中央高校基本科研业务费专项资金(HUST2012QN190)
- 作品数：2 被引量：3H指数：2
- 相关作者：刘喆隆陈茜何文涛程辉黄敏更多>>
- 相关机构：华中科技大学武汉市第一医院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TIGIT-Fc融合蛋白的表达以及对巨噬细胞功能的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:构建携带小鼠TIGIT-Fc融合基因的慢病毒载体,稳定整合基因至小鼠H22细胞,制备并纯化TIGIT-Fc融合蛋白,探讨其对巨噬细胞功能的影响。方法:利用分子生物学方法将小鼠TIGIT胞外段与人IgG3 Fc段基因融合,构建分泌型TIGIT-Fc载体,再重组入慢病毒载体,感染小鼠H22细胞,接种至C57BL/6小鼠腹腔产生腹水,收集腹水后通过蛋白A柱纯化获得TIGIT-Fc融合蛋白,以此干预LPS处理的巨噬细胞,检测其分泌IL-10的水平。结果:TIGIT-Fc蛋白在H22细胞中以分泌形式表达,经过纯化后的TIGIT-Fc融合蛋白可在体外作用于高表达PVR受体的成熟巨噬细胞,促进其分泌抗炎症因子IL-10。结论:TIGIT可负调节成熟巨噬细胞的功能,促进其分泌IL-10。
- 赵霞陈茜刘喆隆程辉何文涛
- 关键词：巨噬细胞PVRIL-10
- 小鼠分泌型TIGIT慢病毒载体的构建及其功能研究被引量：2
- 2014年
- 本文旨在构建表达小鼠TIGIT胞外段与人IgG-Fc段融合基因TIG-Fc的慢病毒载体,验证TIG-Fc蛋白的功能,为进一步研究其免疫调节作用奠定基础。具体方法是将TIG-Fc融合基因克隆到pLOX载体质粒上,鉴定正确连接的克隆TIG-Fc-pLOX,并与pCMV△R8.2和pMD.G三质粒共转染人胚肾(HEK)293T细胞,收获上清中携带T1G-Fc基因的慢病毒Lenti-TIG-Fc。感染了Lenti-TIG-Fc的293T细胞与内毒素刺激成熟的小鼠树突状细胞(DC)共孵育后,ELISA检测上清中IL-10水平。结果显示成功构建的慢病毒Lenti-TIG-Fc感染293T细胞后,可使其稳定分泌TIG-Fc融合蛋白。融合蛋白可诱导成熟DC分泌IL-10明显增加。
- 陈茜高义黄敏阿孜古丽.艾海提陈忠华刘喆隆余学锋何文涛
- 关键词：树突状细胞IL-10慢病毒
