西京医院学科助推计划(XJZT09M16)
- 作品数：10 被引量：38H指数：4
- 相关作者：金振晓杨阳段维勋易定华陈文生更多>>
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- 氯通道阻滞剂对大鼠心肌缺血再灌注损伤致心肌细胞凋亡的作用被引量：2
- 2011年
- 目的本研究应用大鼠在体心肌缺血再灌注损伤(I/RI)动物模型,观察氯通道阻滞剂DIDS(4,4'-disothiocya-nostibibene-2,2'-disulfonic acid)对心肌细胞凋亡的作用以及与磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路可能存在的相互作用,明确DIDS心肌保护作用的可能机制。方法 75只大鼠随机分成5组:假手术组,I/RI组,I/RI+DIDS(14 mg/kg),I/RI+LY294002(PI3K-Akt特异性阻断剂),I/R+DIDS+LY294002组。TTC染色检测心肌梗死范围;TUNEL法测定细胞凋亡;Caspase-3试剂盒检测caspase-3活性;免疫印迹法检测p-Akt水平。结果与I/R组比较DIDS可以减少心肌梗死范围(各组n=4,P<0.01),可以明显抑制心肌细胞凋亡(各组n=5,P<0.01),降低凋亡效应子caspase-3活性(各组n=5,P<0.01),提高I/RI心肌的p-Akt水平(各组n=5,P<0.01),LY294002可以部分阻断这些作用,LY294002自身并无减少心肌梗死范围的作用。结论氯离子通道阻滞剂DIDS对缺血再灌注损伤的心肌具有保护作用,其作用部分是通过PI3K/Akt信号通路来实现的。
- 陈涛雷兰萍周和平金振晓
- 关键词：缺血再灌注损伤氯离子通道凋亡PI3K/AKT
- γ-分泌酶抑制剂对正常乳鼠心肌细胞的影响被引量：10
- 2011年
- 目的探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对正常乳鼠心肌细胞的影响。方法 SD乳鼠心肌细胞体外分离培养后,与不同浓度DAPT(10μmol/L、5μmol/L、2.5μmol/L、1.25μmol/L、0.625μmol/L、0.3125μmol/L、0.15625μmol/L)孵育24 h,或者与DAPT(5μmol/L)孵育不同时间(1 h、2 h、4 h、8 h、16 h、24 h、48 h),MTT法测定心肌细胞活力;Western Blotting方法测定心肌细胞Notch1受体胞内区(NICD)和Bcl-2蛋白表达量。结果 DAPT显著抑制正常乳鼠心肌细胞的存活,同时浓度越高、时间越长,其抑制效果越明显;DAPT处理后心肌细胞NICD和Bcl-2表达均降低。结论 DAPT可阻断Notch信号通路,抑制正常乳鼠心肌细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 杨阳段维勋周京军毕生辉杨建宝冯建宇侯晓薇金振晓易定华
- 关键词：乳鼠心肌细胞DAPTBCL-2
- 乌拉坦浓度依赖性增强康斯特保护液大鼠离体心脏保存效果的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的观察不同浓度乌拉坦增强康斯特保护液(HTK)液对大鼠离体心脏保存效果,筛选最佳的乌拉坦浓度。方法 36只SD大鼠心脏随机分为6组,分别用含有不同浓度乌拉坦的HTK液(mmol/L:0、10、20、40、80和160)灌注停搏并于4℃静止保存8 h。采用langendorff离体心脏灌注系统和多导生理仪测定停搏前及保存后再灌注60 min的心功能,指标包括左室发展压、心率、左心室内压、左室舒张末压、收缩和舒张变化率,比较心功能各指标恢复率,同时检测保存液中肌钙蛋白I(cTnI)含量。结果 20 mmol/L乌拉坦增强HTK液保存大鼠离体心脏的心功能恢复率较其它浓度组显著升高,80 mmol/L组左室舒张末压显著高于其他组,其它各组之间没有显著性差异;加入乌拉坦各组cTnI释放量显著低于对照组,各浓度组之间没有显著性差异。结论 20 mmol/L乌拉坦增强HTK液对大鼠离体心脏具有最佳的保存效果。
- 杨建宝俞世强周京军毕生辉金振晓易定华
- 关键词：HTK液心脏保存
- 褪黑素对过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及其机制被引量：1
- 2013年
- 目的:研究不同浓度褪黑素(melatonin,MLT)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活力的影响,以及对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及机制。方法:分别用不同浓度(125、250、500μmol/L)的MLT处理体外培养的HUVECs 2 h、4 h和6 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的MLT对HUVECs存活率的影响。以300μmol/L的H2O2建立HUVECs损伤模型,用125、250、500μmol/L的MLT与H2O2(300μmol/L)共同处理HU-VECs 2 h、4 h和6 h后,分别用噻唑蓝(MTT)比色法测细胞的存活率、细胞黏附实验评价细胞黏附能力、酶活性测定法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活力。用Griess法测定细胞培养液中NO2-的浓度来反映HUVECs的一氧化氮(NO)释放量。结果:以不同浓度的MLT处理内皮细胞2 h、4 h和6 h后,内皮细胞的存活率无统计学差异。MLT能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率、黏附能力及细胞内SOD的活力(P<0.01),增加培养液中NO含量(P<0.01),降低内皮细胞LDH的释放(P<0.01)。以500μmol/L的MLT效果最明显。结论:不同浓度的MLT对HUVECs的存活率均无影响,提示MLT药物浓度的安全范围较大。MLT对H2O2诱导HUVECs损伤的拮抗作用可能与其抗氧化能力和促进内皮细胞合成NO有关。
