国家自然科学基金(81128014)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张晶司书毅刘伟韩小敏郭宗儒更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院国家食品安全风险评估中心中国科学院广州生物医药与健康研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 定靶突变温敏酵母模型在Pin1抑制剂筛选中的应用被引量：1
- 2014年
- 利用定靶突变温敏酵母模型寻找Pin1的新型抑制剂,并探讨阳性化合物的体内外抗肿瘤活性。采用MTT法、流式细胞仪法、免疫印迹法、划痕实验和虚拟对接检测阳性化合物的体外活性。利用移植瘤裸鼠模型检测阳性化合物的体内活性。结果发现,酵母模型初筛得到的阳性化合物8-11在体外,对Pin1的IC50值为(10.40±1.68)μmol·L-1,能抑制多种肿瘤细胞的增殖,诱导HeLa细胞G1期阻滞和凋亡,降低Cyclin D1的蛋白水平表达,降低肿瘤细胞迁移能力,虚拟对接中与Pin1的活性结构域呈现出较高的亲和性;在体内,8-11抑制裸鼠移植瘤生长。本研究首次证实8-11可通过抑制Pin1发挥抗肿瘤作用。
- 张晶韩小敏胡文辉郭宗儒贺晓波司书毅
- 关键词：PIN1抗肿瘤细胞凋亡裸鼠
- 以Pin1为靶点的抗肿瘤药物的筛选及活性评价被引量：1
- 2014年
- 目的评价以酵母细胞为模式菌高通量筛选Pin1抑制剂的方法。方法以野生型酵母菌W303-1a和温度敏感型突变株L94P为模式菌,筛选Pin1抑制剂;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检验候选化合物对肿瘤细胞的杀伤作用;体外酶学实验验证候选化合物对Pin1的抑制作用;流式细胞仪检测候选化合物对肿瘤细胞周期和凋亡的阻滞和诱导作用;免疫印迹(Western Blotting)分析候选化合物对肿瘤细胞中Cyclin D1和Pin1表达量的影响。结果候选化合物显示出对温度敏感型突变株的特异性抑制作用;MTT实验证实化合物能抑制肿瘤细胞的增殖;酶学实验和Western Blotting共同阐释了化合物对重组纯化的人Pin1具抑制作用但并不影响Pin1蛋白的表达;流式结果表明化合物能诱导细胞发生凋亡和G0/G1期阻滞;化合物还能抑制肿瘤细胞中Cyclin D1的蛋白表达并呈剂量依赖性。结论首次发现Pin1为苯并呋喃衍生物抗肿瘤作用的靶点之一。
- 张晶刘伟陈云雨刘宗英司书毅
- 关键词：酵母细胞酶学分析
