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血清结核分枝杆菌复苏因子抗体检测方法在肺结核诊断中的应用价值被引量：6: 2014年; 肺结核是一种慢性传染病,在患病过程中针对MTB各种抗原可产生多种特异性抗体,因此,血清学检测已成为肺结核诊断的辅助方法,近几年免疫学诊断逐渐引起人们的重视,人们更加关注从MTB分泌蛋白中寻找具有诊断价值的特异性抗原.MTB复苏因子（Rpf）蛋白质是迄今发现的第1个能使休眠MTB恢复生长繁殖能力的分泌型蛋白,可引起较强的免疫应答[1-2].我们将复苏因子抗体作为肺结核诊断的标志物,结合已成熟应用的肺结核辅助诊断的免疫印迹法建立了血清MTB复苏因子IgG抗体（RpfE-Ab）检测的新方法,并探讨其在肺结核诊断中的应用价值.; 邢爱英刘忠泉杜博平孙琦贾红彦魏荣荣刘洋曹廷明杜凤娇古淑香张宗德; 关键词：肺结核诊断血清学检测抗体检测结核分枝杆菌慢性传染病免疫学诊断

基因芯片技术在结核分枝杆菌耐药检测及菌种鉴定中的应用被引量：4: 2015年; 目的应用基因芯片技术快速检测结核分枝杆菌的耐药基因型以及分枝杆菌菌种基因型，探讨基因芯片技术检测结核分枝杆菌耐药性和基因型的临床价值。方法应用菌种分型基因芯片技术和间隔区寡核苷酸分型（spacer oligonucleotide typing，Spoligotyping）技术对长沙市中心医院2011年1月至2012年12月的临床标本分离菌株137株进行菌种鉴定。对鉴定为结核分枝杆菌的菌株应用绝对浓度法进行利福平和异烟肼药物敏感性检测。并进一步对结核分枝杆菌临床分离株（利福平耐药、异烟肼耐药、敏感株）应用耐药基因芯片技术对rpoB、katG、inhA基因的野生型位点及各突变位点进行检测。即rpoB基因中1个或多个位点的碱基突变为利福平耐药，katG、inhA基因任何基因中的1个或多个位点的碱基突变为异烟肼耐药。Spoligotyping法和基因芯片法菌种鉴定比较应用Kappa检验，绝对浓度法和基因芯片法药物敏感性比较采用χ^2检验和Kappa检验，均以P〈0．05为差异有统计学意义。结果（1）与绝对浓度法比较，对利福平敏感和异烟肼敏感的菌株45株，耐药基因芯片法检测鉴定为敏感株、即野生型的rpB基因42株，符合率为93．3％（42／45）（不符合的1株为511TC突变，1株为531C-T突变，1株为515A—T突变）；hatG基因45株，符合率为100．0％（45／45）；inhA基因43株，符合率为95．6％（43／45）（不符合的2株为inhA-15C-T突变）。（2）与绝对浓度法比较，对利福平轻度耐药的耐药菌株18株，耐药基因芯片检测鉴定为rpoB基因突变型的16株，符合率为88．9％（16／18），且与531、516、526、511位点突变相关。对利福平高度耐药的耐药菌株19株，耐药基因芯片检测全部鉴定为咖B基因突变型，符合率为100．0％（19／19），且与531、516、526、511位点突变相关。（3）与绝对浓度法比较，对异烟肼轻度耐药的�; 石国民喻容彭雪峰石燕聂英齐志强陈拥军向延根刘忠泉; 关键词：结核分枝杆菌微生物敏感性试验寡核苷酸序列分析

