国家自然科学基金(90209016)
- 作品数：11 被引量：174H指数：8
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- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药性的双向电泳分析
- 2006年
- 目的:研究急性早幼粒细胞白血病(APL)对全反式维甲酸(ATRA)治疗敏感和耐药患者的外周血淋巴细胞在蛋白质组水平上的差异。方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)对敏感和耐药患者的外周血淋巴细胞进行蛋白质组差异分析。结果:ATRA敏感和耐药患者外周血淋巴细胞的2-DE平均蛋白质点分别为(746±57)和(617±41),敏感与耐药患者的2-DE相比,有16个蛋白点表达明显上调,22个明显下调。另有4个蛋白点(Mr/pI:24.6kD/8.05,32.3kD/5.17,22.3kD/6.51,25.1kD/7.09)在敏感患者中特异表达,5个蛋白点(Mr/pI:21.9kD/5.45,23.4kD/6.27,22.9kD/6.65,23.9kD/7.39,24.7kD/7.65)在耐药患者中特异表达。结论:结果提示这些差异表达的蛋白质可能与APL对ATRA耐药的机制有关,该研究有助于揭示APL对ATRA耐药机理和发现新的临床分子标志物。
- 刘希成梁恒田真邢建宇
- 关键词：双向电泳蛋白质组急性早幼粒细胞白血病外周血淋巴细胞
- 黄芪对IgA肾病小鼠肾脏功能和肾组织蛋白质表达的作用(英文)被引量：8
- 2009年
- 目的:研究右旋糖苷所致IgA肾病小鼠的肾组织蛋白表达变化和黄芪提取物(AEAR)对IgA肾病小鼠的作用。方法:给正常小鼠注射右旋糖苷建立IgA肾病小鼠模型。部分模型小鼠给予AEAR10g·kg-1·d-1作为AEAR治疗组。为探究AEAR的作用,运用双向电泳(2-DE)技术分别获得正常对照组、IgA肾病模型组、AEAR组小鼠的肾组织蛋白凝胶,银染后,图像用PDQUEST双维分析软件分析比较,得到相应图谱。结果:连续12周给予AEAR的IgA肾病小鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和尿蛋白含量明显降低,且它们的肾组织蛋白图谱相应恢复接近正常鼠的图谱形态。与正常组比较,模型组有334个蛋白表达有显著性差异,其中142个蛋白表达增强2倍,61个蛋白表达增强5倍,121个蛋白表达减弱2倍;10个蛋白在模型组特异表达,在正常组不表达。以上334个差异蛋白中的50%个蛋白在给予AEAR治疗后,表达水平趋近于正常对照组水平;上述10个特异表达的蛋白经过AEAR干预后,有5个蛋白恢复至正常的不表达状态,4个蛋白表达明显减弱接近正常水平,只有1个蛋白表达上调甚至高于模型组对应蛋白的表达水平,分析可能与IgA肾病发病或AEAR药物作用密切相关。结论:AEAR不仅具有保护IgA肾病小鼠肾脏功能的作用,而且能调节小鼠肾脏组织蛋白表达,有助于发现AEAR作用于IgA肾病的靶蛋白。
- 黄黎明梁恒田真
- 关键词：IGA肾病双向电泳
- 山茱萸的毛细管电泳指纹图谱被引量：20
- 2004年
- 通过对中药山茱萸提取物的毛细管区带电泳(CZE)和毛细管胶束电动色谱(MECC)分离条件的优化研究,建立了获得其化学特征指纹图谱的方法.山茱萸醇提物化学特征指纹图谱的CZE优化条件是:未涂层弹性融硅毛细管为54cm(内径为50μm,有效分离长度为50cm);50mmol/L硼砂缓冲液,pH值为9 5;压力进样为34 5kPa·s(5p.s.i.·s),操作电压为22kV(+)→(-),柱上200nm紫外检测,30℃柱温.优化的MECC条件:30mmol/LSDS,50mmol/L硼砂缓冲液,pH值为9.5,其他条件与CZE的相同.该方法具有高效、快速、样品用量少和分析成本低等特点.
- 蒋迎道梁恒
- 关键词：山茱萸指纹图谱毛细管区带电泳毛细管胶束电动色谱
- RP-HPLC-ELSD测定山茱萸中齐墩果酸与熊果酸的含量被引量：31
- 2005年
- 目的:建立反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(RP-HPLC-ELSD)测定山茱萸中齐墩果酸和熊果酸的含量.方法:采用Phenomenex C18(250 mm ×4.6 mm i.d.,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.5%(体积分数)冰醋酸水溶液(体积比为87:13),流速0.8 mL·min-1,柱温为室温;蒸发光散射检测器漂移管温度65℃,载气(N2)流速2.0 L·min-1,撞击器关闭.结果:在选定的条件下,齐墩果酸和熊果酸获得较好的分离.在齐墩果酸和熊果酸进样量分别为1.28～3.84μg(r=0.998 5)和1.16～3.48μg(r=0.997 8)时线性关系良好,其检出限分别为0.64μg和0.58μg(按S/N=3计),平均回收率分别为96.8%和97.5%,相对标准偏差RSD分别为1.36%和1.70%.结论:该方法简便可行、灵敏、准确、重现性好,可作为山茱萸药材质量的检测方法.
