国家高技术研究发展计划(2011AA100606)
- 作品数：15 被引量：131H指数：6
- 相关作者：李海燕李校堃官丽莉杨晶姜潮更多>>
- 相关机构：吉林农业大学吉林省科学技术厅温州大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 红花单功能反馈抑制敏感型CtAK1基因克隆、序列分析及表达载体构建被引量：2
- 2015年
- 目的分离红花天冬氨酸代谢途径关键酶天冬氨酸激酶(AK)基因的全长cDNA序列,进行植物超表达载体构建。方法根据红花种了转录组文库注释和qRT-PCR鉴定的AK基因核心片段及表达分析数据,采用RACE技术获得红花AK(CtAK)基因的全长cDNA,利用DNA重组技术构建植物超表达载体。结果生物信息学分析表明,CtAK基因全长1 703bp,ORF区为1 626 bp,编码541个氨基酸残基,功能结构域分析推测,该基因可能为单功能反馈抑制敏感植物AK1。通过DNA重组技术成功构建以35 S为启动子和Bar抗性基因并含有叶绿体转运肽的pCAMBIA3301-CTP-AK1植物超表达载体。结论获得CtAK1基因的编码序列并构建植物超表达载体,为进一步研究其生物学功能及其在红花氨基酸代谢调控中的作用机制奠定基础。
- 王艳芳张玲张娜张娟李红群杨晶杜林娜官丽莉李海燕李校堃
- 关键词：红花天冬氨酸激酶RACE植物表达载体
- 新型植物生物反应器研究进展被引量：6
- 2018年
- 植物生物反应器生产重组药用蛋白的研究已经逐渐被人们所关注,其应用也越来越广泛。对几种新型的植物生物反应器生产药用蛋白的研发及现状进行了阐述,分析了几种新型植物生物反应器的优势及限制其产业化发展的因素,并对其发展前景进行了展望。
- 杨晶杜林娜王法微高延妍刘欣李校堃李海燕
- 关键词：胚乳油体叶绿体发状根悬浮细胞
- FGF10与相关疾病的关系及其临床应用被引量：1
- 2015年
- 成纤维细胞生长因子10(FGF10)为成纤维细胞生长因子家族(FGFs)家族成员。FGF10与多种疾病相关,主要包括肿瘤和多种器官发育不全。此外,FGF10还能促进损伤修复、毛发生长和干细胞增殖分化,并能去面部红血丝。
- 黄建易善勇杨晶官丽莉杜琳娜李海燕姜潮
- 关键词：成纤维细胞生长因子10疾病
- 红花CHS基因的过表达提高了拟南芥黄酮含量被引量：10
- 2017年
- 该研究旨在获得红花查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)基因全长片段,并在拟南芥中进行过表达,初步验证该基因的功能根据红花转录物测序结果中获得的中间序列,采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplifi cation of cDNA ends,RACE)方法从红花花瓣中克隆到1个CHS基因的全长cDNA,命名为Ct CHS1,全长序列1 360 bp。生物信息学分析表明,该基因具有完整的开放阅读框(open reading frame,ORF),共1 113 bp,编码370个氨基酸。亚细胞定位预测结果显示,该基因编码的蛋白质定位于细胞质。结合其他物种的CHS基因构建系统树表明,Ct CHS1具有高度保守性,其与水母雪莲花的亲缘关系最近。荧光定量PCR(Real-time PCR)分析表明,Ct CHS1基因在吉红油姊妹系的衰落期和吉红一号的盛花期表达量最高。该研究成功构建了含有Ct CHS1基因的植物表达载体,并在拟南芥中进行过表达,获得了高黄酮含量的转基因拟南芥T2株系。结果表明,过表达红花CHS基因可以提高拟南芥中的黄酮含量,为后续该基因的功能验证奠定基础。
- 刘秀明陆皖行李佳杜卫红姚娜董园园孟璐璐李海燕
- 关键词：红花查尔酮合酶黄酮拟南芥
- 辅酶Q10应用的研究进展被引量：11
- 2014年
- 辅酶Q10是一种脂溶性醌类化合物,在人体呼吸链中参与电子传递,具有促进细胞新陈代谢的功能。基于辅酶Q10的特点和作用,为进一步开发辅酶Q10,并对其进行有效的利用,以发挥其重要的价值,综述了辅酶Q10在医药卫生和美容护肤等领域中的应用及研究状况,并分析了辅酶Q10与其它药物之间的互作关系,并对其开发前景进行了展望。
- 王文慧王沥浩郭咏昕杨晶
- 关键词：辅酶Q10医药化妆品
- 植物microRNA调控及其应用研究进展被引量：2
- 2015年
- 作为非编码小RNA,microRNA主要在转录后水平调控基因表达和蛋白翻译。在植物中microRNAs广泛参与植物生长各个过程。该研究综述了microRNA在植物中的合成过程及靶基因鉴定,对microRNA的组织发育及逆境调控方面的最新研究进展也作了较为详细的阐述。
