明α-半乳糖苷酶基因可用作酿酒酵母表达载体转化的有效筛选标记,为食品级酿酒酵母表达系统的构建提供了新选择.
- 张伟郭钦阮辉何国庆
- 关键词：酿酒酵母Β-1,3-1,4-葡聚糖酶
- 一株来自河南省的雪莲菌TK3优势菌相分析被引量：4
- 2011年
- 对一株来自河南省的雪莲菌TK3进行初步菌相分析,扫描电镜结果表明:TK3是由乳酸菌及酵母菌构成的混菌共生体系,菌体附着在基质上,形成紧密不易分离的颗粒。对其菌相进行分离纯化得到6种优势菌,经镜检分析、生理生化分析及16S rDNA/26S rDNA鉴定,鉴定结果分别为:乳明串珠菌(Leuconostoc lactis)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、单孢酿酒酵母(Kazachstania unispora)、马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)以及Exigua酿酒酵母(Kazachstania exigua),在发酵乳中存在的数量级分别为107、107、107、106、106、107CFU/mL,并且在4℃存放7d后各个菌群数量仍保持稳定。
- 高洁张佳佳顾丰颖张小燕苏忠锐阮晖何国庆
- 关键词：菌相分析扫描电镜
