广东省医学科学技术研究基金(A2010460)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：杜艳蕾聂玉强谷广伟陈墅圳徐言更多>>
- 相关机构：广州医科大学广州市第一人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA靶向抑制CDCA5基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向抑制细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)基因表达对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响。方法优化siRNA转染条件,将3条靶向抑制CDCA5基因的siRNA载体片段(序列1、2和3)分别高效转染人肝癌HepG2细胞(A、B和C组),并设阴性对照组(NC组)及空白组。免疫印迹法检测转染72h各组CDCA5蛋白的表达水平。CCK-8法检测转染24、48、72、96、120h各组细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测各组转染48h的凋亡情况。结果 A、B和C组的CDCA5蛋白水平均低于NC组和空白组(P<0.05),其中B组的表达率最低,抑制率最高,达89.3%,故选择序列2进行后续实验。自转染48h起,B组的相对增殖率均低于NC组和空白组(P<0.05);B组转染72h的相对增殖率为(66.58±2.58)%,均低于其他观察时间点(P<0.05)。B组转染48h的早期和晚期凋亡率分别为(17.43±2.31)%和(22.37±2.21)%,均高于NC组和空白组(P<0.05)。结论通过siRNA能够降低HepG2细胞的CDCA5表达水平,有效抑制HepG2细胞的增殖并促进其凋亡。
- 陈墅圳聂玉强杜艳蕾徐言沈桂佳
- 关键词：小干扰RNA肝癌增殖凋亡
- Ras及Rab作用因子1基因在肝癌中的表达
- 2013年
- 目的通过检测位于大鼠肝癌模型的热点数量性状位点（QTL）区域内Ras及Rab作用因子1（RIN1）mRNA的表达，初步探讨RIN1与肝癌的关系。方法17只近交系雄性F344大鼠，12只喂食含0．06％3＇-甲基．4-二甲氨基偶氮苯（3＇-Me。DAB）的饲料以诱导肝癌模型（诱癌组），其余5只则喂食普通饲料（对照组）。20周后取各大鼠肝脏进行组织病理学检测以确认肝癌模型是否制备成功。用定量反转录PCR（qRT．PCR）分析大鼠肝癌组织、人肝癌组织（标本来自2010年1月至2011年12月的21例肝癌患者，其中11例是中山大学肿瘤医院、5例为本院行手术切除的原发性肝癌患者，另有5例患者标本购自上海芯超生物科技有限公司）及人肝癌细胞系（Hep3B、Huh7和HepG2）中RIN1mRNA的表达，并分别以正常对照F344大鼠肝脏、人肝癌癌旁组织及人正常肝细胞系（HL7702）作为相应对照进行对比。按年龄、肿瘤大小、病理组织分级、甲胎蛋白（AFP）和乙肝表面抗原（HBsAg）对21例肝癌患者进行分组，对比各亚组间RIN1mRNA表达差异，分析RIN1mRNA表达与肝癌患者临床指标的关系。结果诱癌组各大鼠肝脏明显肿大，形态失常，肉眼可见多个瘤体；组织学检测显示诱癌组F344大鼠肝脏存在肝细胞癌，肝癌模型制备成功。诱癌组大鼠肝癌组织RIN1mRNA表达量明显高于对照组（P〈0．05），为对照组大鼠肝脏的172．44倍。HepG2、Hep3B和Huh7细胞RIN1mRNA表达量分别为HL7702细胞的2．49、2．06和1．16倍，差异没有统计学意义。在21个肝癌患者标本中，有14个（66．67％）癌组织的RIN1表达量较相应癌旁组织降低，其倍数为0．02～O．92；与癌旁组织相比，癌组织RIN1表达量整体中位倍数为O．44，显著低于癌旁组织（P=O．049）。肝癌组织RIN1的表达量与患者年龄、肿瘤大小、病理组织分级、AFP和HBsAg均无关（均P〉0．05）。结论
- 杜艳蕾聂玉强谷广伟
- 关键词：肝肿瘤动物
- 细胞分裂周期相关蛋白5基因在肝癌组织及肝癌细胞系中的表达被引量：3
- 2013年
- 目的通过检测细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)mRNA在肝癌组织及肝癌细胞系中的表达,初步探讨CDCA5在肝癌发生中的作用。方法采用3'-甲基-4-二甲氨基偶氮苯诱导雄性F344大鼠肝癌模型,用qRT-PCR分析大鼠肝癌组织、人类肝癌组织和人类肝癌细胞系中CDCA5 mRNA的表达。结果大鼠肝癌组织CDCA5 mRNA表达量为正常大鼠肝脏的233.94倍(P<0.05)。人肝癌细胞系Hep3B和Huh7中CDCA5 mRNA表达量分别为正常肝细胞系HL7702的31.34和14.22倍(P<0.05)。85.71%(18/21)人肝癌组织的CDCA5表达量较相应癌旁组织升高,中位倍数为3.53(P<0.05)。结论 CDCA5 mRNA在大鼠肝癌组织、人类肝癌组织及细胞系中高表达,初步提示CDCA5可能是肝癌的癌基因。
- 谷广伟聂玉强杜艳蕾
- 关键词：肝癌数量性状位点
