无锡市社会发展科技计划项目(CSZ00730)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：缪竞诚杨吉成盛伟华叶震敏更多>>
- 相关机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：无锡市社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-24基因修饰增强CIK细胞对HL-60细胞的细胞毒作用被引量：4
- 2009年
- 目的:研究IL-24基因修饰的CIK细胞与同源树突状细胞共培养后对白血病细胞的杀伤作用及其机制。方法:从健康人外周血单个核细胞中常规诱导DC和CIK细胞,电穿孔法将IL-24基因导入CIK细胞中(获得细胞为CIK-IL24),RT-PCR和ELISA法检测CIK细胞中IL-24基因的表达,FCM和ELISA法检测转基因前后CIK表型及分泌细胞因子能力的变化,将CIK细胞和同源DC共培养,FCM法检测共培养的DC-CIK细胞对HL-60细胞细胞毒活性的变化。结果:通过电穿孔法成功将IL-24基因导入CIK细胞,与对照组相比,转IL-24基因后CIK细胞中CD3+、CD3+CD56+细胞的比例无明显改变,CD4+CD25+细胞比例显著下降。IL-24可上调CD3+CD56+细胞表面粘附分子CD54、CXCR4的表达,转染IL-24基因后CIK分泌TNF-α和IFN-γ的能力显著增强,与DC共同作用HL-60细胞时转染IL-24基因后的CIK细胞细胞毒活性明显增强。结论:通过IL-24基因修饰,明显增强了CIK细胞对HL-60细胞的杀伤能力,其机制与IL-24促进CIK分泌TNF-αI、FN-γ,上调CIK细胞表面粘附分子的表达,减少CD4+CD25+调节性T细胞比例等密切相关。
- 夏卫郁心王浦南徐洪卫陈宇奚华新杨吉成缪竞诚
- 关键词：人IL-24CIK细胞HL-60细胞细胞毒
- 腺病毒载体介导的人IL-24基因对HL-60白血病细胞体外培养的影响被引量：2
- 2008年
- 目的构建人IL-24的腺病毒载体Ad-IL24，观察Ad-IL24对HL-60细胞体外培养的影响。方法以pcDNA3.0-IL24重组质粒为模板PCR扩增IL-24基因，酶切并连接到带有绿色荧光蛋白（GFP）标记的pAdTrack-CMV质粒上，Pme I线性化重组质粒pAdTrack-CMV-IL24，并与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌，获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL24，经Pac I线性化后转染QBI-293A细胞，收获重组病毒Ad-IL24。将它感染HL-60细胞，通过激光扫描共聚焦显微镜（ISCM）、MTT和流式细胞术（FCM）法检测IL-24对HL-60细胞生长的影响，免疫细胞化学分析凋亡因子的改变，ELISA检测重组病毒对HL-60细胞分泌γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。结果成功构建重组腺病毒载体pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL24并获得高滴度的重组腺病毒Ad-IL24，各种检测方法表明IL-24基因能抑制HL-60细胞生长，诱导凋亡，IL-24还能下调HL-60细胞Bcl-2的表达并刺激它分泌二级细胞因子IFN-γ和TNF-α。结论IL-24能抑制HL-60细胞生长、诱导凋亡，它可通过下调HL-60细胞Bcl-2的表达并刺激其分泌具有抗肿瘤活性的二级细胞因子来发挥效应。
- 郁心叶震敏盛伟华杨吉成缪竞诚
- 关键词：人IL-24腺病毒载体HL-60细胞
- IL-24基因修饰的树突状细胞促进CIK细胞对肺癌细胞的杀伤作用被引量：2
- 2009年
- 目的研究IL-24基因修饰的树突状细胞（DC）与同源细胞因子诱导的杀伤细胞（cyto—kine-induced killer，CIK）共培养后对A549肺癌细胞的杀伤作用及其机制。方法从健康人外周血单个核细胞中常规诱导DC、CIK细胞，同时抽提重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pTrack—CMV—IL-24，PacⅠ酶切线性化后脂质体转染QBI-293A细胞，收获Ad—IL-24重组病毒。将IL-24基因通过重组病毒导入已负载肿瘤抗原的DC，获得细胞称为DC—IL-24。RT—PCR和ELISA法检测DC中IL-24基因的表达，FCM和ELISA法检测DC表型及分泌细胞因子能力的变化，将DC和CIK细胞混合培养，溶血试验检测CIK细胞产生穿孔素的能力，FCM法检测共培养的DC-CIK细胞对A549肺癌细胞细胞毒活性的变化。结果获得了高滴度的重组病毒Ad—IL-24并成功将IL-24基因导入DC，在倒置荧光显微镜下可观察到荧光，IL-24可上调DC表面CDSO、CD83、HLA—DR、CIMO、CXCR4分子的表达，转染后DC分泌IL-12、TNF-α仅和IL-24的能力显著增强，DC—IL-24更能促进CIK细胞产生穿孔素，与同源CIK细胞共培养后对A549肺癌细胞的细胞毒活性明显增强。结论IL-24基因修饰的DC能增强自体CIK细胞产生特异性抗肿瘤免疫，其机制与IL-24能促进DC表型成熟，分泌Th1型细胞因子，维持DC活化状态，进而促进CIK细胞活化密切相关。
- 郁心夏卫王浦南徐洪卫陈宇奚华新杨吉成缪竞诚
- 关键词：IL-24树突状细胞CIK细胞A549细胞