结核分枝杆菌复苏因子对结核性胸腔积液中结核分枝杆菌生长促进作用的探索被引量：2: 2014年; 目的探讨结核分枝杆菌复苏因子（resuscitationpromotingfactor，Rpf）对结核性胸腔积液中病原菌生长的促进作用，以期提高临床标本体外培养阳性率，缩短培养时间。方法选择2012年10月至2013年10月期间北京胸科医院62例结核性胸膜炎患者，抽取胸腔积液经过离心处理后分别接种于改良罗氏培养基，以及含高、低浓度Rpf的MiddleBrook7H11固体培养基（简称“7H11培养基”）和生理盐水7H11培养基（生理盐水阴性对照组）中，每隔3d观察菌落形成情况，阳性者行抗酸染色（AFB）、PCR扩增试验及DNA测序进行菌种鉴定，观察比较高、低浓度Rpf对Mtb的促进生长作用。利用统计软件SPSS17．0进行统计学分析。Rpf培养组与改良罗氏培养组，以及Rpf培养组与生理盐水阴性对照组Mtb培养阳性率比较采用配对计数资料的x2检验；不同浓度Rpf培养组与生理盐水阴性对照组可视菌落平均时间（d）和阳性菌落数量比较采用配对样本t检验。以P〈0．05为差异有统计学意义。结果（1）结核性胸腔积液改良罗氏培养组中的Mtb培养阳性率为16．1％（10／62），含Rpf的7H11培养基中的Mtb培养阳性率为43．5％（27／62），两者比较差异具有统计学意义（x2=12．84，P〈0．01）；（2）含高、低浓度Rpf7H11培养基的可视菌落形成时间各为（20．92±0．58）d和（21．69±0．50）d，两组间差异无统计学意义（t=0．085，P〉0．05），但显著快于生理盐水对照组（不含Rpf）的（38．08±0．94）d（t值分别为10．19、9．91，P值均GO．001）；（3）含高、低浓度Rpf的7H11培养基菌落形成单位数各为（34．12±4．06）×10^2和（37．27±5．63）×10^2，两组间差异无统计学意义（t=0．45，P〉0．05），但显著多于生理盐水对照组（3．77±0．88）×10^2（t值分别为5．88、7．30，P值均〈0．001）。结论接种结核性胸腔积液后，含Rpf的7H11培养; 邢爱英刘忠泉杜博平孙琦贾红彦魏荣荣刘洋曹廷明杜凤娇古淑香马玙张宗德; 关键词：结核分枝杆菌

结核性胸腔积液中结核分枝杆菌培养新方法的建立被引量：1: 2014年; 目的建立结核性胸腔积液中结核分枝杆菌复苏培养的新方法，以期提高临床标本体外培养阳性率，缩短培养时间。方法抽取结核性胸膜炎患者的胸腔积液，离心处理后分别接种于改良罗氏培养基，以及含复苏因子的Middlebrook7Hll固体培养基（简称“7Hll培养基”）和生理盐水（NS）7HII培养基（NS阴性对照组）中，每隔3d观察菌落形成情况，阳性者行抗酸染色（AFB）、PCR扩增试验及DNA测序进行菌种鉴定，观察比较Rpf对Mtb的促进生长作用。利用统计软件SPSS17．0进行统计学分析，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果（1）结核性胸腔积液改良罗氏培养组中的Mtb培养阳性率为16．1％（10／62），含Rpf的7H11培养基中的Mtb培养阳性率为43．5％（27／62），两者比较差异具有显著统计学意义（x2=12．84，P〈0．01），（2）含Rpf7H11培养基的可视菌落形成时间各为（20．924±0．58）d，显著快于NS阴性对照组（不含Rpf）的（38．084±0．94）d（t值分别为10．19，P值均〈0．001）；（3）含Rpf的7H11培养基菌落形成单位数各为（34．125-4．06）×10。，显著多于NS阴性对照组（3．774±0．88）×102（t值分别为5．88，P值均〈0．001）。结论接种结核性胸腔积液后，含Rpf的7H11培养基较改良罗氏培养基可提高Mtb的培养阳性率，缩短培养时间。; 杜博平邢爱英刘忠泉孙琦贾红彦魏荣荣刘洋曹廷明杜凤娇古淑香马玙张宗德; 关键词：分枝杆菌结核

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首都卫生发展科研专项(2011-1010-01)

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