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酒精致小鼠胚胎心脏组蛋白H3K9高乙酰化失衡及其表突变被引量：5: 2013年; 目的:揭示小鼠胚胎心脏发育过程中组蛋白H3K9乙酰化水平的时序性,阐明孕期饮酒对胚胎心脏组蛋白H3K9乙酰化及胚胎心脏发育相关基因表达的影响,并探讨其机制。方法:选择清洁级健康成年昆明小鼠60只,于孕期E7.5～E15.5连续予以10μl.g-1.d-1、56%的饮用白酒连续灌胃作为酒精干预组,0.9%氯化钠溶液灌胃作为对照组。取E11.5、E14.5、E17.5孕鼠及新生小鼠心脏作为标本,利用Western blot观察正常小鼠胚胎心脏发育过程中组蛋白H3K9乙酰化水平的时序表达规律以及酒精干预后的变化;实时定量PCR检测心脏发育相关基因Mef2c和GATA4的mRNA表达。结果:小鼠胚胎心脏发育过程中,组蛋白H3K9乙酰化水平于发育早期(E11.5)开始升高,E17.5达到高峰,而新生时期降至较低水平;E17.5较E11.5和新生期均差异有统计学意义(均P<0.05)。酒精干预组E11.5、E14.5及E17.5的胚胎心脏组蛋白H3K9乙酰化水平较对照组分别升高2.35、1.47及1.56倍(均P<0.05)。同时,酒精干预组E14.5、E17.5的GATA4mRNA表达较对照组分别升高1.98、1.55倍(均P<0.05),而E14.5的Mef2cmRNA表达较对照组升高2.08倍(P<0.05)。结论:正常小鼠胚胎心脏发育过程中组蛋白H3K9乙酰化水平于早期开始升高,E17.5达到高峰,而新生时期下降至较低水平。孕期饮酒可导致胚胎心脏组蛋白H3K9高乙酰化失衡和心脏发育相关基因Mef2c、GATA4表达异常。; 潘博孙慧超吕铁伟吴晓云朱静田杰; 关键词：心脏发育酒精组蛋白乙酰化

孕前保健与出生缺陷一级预防策略被引量：44: 2010年; 李笑天; 关键词：孕前保健先天畸形儿数据显示残疾儿童优生优育人口素质

连接蛋白Cx50 S258F突变体对斑马鱼晶状体发育的影响被引量：1: 2012年; 目的:研究与先天性白内障相关的连接蛋白Cx50 S258F突变体对斑马鱼晶状体发育的影响。方法:将野生型和携带S258F突变的Cx50编码区分别构建到pcDNA3.1myc/his真核表达载体上,通过体外转录获得相应的RNA产物,将RNA产物分别显微注射到1细胞期的斑马鱼胚胎,通过显微镜观察斑马鱼晶状体表型,并利用全胚原位杂交技术分析过表达野生型和突变型Cx50对晶状体标志基因Cx23表达的影响。结果:与野生型胚胎相比,S258F突变型Cx50过表达引起斑马鱼胚胎白内障表型,过表达野生型Cx50也引起白内障表型,但是畸形数量明显少于突变型,野生型和突变型Cx50的过表达均下调了Cx23的表达。结论:连接蛋白Cx50S258F突变体可引起斑马鱼白内障表型,提示Cx50的S258F突变体是造成先天性白内障的原因。; 高小博马燕马旭彭小忠; 关键词：先天性白内障晶状体连接蛋白斑马鱼

组蛋白乙酰化在先天性心脏病发病中的作用被引量：2: 2013年; 先天性心脏病是指心脏及大血管的结构异常，全世界的发病率为0．8％～1％，无明显地区及种族特异性，在先天畸形的发病中排首位，因其发病率高，后果严重，而受到人们的广泛重视。目前认为先天性心脏病是受环境和遗传共同作用的多基因疾病，但其发病机制及如何相互作用目前仍不清楚。; 徐君王慧君黄国英; 关键词：先天性心脏病组蛋白乙酰化多基因疾病先天畸形相互作用

法洛四联症患儿组蛋白乙酰化及其酶的表达被引量：4: 2013年; 目的观察组蛋白乙酰转移酶(HATs)及组蛋白去乙酰化酶(HDACs)在法洛四联症(TOF)患儿中的表达情况,探讨组蛋白乙酰化及其酶在TOF发病中的作用。方法 TOF组心肌组织标本来源于46例行TOF根治术患儿,对照组心肌组织标本来源于16例意外死亡经尸检未发现心脏畸形的儿童。采用免疫组织化学染色法检测TOF组和对照组中H3K9、H3K18、H3K27 3个组蛋白乙酰化位点的乙酰化水平;采用Realtime PCR技术筛选TOF组与对照组心肌组织中组蛋白乙酰化相关酶HATs和HDACs的mRNA表达水平,并分析其与组蛋白乙酰化水平的相关性。结果与对照组比较,TOF组H3K9位点的乙酰化水平明显增高(P=0.0165);而H3K18、H3K27两个位点的乙酰化水平明显降低(均P<0.05)。分别对4个HATs和6个HDACs检测发现,TOF组中EP300和CBP mRNA水平较对照组升高(均P<0.05);而其他HATs和HDACs mRNA表达水平在两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。相关分析显示,H3K9乙酰化水平与EP300和CBP mRNA表达呈显著正相关(分别r=0.71、0.72,均P<0.01)。结论 H3K9乙酰化水平增高可能与EP300和CBP mRNA表达上调呈正相关,提示EP300和CBP可能是通过调控H3K9乙酰化状态影响心脏发育。; 徐君林怡翔顾若漪王慧君马晓静马端黄国英; 关键词：组蛋白乙酰化组蛋白乙酰转移酶组蛋白去乙酰化酶法洛四联症儿童