- 梁振兴杨阳金振晓王宁易定华段维勋陈文生
- 关键词：褪黑素人脐静脉内皮细胞乳酸脱氢酶
- 姜黄素对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响和抑制作用被引量：2
- 2014年
- 目的 观察姜黄素（Cur）对人成骨肉瘤细胞株MG-63增殖的影响和抑制作用.方法 不同浓度的Cur作用于体外培养的MG-63细胞,倒置显微镜下观察MG-63细胞的形态学变化,采用噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度Cur对MG-63存活率的影响,细胞计数试剂-8（CCK-8）法检测Cur对MG-63细胞增殖抑制能力的影响,膜联蛋白V（Annexin V）/碘化丙锭（PI）双染法标记检测细胞凋亡,黏附实验测定细胞黏附能力,并检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）释放量.结果 MTT法检测经Cur作用后的MG-63细胞存活率以及细胞黏附能力明显下降,LDH的增加提示MG-63细胞死亡率上升；Cur可抑制骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖,50.0 μmol/L的Cur作用12h后,细胞抑制率为47.23％,24 h以后为65.23％.Cur 12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L组作用24h后,MG-63细胞的凋亡率分别为（11.24±0.07）％、（28.23±0.35）％、（50.21±1.71）％、（41.22±1.85）％,不同浓度的Cur之间的实验结果差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 Cur能够抑制MG-63细胞增殖,Cur浓度从12.5 μmol/L增加到25.0 μmol/L,其对MG-63细胞24 h时生长抑制率由（13.56±1.88）％增至（48.27±2.32）％,50.0 μmol/L组24 h生长抑制率为65.23％.50.0μmol/L的Cur对MG-63细胞诱导凋亡作用最明显,作用24 h后,细胞凋亡率为（50.21±1.71）％.
- 王燕补蔚萍谢宏曲爱华刘军
- 关键词：姜黄素骨肉瘤增殖
- 硝苯地平恶化低钾状态下心脏缺血再灌注后舒张功能
- 2012年
- 目的评价钙通道阻断剂硝苯地平对低钾状态下心脏功能的影响。方法离体大鼠心脏接受低钾KH液灌注,其中K+浓度为3.1 mmol/L,实验全程记录左室发展压(LVDP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室内压变化速率(dp/dt)的变化。结果 1 h全心缺血和1 h再灌注处理后,LVDP、dp/dt均较缺血前显著降低,LVEDP显著升高;与对照组相比,再灌注开始后前15 min使用含0.5 mmol/L Ca2+的KH灌注,检测指标均明显改善,但是再灌注开始后前10 min给予1 mol/L硝苯地平显著升高LVEDP。结论钙稳态失衡是低钾灌注心脏缺血再灌注后功能损伤的重要原因,硝苯地平恶化心脏舒张功能,其机制有待进一步研究。
- 冯建宇肖国胜金振晓姚远张建英陈文生周京军
- 关键词：钙离子低血钾硝苯地平
- 褪黑素减轻心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制被引量：5
- 2015年
- 目的：探讨褪黑素（melatonin，Mel）在大鼠心肌缺St／再灌注（MI／R）损伤中的拮抗作用及其机制。方法：80只体质量200—250g雄性SD大鼠随机分为4组：假手术（Sham）组、溶剂对照（MI／R＋V）组、Mel治疗（MI／R＋Mel）组、Mel＋EX527（MI／R＋Mel＋EX）组。常规结扎左冠状动脉前降支行心肌缺St／再灌注手术，缺血30rain，再灌72h后超声心动图法检测各组大鼠心功能，再灌6h后ELISA法检测血清酶学指标，TUNEL法检测心肌细胞凋亡率，Evansblue-TIC双染法测定梗死面积，Westernblot法检测沉默信息转录调控因子1（SIRT1）、乙酰化叉头转录因子1（Ac-Fox01）及凋亡相关蛋白表达水平。结果：Mel治疗可显著改善MIVR损伤后心功能，降低血清肌酸激酶（CK）及乳酸脱氢酶（LDH）水平，降低凋亡率及梗死面积，上调SIRT1表达，下调Ac-Foxol水平，降低凋亡相关蛋白表达。而使用EX527阻断SIRT1信号后逆转Mel的上述作用（均P〈0．01）。结论：Mel可发挥抗凋亡作用减轻MI／R损伤并改善心功能，其作用机制可能与其激活SIRT1信号通路并降低Ac-Foxol水平有关。
- 于立明杨阳刘丽君裴海峰金振晓段维勋俞世强
- 关键词：褪黑素心肌缺血再灌注损伤心肌保护
- 姜黄素后处理通过JAK2/STAT3信号通路拮抗心肌缺血/再灌注损伤被引量：7
