浙江省自然科学基金(Y305251)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：浙江省农业科学院浙江师范大学浙江大学更多>>
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- 大肠杆菌异质型ACCase亚基基因accB重组表达载体的构建和原核表达被引量：1
- 2009年
- 生物素羧基载体蛋白(biotin carboxyl carrier protein,BCCP)负责将羧基从生物素羧化酶转移到羧基转移酶上,对于长链脂肪酸的从头合成与种子含油量的形成具有十分重要的作用。以大肠杆菌E.coli DH5α的DNA为模板,根据大肠杆菌基因组的Genbank中的核苷酸序列,设计2条特异引物进行扩增,克隆了大肠杆菌乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACCase)的生物素羧基载体蛋白亚基基因accB,构建accB的原核表达载体pGEX-4T-accB,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株,IPTG诱导进行融合表达,成功诱导表达了GST-accB融合蛋白,大小为43 kDa,该基因的原核表达为蛋白的纯化和进一步研究其功能及应用打下了良好的基础。
- 王伏林郎春秀吴关庭陈锦清
- 关键词：ACCASE原核表达
- 大肠杆菌乙酰辅酶A羧化酶accD亚基表达载体的构建及遗传转化研究被引量：9
- 2011年
- 为探索大肠杆菌异质型乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的β-CT亚基accD基因对油料作物含油量的影响,将目的基因E.coli accD(eaccD)与拟南芥Rubisco小亚基(rbcS)转运肽基因融合,构建以油菜Napin启动子驱动的种子特异表达载体。本试验应用农杆菌介导法,将该表达载体转入油菜,通过PCR检测获得了7个阳性转基因株系,RT-PCR检测其中3株,证明eaccD基因在转基因株系的种子中转录,在转基因植株叶片中不转录,说明该表达载体转入油菜中能引起植株种子eaccD基因的特异表达。同时分析还表明转基因株系的含油量与对照植株相比提高约9%。
- 王伏林郎春秀刘仁虎吴关庭冯都华陈锦清石春海
- 关键词：油菜ACCASE含油量
