云南省应用基础研究基金(2009CD181)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
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- ITGA6 shRNA抑制非小细胞肺癌H460SM细胞锚定非依赖生长和侵袭被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨慢病毒介导α6整合素(integrinα6,ITGA6)shRNA对人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)H460SM细胞生长和侵袭的影响。方法:实时定量PCR和Western blotting检测ITGA6在9种NSCLC细胞中的表达。慢病毒介导ITGA6 shRNA感染H460SM细胞后,实时定量PCR和Wesern blotting检测H460SM中ITGA6的表达,显微镜下观察H460SM细胞形态的变化,MTS法检测细胞增殖,软琼脂实验检测H460SM细胞锚定非依赖性生长,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,迁移和侵袭实验检测H460SM细胞体外迁移和侵袭能力。结果:ITGA6在7种人NSCLC细胞中均有表达,H460SM细胞中ITGA6表达水平明显高于亲本H460细胞[(8.75±0.09)vs(5.78±0.26),P<0.01]。慢病毒介导ITGA6shRNA稳定感染H460SM细胞后的H460SM-75、H460SM-76细胞中,ITGA6表达水平明显低于阴性对照组H460SM-NS细胞[(0.11±0.04)、(0.22±0.04)vs(1.00±0.01),P<0.01]。H460SM-75、H460SM-76细胞增殖活性与H460SM-NS细胞无差异(P>0.05),且凋亡率、细胞增殖指数、G0/G1期细胞的比例也无差异(P>0.05)。H460SM-75、H460SM-76细胞的克隆形成率明显低于H460SM-NS细胞[(18.87±1.47)%、(18.85±1.11)%vs(20.81±1.38)%,P<0.05],迁移率[(43.92±0.41)%、(24.10±0.33)%vs(100.00±0.50)%,P<0.01]和侵袭率[(7.04±2.96)%、(4.68±0.27)%vs(100.00±6.74)%,P<0.01]也明显低于H460SM-NS细胞。结论:抑制ITGA6的表达可以抑制NSCLC细胞锚定非依赖性生长、迁移和侵袭,但不影响NSCLC细胞增殖和凋亡。
- 陈艳王熙才伍治平金从国周永春黄云超
- 关键词：非小细胞肺癌迁移
- 整合素α6β4在肿瘤的侵袭和转移中的作用被引量：2
- 2012年
- 整合素α6β4在肿瘤的侵袭和转移中的作用不仅依赖于它的黏附特性,而且还与它潜在的信号传递特性有关。本文对整合素α6β4在肿瘤的侵袭和转移中的作用进行综述。
- 焦琳田爱柏茂树王熙才
- 关键词：整合素Α6Β4肿瘤
- 慢病毒介导ITGB4 shRNA对H460SM细胞增殖的抑制作用
- 2012年
- 目的体外实验研究β4整合素shRNA对非小细胞肺癌H460SM细胞增殖的抑制作用,为非小细胞肺癌早期诊断和治疗提供新的靶点。方法实时定量RT-PCR验证β4整合素表达水平的变化,显微镜下观察细胞形态的变化。通过细胞计数和MTS实验分析抑制β4整合素表达对H460SM细胞增殖的影响;流式细胞术分析抑制β4整合素表达对H460SM细胞凋亡和细胞周期的影响。