- 赵利旦董园园李海燕
- 关键词：MICRORNA转录后调控非生物胁迫
- 红花花青素合成酶基因的克隆及表达分析被引量：3
- 2014年
- 根据红花转录物测序结果中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方法从红花花瓣中克隆到1个ANS基因的全长cDNA,该基因全长序列1 226 bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 050 bp,编码349个氨基酸。生物信息学软件分析显示,该基因编码的蛋白理论分子量约为82.27 kDa,等电点为5.09,序列里含有典型的加尾信号序列AATAA和Poly(A)。保守结构域预测表明,该基因编码的蛋白具有典型的ANS蛋白功能结构域,其保守结构域中含有铁离子及2-O-酮戊二酸结合位点。结合其他物种的ANS基因构建系统树表明,红花ANS基因与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与芍药的亲缘关系最近。应用实时荧光定量PCR分析表明,ANS基因在红花的初花期和盛花期的表达量最高。
- 刘秀明杨文婷赵利旦董园园姚娜王南官丽莉李海燕李校堃
- 关键词：红花REAL-TIMEPCR
- 红花(Carthamus tinctorius L.)不同开花时期的转录组测序及黄酮合成相关基因的验证被引量：5
- 2015年
- 应用454测序技术对红花(Carthamus tinctorius L.)初花期和盛花期两个样本进行转录组测序,分别获得了577 664和562 930条Clean reads片段,其平均长度分别为427 bp和436 bp。差异表达分析结果发现,在初花期获得40 139个基因,盛花期获得39 768个基因,在两个时期同时表达的基因有28 316个。COG/KOG分析中,获得了大量与代谢相关的功能注释信息,注释到比例最高的为功能预测,占24.681%。KEGG Pathway富集分析中,找到红花黄酮化合物合成途径中的关键酶基因,利用Real-time PCR方法验证了三个基因的正确性。表达量分析表明,查尔酮合酶在两个红花品种中各个开花时期的相对表达量最高。
- 刘秀明张宇姚娜崔喜燕王立勇董园园王南李晓薇李海燕李校堃
- 关键词：红花转录组测序
- 轮状病毒外壳蛋白VP7基因在拟南芥种子中表达及免疫原性分析被引量：1
- 2017年
- 为了研究开发植物来源的轮状病毒疫苗,试验采用模式植物拟南芥作为生物反应器,将轮状病毒主要中和抗原基因VP7通过农杆菌介导法转化野生型拟南芥,获得了含有VP7的转基因拟南芥稳定株系,并分析其种子表达蛋白的免疫原性。首先根据拟南芥密码子的偏好性,设计合成优化的VP7基因,构建植物表达载体p PHAP1301-His-HRVVP7;然后通过农杆菌介导的Floral Dip法转化拟南芥,收获T0代种子后播种,喷用草铵膦筛选转基因拟南芥获得T1代种子,重复上述过程最终获得T3代拟南芥种子,通过RT-PCR、Western、ELISA法等进行分析。结果表明:VP7基因已成功整合到拟南芥的基因组并进行了转录和蛋白表达,并且VP7蛋白占总可溶性蛋白的0.31%,即每克转基因拟南芥种子中所含目的蛋白为43.3μg。以转基因拟南芥稳定株系种子中的可溶性蛋白口服免疫小鼠,可使小鼠获得免疫原性。说明通过植物作为生物反应器生产轮状病毒疫苗方法可行。
- 李余先官丽莉杨晶刘秀明杨赫周永刚王红雨李海燕李校堃
- 关键词：轮状病毒VP7拟南芥免疫原性
- 植物防御素基因家族结构、功能及调控研究进展被引量：2
- 2018年
- 防御素(Defensins,DF)是抗菌肽家族中最古老的一员。植物防御素是一类包含45-54个氨基酸残基,含有半胱氨酸(Cys)稳定的αβ模序,与哺乳动物及昆虫抗菌肽的亲缘关系非常密切,大部分植物防御素在体内被合成为具有信号肽序列的前体,并被分泌到胞外空间。植物防御素在宿主防御系统中起重要作用,不仅可抑制一系列的植物、动物及人类体内的细菌、真菌,还可杀伤一些肿瘤细胞及病原虫。植物防御素广泛存在于植物的花、茎、叶、果实、根和种子中,具有抗菌、抗肿瘤、抑制酶活、作为离子阻断剂和增加耐受性的功能,可作为新型的杀菌剂或新型的抗生素类药物。随着抗生素导致的耐药菌株的出现,对植物防御素的研究就显得尤为重要,特别是因其有效的抗真菌活性,植物防御素在作物抗病基因工程方面具有巨大的潜力。主要介绍了其发现、结构、类型、逆境调控功能、作用机制以及外源表达植物防御素基因等方面的最新研究进展,有助于将来对植物防御素基因家族进行更深入和全面的研究。
- 官丽莉崔琪李声钊董程李海龙彭建豪李校堃
- 关键词：植物防御素