人和大鼠内皮祖细胞培养及其生长特性的比较: 2012年; 目的建立人内皮祖细胞(hEPCs)离体培养的方法,探讨培养条件,观察细胞生长状态、形态。xd同时行大鼠EPCs(rEPCs)培养。建立hEPCs和rEPCs培养体系,比较两者不同的生长条件和生长状态。方法:取人脐带血80-120ml/袋,先分离单个核细胞,后使用磁珠细胞分选法(MACS),分选出CD133+/VEGFR2+的细胞,进行流式细胞检测,发现双阳性细胞占48.79%。用差速贴壁法培养5-9天,倒置相差显微镜观察细胞形态并照相、免疫荧光染色后荧光显微镜下观察照相。取大鼠骨髓,冲洗骨髓腔,离心沉淀出细胞,差速贴壁培养法培养、观察。结果:(1)hEPCs在普通光镜下呈索条状、卵圆形。(2)细胞吞噬DiI-acLDL、UEA染料后可在荧光显微镜下特异显色,证明细胞有吞噬功能,推断为hEPCs。(3)CD133+/VEGFR2+的hEPCs细胞,占使用MACS筛选后细胞比例为48.79%。(4)从骨髓中分离出的rEPCs生长活力明显优于hEPCs。结论:(1)该方法培养的hEPCs和rEPCs生长活性好,在普通光镜下呈索条状、卵圆形或铺路石样;(2)hEPCs在细胞数量上可不少于rEPCs,从骨髓中培养出的rEPCs增殖力优于脐血来源的hEPCs。此实验比较并完善了两种不同来源内皮祖细胞培养的方法学及其生长特征,有利于根据不同的细胞培养特性来选择应用于内皮祖细胞的实验研究。; 高永兴沈雳钱菊英葛均波; 关键词：内皮祖细胞 UEA

细胞外信号激酶蛋白5在卵泡刺激素介导的卵泡颗粒细胞甾体激素生成中的作用被引量：3: 2011年; 目的研究细胞外信号激酶蛋白5(ERK5)在卵巢颗粒细胞甾体激素生成中的作用。方法采用Western blot检测在卵泡刺激素(FSH)刺激原代颗粒细胞甾体激素生成过程中ERK5的表达变化和激活情况,荧光共聚焦技术分析ERK5的亚细胞定位,腺病毒技术观察活化型ERK5和显性负性ERK5对颗粒细胞甾体激素生成的影响。结果 Western blot检测结果表明,FSH处理颗粒细胞后ERK5的表达随处理时间延长而下调,而ERK5活性形式的表达随处理时间延长而逐渐上升。荧光共聚焦技术分析结果显示,FSH的处理并没有明显影响ERK5在颗粒细胞中的定位。腺病毒技术观察结果发现,在细胞中联合感染活化型MEK5重组腺病毒和野生型ERK5重组腺病毒能促进FSH引起的细胞内StAR的表达升高和孕酮分泌,而显性负性ERK5重组腺病毒感染细胞则出现相反的效应。结论 ERK5可能促进了FSH介导的颗粒细胞甾体激素生成。; 高小博姚楠马旭陆彩玲杨伯清彭小忠; 关键词：卵泡刺激素颗粒细胞甾体激素孕酮

先天性心脏病家系遗传学研究方法的应用进展被引量：4: 2015年; 先天性心脏病（先心病）是常见的出生缺陷，目前认为，大多数先心病是环境因素和遗传因素共同作用所引起的，但其确切的发病机制尚未完全清楚。家族性再发是先心病临床表现的经典模式，各国收集的先心病家系资料显示一级亲属患病率明显增高。通过对多代先心病家系的分析有助于识别先心病的致病基因和遗传模式。近年来，随着分子生物学的快速发展，国内外学者通过不同的遗传学方法对先心病家系进行研究，如二代测序方法、连锁分析法、候选基因分析法等。这些方法使先心病发病的遗传机制取得一些进展，因此，该文对遗传学方法在家系研究中的应用进行综述。; 李烁琳袁媛黄国英; 关键词：先天性心脏病家系研究拷贝数变异

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国家重点基础研究发展计划(2010CB529504)

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