结果与阴性对照组(H460SM-NS)比较,稳定表达β4整合素shRNA的实验组(H460SM-68、H460SM-71)细胞β4整合素表达水平明显降低(P<0.01);与阴性对照组比较,实验组细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05);实验组细胞凋亡率明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);实验组细胞增殖指数PI明显低于阴性对照组(P<0.05),G0/G1期细胞数明显高于阴性对照组(P<0.05),提示抑制β4整合素的表达,细胞周期可能被阻滞在G1/S检测点,导致细胞增殖受到抑制。结论抑制β4整合素的表达,可以抑制非小细胞肺癌H460SM细胞增殖,并可能诱导H460SM细胞凋亡。癌细胞增殖受到抑制可能与细胞周期调控有关。抑制β4整合素的表达,可能不影响非小细胞肺癌细胞凋亡。
- 陈艳周永春金从国伍治平刘馨陈晓群李佳王熙才
- 关键词：非小细胞肺癌细胞增殖细胞周期
- 慢病毒介导β4整合素shRNA对人非小细胞肺癌H460SM细胞皮下移植瘤生长的影响
- 2012年
- 目的:研究慢病毒介导的β4整合素(integrinβ4,ITGB4)shRNA对人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法:采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测ITGB4在不同人NSCLC细胞中的表达水平;慢病毒介导ITGB4shRNA抑制NSCLCH460SM细胞中ITGB4的表达,再用RFQ-PCR和蛋白质印迹法检测ITGB4的表达水平,评价基因沉默效率;裸鼠随机分为3组,皮下分别接种H460SM-NS细胞(对照组)、稳定表达ITGB4shRNA的H460SM-68和H460SM-71细胞。每隔1d测量裸鼠体质量和肿瘤大小,比较各组裸鼠肿瘤生长情况。处死裸鼠,剥离肿瘤,测量肿瘤大小和质量。结果:ITGB4在大多数人NSCLC细胞中均有表达,其中大细胞肺癌H460SM和NCI-H460细胞中ITGB4表达量明显高于NCI-H661细胞(P<0.01),H460SM细胞中ITGB4表达水平明显高于亲本NCI-H460细胞(P<0.01);ITGB4shRNA转染组细胞中ITGB4的表达水平明显低于阴性对照组细胞(P<0.01);ITGB4shRNA转染组皮下移植瘤生长速度明显低于阴性对照组(P<0.01)。结论:ITGB4表达可能与人NSCLC细胞的致瘤、侵袭、转移的表型有关;抑制ITGB4的表达,可以抑制人NSCLC细胞H460SM裸鼠皮下移植瘤的生长。
- 陈艳杨桂梅周永春刘馨金从国陈晓群李佳王熙才
- 关键词：慢病毒感染
- sox4基因与肺癌关系的研究进展被引量：3
- 2013年
- 肺癌发病率及病死率居恶性肿瘤首位,严重威胁着人类的健康,但目前仍存在早期诊断率低、治疗效果差及预后不良等问题,开发新的肺癌标志物及治疗位点成为迫切的需要。近年的研究显示,sox4基因在各类型肺癌中均呈异常的高表达,与肿瘤的生物学行为密切相关,因此深入研究该基因与肺癌的关系对肺癌的早期诊断、预后判断和治疗具有重要意义。
- 周永春王熙才黄云超
- 关键词：肺癌
- SCID小鼠宣威肺癌原位模型的构建及生物学特性研究被引量：3
- 2012年
- 背景与目的宣威女性肺癌发病率居全国首位,亟待深入探讨其发病机制。本研究拟建立SCID小鼠原位宣威肺癌模型,为该病的深入研究提供实验平台。方法将宣威肺癌细胞XWLC-05分别以高低剂量接种于SCID小鼠肺原位,并与皮下移植瘤比较,观察成瘤率、成瘤特性、自发性转移及生存情况。结果原位移植高低剂量组的成瘤率分别为81%和83%,其中高剂量组接种后13天小鼠出现恶液质、对侧肺及胸腔的广泛粘连,无远处转移;低剂量组接种后25天小鼠出现恶液质及远处转移。皮下移植高低剂量组成瘤率分别为100%及94.5%,无远处转移。原位移植组组内及皮下与原位移植组组间的转移率存在统计学差异(P<0.05)。两组组内和组间的生存率比较有统计学差异(P<0.001)。结论成功建立了宣威肺癌的SCID小鼠原位动物模型,为该病的深入研究奠定了实验基础。
- 周永春陈艳王熙才刘馨施湖涛姚乾金从国伍治平黄云超
- 关键词：肺肿瘤SCID小鼠
