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广东省教育部产学研结合项目(2006D90504011)

作品数：7 被引量：43H指数：3
相关作者：何小维赵喜红李文美刘晓云杨连生更多>>
相关机构：华南理工大学生物技术有限公司更多>>
发文基金：广东省教育部产学研结合项目广东省科技攻关计划国家火炬计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 3篇医药卫生
  • 1篇轻工技术与工...
  • 1篇理学

主题

  • 3篇杆菌
  • 2篇乙肝
  • 2篇乙型
  • 2篇乙型肝炎
  • 2篇肝炎
  • 2篇病毒
  • 2篇大肠杆菌
  • 1篇蛋白复性
  • 1篇淀粉
  • 1篇淀粉颗粒
  • 1篇乙肝E抗原
  • 1篇乙肝表面抗原
  • 1篇乙型肝炎E抗...
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇整合酶
  • 1篇正交
  • 1篇正交试验
  • 1篇人免疫缺陷病...
  • 1篇体外复性

机构

  • 7篇华南理工大学
  • 3篇生物技术有限...

作者

  • 7篇何小维
  • 3篇赵喜红
  • 2篇杨连生
  • 2篇周倩
  • 2篇罗志刚
  • 2篇刘晓云
  • 2篇李文美
  • 1篇张本山
  • 1篇纪秋宇
  • 1篇王海龙
  • 1篇彭运平
  • 1篇黄强
  • 1篇王继华
  • 1篇杜云英
  • 1篇赵永青
  • 1篇郭秋华

传媒

  • 3篇现代生物医学...
  • 1篇现代化工
  • 1篇卫生研究
  • 1篇食品工业科技
  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 1篇2010
  • 3篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
共 7 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
HIV-1整合酶基因合成与其在大肠杆菌中的高效表达
2009年
目的:通过人工合成HIV-1整合酶(integrase,IN)基因的编码序列,提高目的蛋白的表达。方法:根据IN的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏好的密码子,设计并合成了877碱基,共编码288个氨基酸,克隆入pMD18-T载体,经测序证实后,构建原核表达载体pET-His-p31,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果:酶切及测序结果表明表达载体构建成功,工程菌诱导表达后的电泳图谱在相对分子质量为32kDa的位置出现明显目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的65.9%,Western blot结果表明表达的聚合酶蛋白能与HIV-1阳性血清发生特异性反应。结论:已获得高效表达工程菌pET-His-p31,为下一步研究HIV诊断试剂奠定基础。
赵喜红何小维李文美王继华杨连生彭运平刘晓云
关键词：聚合酶基因合成
尿液HIV-1抗体检测技术被引量：6
2008年
艾滋病常规快速测定方法为检测血液中HIV抗体。尿液检测HIV-1因其具有安全、便捷、成本低等优势,是一种很有发展潜力的检测HIV的全新手段。本文就尿液中HIV-1抗体、尿液检测HIV-1优点以及影响检测的因素等作了综述,对尿液检测产品的的应用及生产现状做了简介,并对尿液HIV-1检测技术的发展前景进行了展望。
纪秋宇何小维罗志刚
关键词：人免疫缺陷病毒抗体艾滋病
大肠杆菌表达包涵体蛋白体外复性研究进展被引量：13
2010年
包涵体形成是大肠杆菌表达重组蛋白常见的问题。因此,为获得大量的活性蛋白而对其包涵体进行复性的研究引起了人们极大兴趣。本文综述了近年来发展起来的低分子量添加物、反胶团、分子伴侣、层析复性等新的复性方法、复性检测方法和体外复性机制。
赵喜红何小维李文美杨连生王继华彭运平刘晓云
关键词：包涵体蛋白复性重组蛋白
乙肝e抗原在大肠杆菌中的高效表达和优化
2009年
目的:探讨乙型肝炎病毒e抗原基因在大肠杆菌中进行高效融合表达,并对表达条件进行优化和影响因素的分析。方法:从乙肝患者阳性血清中提取DNA,设计引物扩增目的基因,按常规方法克隆入pET-GST载体谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导目的基因片段的表达,经超声处理后SDS-PAGE电泳。对表达条件进行正交试验优化,并分析其影响因素的大小。结果:HBeAg以包涵体形式表达出来,其表达的GST融合蛋白的分子质量大约为44KD。最佳的表达条件为温度为30℃,IPTG浓度为0.6mmol/L,诱导时间为2h。其影响因素大小依次为诱导温度>诱导时间>IPTG浓度。结论:乙肝e抗原基因在大肠杆菌中获得了高效表达。
周倩何小维彭运平刘晓云王海龙
关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒E抗原正交试验
毕赤酵母菌高效表达乙肝表面抗原的研究
2009年
目的:筛选高效表达HBsAg的毕赤酵母菌,制备目的蛋白。方法:从已确诊的乙肝病人血清中提取DNA,PCR扩增HBVS基因,将其分别克隆入毕赤酵母胞内表达载体pPICZA中。构建重组质粒pPICZA-S和pPICZA-SH,经SacI线性化后,LiCl化学法转化入酵母菌株GS115、X-33、KM71H和SMD1168。结果:诱导表达后的GS115工程菌单位体积的培养基所得的抗原含量最高,诱导培养基中加入0.1%酪蛋氨基酸后,可抑制目的蛋白的水解,有利于目的蛋白的表达,粗略估算表达量为15.3mg/L,最佳收获时间为72h。结论:经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,所得产物为乙肝表面抗原S蛋白。
杜云英郭秋华何小维
关键词：乙肝表面抗原毕赤酵母菌
重组乙型肝炎病毒e抗原的研究进展被引量：2
2008年
乙型肝炎e抗原(HBeAg)是由HBV DNA C基因区编码的一种非颗粒性的分泌型核壳蛋白,临床上将其作为判断HBV活动性复制的指标之一。HBeAg是重要的生物原材料,广泛用于HBV感染者血清学检测的相关诊断用品的制备。重组HBeAg的表达和纯化技术较为成熟,已经在各种表达系统中成功地表达了目的蛋白。而影响其表达的关键因素包括前C区重要位点变异、载体选取以及RNA干扰(RNAi)的影响作用等。因此,提高重组HBeAg的表达量和纯度,避免与HBcAg交叉反应才能满足相关诊断制品的要求。高质量重组乙肝e抗原的获取,能为改善相关诊断制品奠定物质基础,为开发新型HBV治疗和预防性疫苗提供了依据,同时也为HBeAb检测方法学的优化提供可能。
周倩何小维罗志刚赵喜红
关键词：乙型肝炎E抗原突变
淀粉颗粒的结晶性及非晶化方法被引量：22
2007年
淀粉颗粒的结晶性质及其非晶化处理对淀粉的化学改性具有十分重要的理论和实际意义。从淀粉颗粒的结晶结构和非结晶结构出发,介绍了淀粉颗粒的结晶性、X射线衍射图样和非晶化处理方法。并对提高淀粉反应活性的非晶化方法及其存在的问题进行展望。
赵永青何小维黄强张本山
关键词：淀粉非晶化
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