国家自然科学基金(30500232)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
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- 小鼠CD36基因片段合成、表达及GST融合蛋白的表达和纯化被引量：2
- 2008年
- 目的获取小鼠CD36基因片段,并高效表达和纯化GST-CD36融合蛋白。方法设计合成CD36的基因功能片段,测序后,通过酶切克隆至表达载体pGEX-5X-2,构建重组表达载体,并导入E.coli BL21宿主菌中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组的GST融合蛋白,亲和层析纯化表达产物,SDS-PAGE进行分析鉴定。结果获得小鼠CD36基因片段,测序结果与GenBank的基因序列一致,重组GST融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子量28.5kDa处,出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白。结论合成小鼠CD36基因片段,并在E.coli BL21中高效表达,亲和层析后获得高纯度GST-CD36融合蛋白。
- 王欣陈莹陈杰
- 关键词：基因合成纯化
- CD36功能肽段对小鼠实验性矽肺组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响
- 2009年
- 目的观察CD36功能肽段YRVRYLAKENITQDPEDH(93-110)对小鼠实验性矽肺纤维化是否有阻抑作用。方法将小鼠按体重随机分为4组:生理盐水组、SiO2模型组、CD36功能肽段组[YRVRYLAKENITQDPEDH(93-110)]、CD36对照肽段组[TVDGVYKVFNGKDNISKV(208-225)]。采用暴露式气管内注入法染尘,分别于7、14、21 d处死动物,测定小鼠肺脏器系数和采用免疫组织化学染色法测定肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果在染尘后14 d、21 d时,小鼠肺脏器系数和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达明显低于SiO2模型组和CD36对照肽段组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD36功能肽段(93-110)对小鼠实验性矽肺纤维化具有明显的抑制作用。
- 吕丽娜王欣陈莹刘芳炜陈杰
- 关键词：CD36矽肺二氧化硅
- CD36功能肽段阻抑矽肺纤维化的实验研究
- 2010年
- 目的观察CD36功能肽段YRVRYLAKENITQDPEDH(93-110)对小鼠实验性矽肺纤维化的阻抑作用。方法将小鼠按体重随机分为4组:生理盐水组、SiO2模型组、CD36功能肽段组(93-110)、CD36对照肽段组(208-225)。采用暴露式气管内注入法染尘,分别于第7、第14、第21天处死动物,HE、VG染色进行肺组织病理学形态观察,采用碱裂解法测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果染尘7 d,病理检查表明,CD36功能肽段组小鼠肺组织肺泡炎症较SiO2模型组和CD36对照肽段组轻。小鼠羟脯氨酸含量在各组间的差异也没有统计学意义(P>0.05)。在染尘后14 d、21 d时,CD36功能肽段组小鼠肺组织纤维化程度明显轻于SiO2模型组和CD36对照肽段组小鼠,羟脯氨酸含量明显低于SiO2模型组和CD36对照肽段组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD36功能肽段对小鼠实验性矽肺纤维化具有明显的抑制作用。
- 吕丽娜王欣陈莹刘芳炜陈杰
- 关键词：CD36羟脯氨酸肺纤维化
- 大鼠CD36基因真核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2009年
- 目的:构建大鼠CD36真核表达载体,并在293T细胞中表达。方法:应用RT-PCR技术,从大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞提取的总RNA中,获得CD36基因编码序列片段,克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,以脂质体介导法转染至293T细胞,通过荧光显微镜和Western blot检测其在293T细胞中的表达。结果:酶切和测序证明重组真核表达载体pEGFP-N1-CD36构建成功,荧光显微镜及Western blot确认目的基因序列在293T细胞中过表达。结论:成功构建大鼠CD36基因的重组真核表达载体pEGFP-N1-CD36,并在293T细胞中过表达。
- 王欣陈莹陈杰
- 关键词：CD36真核表达载体293T细胞
