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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2008-21)
作品数:
1
被引量:5
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相关作者:
崔雷
谭复善
孟庆文
李文超
秦红刚
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相关机构:
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
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发文基金:
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目
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2009
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鸡Mx基因的表达及其抗血清的制备
被引量:5
2009年
Mx蛋白已被证明具有抗A型流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的生物活性。本研究通过PCR扩增,将Mx基因克隆至pMD18-T载体;经测序验证后将Mx基因克隆到原核表达载体pProExHTa和pcDNA3.1中。以构建的重组质粒pProExHTa-Mx转化大肠杆菌BL21,进行诱导表达,以切胶纯化方式回收了Mx融合蛋白,加佐剂乳化,免疫新西兰白兔制备抗血清;SDS-PAGE和western blot分析表明:Mx基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式稳定表达,表达产物的相对分子量约80 ku,与预期值相符;抗血清能与Mx蛋白发生特异性反应。以真核表达重组质粒pcDNA3.1-Mx转染293T细胞,间接免疫荧光试验结果表明:原核表达蛋白免疫动物制备的抗血清与真核表达的Mx蛋白发生良好的免疫反应,表明用原核表达的Mx蛋白具有真核表达Mx蛋白相似的免疫学活性。抗血清的制备为鸡Mx蛋白的功能研究、Mx蛋白在转基因动物机体中表达的检测奠定了基础。
谭复善
李文超
崔雷
刘丹
秦红刚
孟庆文
关键词:
MX基因
原核表达
抗血清
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