- 赵永席马国营梁恒
- 关键词：高效液相色谱山茱萸齐墩果酸熊果酸
- 山茱萸作用鼠IgA肾病的肾组织差异蛋白质谱被引量：17
- 2005年
- 通过小鼠肾组织的双向电泳(2DE),发现单味中药山茱萸醇提物(FCE)作用鼠IgA肾病的肾组织差异蛋白质表达谱发生显著变化.比较IgA肾病和正常小鼠肾组织的2DE图,在1267个蛋白点中有664个匹配蛋白点,其中表达量差异在2倍以上的有263个,另有3种蛋白在IgA肾病肾组织中未被表达和1种蛋白特异表达.比较FCE服用前后鼠IgA肾病肾组织的2DE图发现,在原先差异表达的263个蛋白质中,用药后有147个显著地恢复正常表达,在IgA肾病3种未表达和1种特异表达的蛋白都恢复了正常表达,同时用药后新出现1种特异表达蛋白.该方法提示,这些差异和特异表达的蛋白质可能是IgA肾病和FCE药物作用的靶蛋白,FCE能有效地纠正小鼠IgA肾病可能是通过影响这些靶蛋白而起作用的.
- 梁恒邢建宇刘希成黄黎明
- 关键词：双向电泳蛋白质组IGA肾病
- 中药山茱萸的高效液相色谱指纹图谱及其聚类分析被引量：14
- 2006年
- 采用高效液相色谱(HPLC)法建立了10个不同山茱萸样品的中药指纹图谱(TCMF).对所获得的指纹图谱信息进行了数据化处理;用色谱峰重叠率定量地对10个样品的指纹图谱进行了相似性评价,其重叠率均大于85.4%.在此基础上用模糊聚类中的几何平均最小法定性地对10个样品进行了分类和鉴别,其相似性的相关系数为0.927时,全部样品可归为一类.通过HPLC指纹图谱、色谱峰重叠率和模糊聚类分析,建立了控制山茱萸药材质量的新方法,该法为中药样品的鉴定和质量控制提供了依据,并为HPLC在复杂组分样品的分析领域开拓了新的应用途径.
- 赵永席马国营梁恒
- 关键词：山茱萸指纹图谱
- 血清蛋白质组样品处理方法的比较分析被引量：2
- 2007年
- 刘希成梁恒田真张霖陈阳
- 关键词：双向电泳蛋白质组学血清
- 人血清蛋白质组学方法的比较和优化被引量：3
- 2007年
- 目的:对人未做处理的血清以及去除白蛋白和免疫球蛋白G(IgG)血清的蛋白质组学方法进行比较和优化。方法:应用双向电泳(2-DE)方法分离了未做处理的以及去除白蛋白和免疫球蛋白G(IgG)的血清,比较优化了高温变性、水化液成份组成及泡胀方式等影响血清2-DE分离效果的因素,并用质谱分析鉴定未做处理和已处理血清的2-DE谱图中部分差异蛋白点。结果:得到了分辨率和重复性较好的2-DE谱图,未做处理的血清、去除白蛋白及IgG血清的平均蛋白质点分别为(482±18)个和(523±29)个,质谱分析了9个差异蛋白点,鉴定为8种蛋白质,其中7种为功能蛋白质。仅出现在未做处理血清中的蛋白有4种,分别是维生素A结合蛋白、可溶性尿激酶血纤维蛋白溶酶原激活剂受体、蛋白激酶1抗原、血清白蛋白。4种蛋白仅出现在去除白蛋白和IgG的血清中,分别是NADH脱氢酶辅酶β亚基、肌动蛋白结合蛋白M1、T细胞活性受体β链、血小板生长因子C。结论:去除高丰度蛋白可增加一些低丰度蛋白质的检出,但非特异性吸附会导致部分功能蛋白质的丢失。
- 刘希成田真梁恒张霖陈阳
- 关键词：双向电泳蛋白质组学血清
- 运用蛋白质组学方法研究肾阳虚异病同证的思路与方法被引量：16
- 2005年
- 探讨运用蛋白质组学技术研究肾阳虚异病同证的思路与方法。分析蛋白质组学与证候的内在联系,采用双向电泳(2-DE) +质谱(MS) +数据库的蛋白质组解决方案及药理学实验方法,探求肾阳虚证的蛋白质学本质。
- 黄黎明梁恒
- 关键词：证候肾阳虚异病同证蛋白质组双向电泳
- 肾阳虚证候的人血清比较蛋白质组学分析被引量：37
- 2007年
- 利用双向电泳(2-DE)优化分离了除去高丰度蛋白(白蛋白和IgG)的老年体虚肾阳虚患者(以健康组为参照)的血清样本,对比分析pH4～7范围的2-DE谱图,肾阳虚患者和参照组的平均蛋白点分别为(393±32)和(455±19)个.其中肾阳虚证候表达量上调2倍(P<0.05)以上的蛋白点有26个,下调2倍以上的有33个.用质谱获得上述差异蛋白的肽质量指纹图谱,并经数据库检索共鉴定出了49种差异蛋白质,其中有10种在肾阳虚血清中特异表达,有6种在健康组血清中特异表达.蛋白功能分析发现,其中33种蛋白质的差异表达与肾阳虚证密切相关.蛋白质TCRβ及transthyretin的蛋白印迹实验验证了2-DE的结果.该研究结果为阐明中医肾阳虚证的机理提供了一条新途径.
- 刘希成梁恒田真刘颖陈阳张霖
- 关键词：双向凝胶电泳蛋白质组学血清肾阳虚证
