杭州市医药卫生科技计划项目(2006B079)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：徐丹戈张政蒋雪凤黄世旺方叶珍更多>>
- 相关机构：杭州市江干区疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：杭州市医药卫生科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外环境样本中产毒型O1群霍乱弧菌双重荧光定量PCR快速检测方法的建立
- 2011年
- 目的研究建立双重荧光定量PCR技术快速检测产毒型O1群霍乱弧菌,并首次应用于外环境样本的检测中。方法从GenBank上下载O1群霍乱弧菌O抗原编码基因rfbO1和毒力基因CT序列,在rfbO1和CT保守区域设计特异性引物和探针,建立优化单一和双重荧光PCR反应体系,评价所建双重PCR反应体系的特异性、敏感性和稳定性,并应用于外环境样本的监测检验中。结果该方法对O1群霍乱弧菌检测具有高度特异性,对rfbO1和CT基因序列检出限达到1.0×102cfu/mL,构建的体系定量标准曲线相关系数分别为0.999和0.998,具有较好的稳定性,并首次从352件外环境样本中检测出了5株产毒型O1群霍乱弧菌。结论本研究建立的双重荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,可应用于外环境样本中产毒型O1群霍乱弧菌的大范围筛查。
- 黄世旺徐丹戈徐昌平张政方叶珍包芳珍李剑蒋雪凤卢亦愚
- 关键词：霍乱弧菌CT
- TaqMan双重荧光PCR用于快速检测模拟临床标本中产毒型O139群霍乱弧菌的研究
- 2011年
- 目的:研究建立TaqM an双重荧光PCR技术,用于快速检测模拟临床标本中产毒型O139群霍乱弧菌。方法:以O139群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb O139和毒力基因CT的特异性序列设计引物和TaqM an探针,建立优化TaqM an双重荧光PCR反应体系,进行特异性与敏感性的研究,并应用于模拟粪便感染和外环境监测标本的快速检测中。结果:该方法对产毒型O139群霍乱弧菌检测具有高度特异性,对rfbO139和CT基因序列检出限达到1.0×102cfu/m l或5 cfu/PCR反应体系,对模拟粪便感染和外环境监测标本的检测结果与实际情况完全一致,整个检测过程最快仅需3 h。结论:本研究建立的产毒型O139群霍乱弧菌双重荧光PCR检测技术具有特异性好、敏感性高、快速易操作等优点,可用于临床粪便标本和外环境监测样本的快速检测。
- 徐丹戈黄世旺方叶珍徐昌平张政包芳珍李剑蒋雪凤卢亦愚
- 关键词：霍乱弧菌CTO139
