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猪卵丘卵母细胞复合体和裸卵中卵母细胞发育及基因表达差异的研究被引量：8: 2008年; 【目的】研究探讨卵丘细胞的完整性在支持和促进猪卵母细胞成熟过程中发挥的重要作用以及卵丘与卵母细胞互作的分子机理。【方法】对具有完整致密卵丘细胞包裹的和无卵丘细胞包裹的猪卵母细胞进行了体外成熟培养试验,应用mRNA差异显示(DDRT-PCR)和半定量反转录PCR技术(RT-PCR),对这2类猪卵母细胞中mRNA的差异表达进行研究,得到了14条差异表达条带,经过回收、克隆、测序后,再运用半定量(RT-PCR)进行检测。【结果】体外培养的裸卵细胞的各项成熟指标均低于卵丘-卵母细胞复合体。3个基因(PELP1,Myo5b and CAST)和一条新EST序列在有卵丘和无卵丘的猪卵母细胞中表现出差异表达。分离得到的差异表达基因在雌激素受体调节、细胞膜间的信息传导和细胞器物质运输等过程中发挥重要的作用。【结论】这些差异基因可能参与了卵丘细胞与卵母细胞间的相互作用,对卵母细胞的成熟具有重要作用。; 朱桂玉冯书堂李吉涛牟玉莲潘登科郭炳冉; 关键词：猪卵母细胞体外成熟

近交培育五指山小型猪GHR基因的克隆及其真核表达载体的构建被引量：4: 2007年; 目的探讨近交培育五指山猪矮小的分子机理,为五指山猪实验动物化奠定基础。方法近交系五指山猪肝脏组织提取总RNA,然后RT-PCR成功扩增出GHR基因,克隆入pGEM-Teasy载体进行测序,并与正常猪GHR基因序列进行比对;然后经SalⅠ和XbaⅠ双酶切回收后与同样经过双酶切回收的pEGFP-C1真核表达载体连接,构建五指山猪GHR基因真核表达载体。结果测序结果表明:五指山猪GHR基因编码区包括639个氨基酸;经过酶切和测序验证五指山猪GHR基因真核表达载体构建成功。结论经序列比对后发现GHR信号肽编码区发生两处氨基酸替换,可能会影响到生长激素的胞内运输;生长激素受体胞内域编码区发生多处突变,并且导致相应氨基酸发生替换,可能会影响生长激素受体的下游信号转导。五指山猪GHR基因真核表达载体的成功构建为进一步研究GHR的功能和下游信号转导奠定了基础。; 李吉涛牟玉莲张莉杨述林李奎冯书堂; 关键词：近交系 GHR基因真核表达载体

实验用五指山小型猪正常生理值测定被引量：17: 2007年; 目的建立中国实验用五指山小型猪正常生理参考值。方法选用24头中国实验用五指山小型猪,雌雄各半,对其体重、体温2、0项血液学指标2、1项血清生化指标、4项心电图指标、尿常规、主要脏器重量和脏器系数进行了测定,并选用同一批动物对其血液学、血清生化、心电图等生理指标进行了为期4个月的连续测定。结果五指山小型猪部分指标如血液学的WBC、LYM%、GRAN%、PCT,血清生化指标如ALP、P、Na、Cl雌雄动物相差显著,其他指标较一致。心电图指标、体重、主要脏器系数雌雄较一致,部分生化指标如GGT等与临床人正常值较接近。动态测定结果提示各项主要指标测定结果较稳定,随着饲养时间的延长,少数血液生化指标如WBC、GOT有一定的改变,但幅度较小。结论初步建立了中国实验用五指山小型猪正常生理参考值,这些生理数据的采集为其进一步开发和应用提供了有益的参考。; 靳洪涛凡春荣李慧李晋李吉涛王学锋冯书堂王爱平; 关键词：五指山小型猪血液学指标生化指标心电图指标脏器重量

生长因子EGF、bFGF对猪孤雌胚体外发育的影响被引量：4: 2007年; 在胚胎发育的不同阶段，分别在培养基中添加EGF和bFGF，研究EGF和bFGF对猪孤雌胚体外发育的作用。结果表明：在1细胞阶段添加EGF或bFGF，添加EGF能够显著提高孤雌胚的卵裂率（P〈0．05）；2～4细胞阶段添加EGF和bFGF，添加EGF组和添加bFGF组的囊胚率都显著高于对照组（P〈0．05），而添加bFGF组的囊胚率和囊胚细胞数都略高于对照组和添加EGF组。说明EGF和bFGF有利于猪孤雌胚的体外发育，而且，bF-GF能够通过提高囊胚细胞数而提高猪孤雌胚的质量。; 刘吉潘登科张莉牟玉莲张勇杨述林王子荣冯书堂; 关键词：体外发育

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国家科技重大专项(2004BA717B-01)