- 2012年
- 目的:观察姜黄素(curcumin,Cur)后处理对离体心肌缺血/再灌注损伤(ischemia and reperfusion injury,I/RI)的拮抗作用及其可能的机制。方法:40只SD大鼠随机分为5组(n=8),即空白对照(Ctl组)、缺血/再灌注组(I/R组)、I/R+姜黄素后处理组(I/R+Cur组)、I/R+姜黄素后处理+AG490组(I/R+Cur+AG组)及AG490组(AG组),AG490为JAK2/STAT3信号通路特异性阻断剂。采用离体大鼠心脏Langendoff逆行灌注模型,缺血60 min,再灌注60 min。分别于缺血前及再灌注后15 min、30 min、45 min和60 min,测定血流动力学各项指标,包括:心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压力上升的最大速率(+dp/dtmax)、冠脉流量(CF)、计算出心率压力指数(DP,LVDP×HR/1000)。用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组心肌梗死(MI)的面积,用Westernblot检测各组JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3以及磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达。结果:与Ctl组比较,I/R组各时间点的收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),磷酸化JAK2和STAT3的表达明显升高(P<0.01)。与I/R组比较,I/R+Cur组各时间点的心肌收缩及舒张功能下降程度明显减轻(P<0.01),MI的面积明显减少(P<0.01),p-JAK2和STAT3的表达更高(P<0.01)。与I/R+Cur组相比,I/R+Cur+AG组各时间点的收缩及舒张功能显著降低(P<0.01),MI的面积显著增加(P<0.01),p-JAK2和STAT3的表达显著下降(P<0.01);和Ctl组相比,AG组血流动力学和MI的面积无统计学差异。结论:Cur后处理对I/R大鼠心肌具有保护作用,其作用机制与JAK2/STAT3信号通路的活化有关。
- 段维勋杨阳金振晓赫荣智张建英耿晓东易定华
- 关键词：姜黄素JAK2/STAT3信号通路
- γ-分泌酶抑制剂对人脐静脉内皮细胞系增殖凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对正常人脐静脉内皮细胞系增殖凋亡的影响。方法分别用不同浓度DAPT(15、30、45、60μM/L)处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)12h、24h和48h,MTT法测定内皮细胞活力;粘附实验测定处理24h后细胞粘附率;TUNEL法检测处理24h后细胞凋亡率;Western法检测Notch信号通路受体Notch1的表达。结果 MTT检测显示DAPT显著抑制HUVECs存活(P<0.01),并呈浓度时间依赖性;粘附实验结果显示DAPT(24h)可以显著减弱HUVECs粘附能力(P<0.01);TUNEL检测显示DAPT(24h)可以显著增加HUVECs凋亡率(P<0.01);Westernblot结果显示DAPT使HUVECs中Notch1表达显著下降(P<0.01)。结论 DAPT可阻断Notch信号通路,抑制正常人脐静脉内皮细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 梁振兴杨阳李悦金振晓王宁易定华段维勋陈文生
- 关键词：人脐静脉内皮细胞DAPT增殖凋亡NOTCH信号通路
- 姜黄素对血管内皮细胞过氧化氢损伤的保护作用及其机制研究被引量：13
- 2011年
- 目的研究不同浓度姜黄素(Cur)对正常血管内皮细胞活力的影响,及Cur对血管内皮细胞过氧化氢(H2O2)损伤的保护作用及机制。方法用不同浓度Cur(12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)8 h,MTT法检测不同浓度Cur对HUVECs存活率的影响;H2O2(250μmol/L)孵育建立HUVECs损伤模型,不同浓度Cur(12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)与H2O2共同处理HUVECs 4 h,检测细胞存活率,黏附能力和培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Griess法测定培养液中NO2-浓度,反映内皮细胞释放一氧化氮(NO)量。结果不同浓度Cur处理内皮细胞8 h后,内皮细胞的存活率无统计学差异(P>0.05);Cur能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率和黏附能力(P<0.01),降低内皮细胞LDH的释放(P<0.01);增加H2O2损伤后HUVECs培养液中NO含量(P<0.01)。其中Cur浓度为25μmol/L时效果最明显。结论不同浓度Cur(12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)对内皮细胞的存活率均无影响;Cur对血管内皮细胞氧化损伤具有保护作用,机制可能与其促进NO的合成有关。
- 杨阳段维勋金振晓刘金成冯建宇刘振华易定华周京军张建英
- 关键词：姜黄素内皮细胞一氧化氮
