浙江省自然科学基金(Y204463)
- 作品数：12 被引量：19H指数：3
- 相关作者：陈肖鸣陈聪德张浩川李仲荣李响更多>>
- 相关机构：温州医学院附属育英儿童医院中国人民解放军第180医院温州医学院附属眼视光医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 卵黄囊瘤裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的研究被引量：2
- 2009年
- 目的采取手术标本，在裸鼠皮下连续传代建立人卵黄囊瘤裸鼠移植瘤模型。方法切取睾丸卵黄囊瘤患儿肿瘤组织植入裸小鼠腹股沟皮下，连续传代。观察卵黄囊瘤移植瘤各代生长潜伏期、生长曲线。电子显微镜观察肿瘤组织超微结构、病理形态情况。并通过免疫组织化学染色检测动物模型标本的甲胎蛋白（AFP）、胎盘碱性磷酸酶（PLAP）、细胞角蛋白（CKPan）表达。同时分析肿瘤细胞的染色体数目。结果15个月中连续在裸鼠皮下传7代，成瘤率逐渐升高：前三代的成瘤率分别为20％、40％、65％，此后接种成瘤率为100％，肿瘤生长潜伏期为32d。移植瘤生长曲线与Gompentz函数符合。移植瘤保留了原卵黄囊瘤的组织学特征。免疫组织化学示卵黄囊瘤的标志物AFP、PLAP、CK表达阳性，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。染色体数目分析结果显示染色体数目波动于34～86，可见染色体缺失断裂，不同于正常裸鼠和人染色体数目。结论该模型基本保留了原肿瘤的生物学特性，是卵黄囊瘤基础及临床研究的良好模型。
- 陈聪德陈肖鸣胡才学张浩川秦乐林孝坤
- 关键词：卵黄囊瘤肿瘤移植生物学
- 苦参碱对人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:研究苦参碱(matrine,MAT)对人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖及诱导凋亡的影响。方法:MTT法检测苦参碱对细胞增殖的抑制的量效和时效关系;二脒基苯基吲哚(DAPI)染色检测细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果:MTT法显示苦参碱有明显的抑制增殖作用,且呈时间依赖性和剂量依赖性;DAPI染色可见给药组出现明显核固缩且呈剂量依赖性;流式细胞仪检测1.0mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml浓度的苦参碱作用24h后PA-1细胞的凋亡率依次下降;有明显的G1期阻滞作用,且具有剂量依赖性。结论:苦参碱能通过诱导凋亡、产生G1期阻滞显著抑制PA-1细胞的增殖,且凋亡率具有剂量依赖性。
- 李响胡才学金畅陈聪德陈肖鸣
- 关键词：苦参碱凋亡增殖
- 全反式维甲酸对原代培养卵黄囊瘤细胞系体外生长影响的观察
- 2011年
- 目的:体外观察全反式维甲酸(ATRA)对卵黄囊瘤细胞系细胞体外生长的影响。方法:卵黄囊瘤细胞系细胞持续培养在含ATRA的96孔板中,采用MTT法检测ATRA的体外抗增殖效果,采用流式细胞仪检测ATRA对细胞周期的影响,用相差倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果:MTT法检测发现,ATRA作用后细胞的增殖受到了抑制,随着浓度和时间的增加,其抑制作用增强,与对照组比较差异有统计学意义,P<0.05。流式细胞仪检测结果显示,经ATRA处理后的卵黄囊瘤细胞明显阻滞于G1期,S期比例减少,与对照组比较差异有统计学意义,P<0.05。光镜和透射电镜可观察到经ATRA处理后的卵黄囊瘤细胞部分发生形态学的良性分化:超微下见胞核体积缩小且形态规则,核仁减少和消失,细胞表面微绒毛及树枝状伪足消失。对照组细胞无此表现。结论:ATRA对卵黄囊瘤细胞有诱导分化作用,有效抑制了肿瘤细胞的增殖,其机制可能与引起细胞周期阻滞于G1期有关。
- 张浩川包小周陈聪德陈肖鸣
- 关键词：维甲酸卵黄囊瘤细胞周期
- 全反式维甲酸对儿童卵黄囊瘤细胞增殖及维甲酸β受体表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对儿童卵黄囊瘤细胞诱导分化过程中细胞形态及维甲酸β受体表达的影响。方法:在体外细胞培养的基础上,观察细胞形态学的变化、细胞增殖动力学的变化,采用MTT比色法测定细胞细胞增殖活性,以半定量RT-PCR方法检测维甲酸β受体(RAR-β)mRNA的表达。结果:全反式维甲酸能使卵黄囊瘤细胞形态趋向良性分化,有效地抑制了肿瘤细胞增殖;半定量RT-PCR结果显示,经不同浓度的ATRA处理后的卵黄囊瘤细胞的RAR-βmRNA表达水平均上调。结论:ATRA对卵黄囊瘤细胞有诱导分化作用,ATRA通过上调维甲酸β受体基因表达实现其诱导分化作用。
- 张浩川赵一鸣陈聪德李仲荣陈肖鸣
- 关键词：全反式维甲酸体外培养
- 姜黄素对人卵巢畸胎瘤PA-1细胞株增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- [目的]探讨姜黄素对人卵巢畸胎瘤PA-1细胞株体外增殖、凋亡的影响。[方法]MTT法观察不同浓度不同作用时间下姜黄素对细胞体外增殖的影响,荧光显微镜观察不同药物浓度下DAPI染色凋亡小体,流式细胞仪测量药物对细胞凋亡和细胞生长周期的影响,Re-al-timePCR检测不同药物浓度下凋亡相关基因bcl-2/bax的表达。[结果]随着药物浓度的增高,姜黄素对细胞增殖有明显的抑制作用,并有时间依赖性,凋亡率呈药物浓度依赖性,细胞周期S期比例下降、G2/M期比例升高。Real-timePCR结果示bax相对值增高,bcl-2/bax比值呈下降趋势。[结论]姜黄素在体外对PA-1有抑制增殖、促进凋亡作用,提示其在肿瘤的治疗中可能有一定的价值。
- 胡才学李响金畅陈肖鸣
- 关键词：姜黄素细胞凋亡畸胎瘤卵巢肿瘤
- 小儿睾丸卵黄囊瘤细胞的体外培养及生物学特性研究被引量：3
- 2011年
- 目的 采用组织培养技术在体外培养取自人体的睾丸卵黄囊瘤组织，探讨小儿睾丸卵黄囊瘤组织的体外培养方法及生物学特性。方法 采用组织块培养法培养1例睾丸卵黄囊瘤患儿手术的标本，从形态学、细胞生长动力学、肿瘤内分泌、染色体分析、细胞DNA分析等方面初步研究了小儿睾丸卵黄囊瘤细胞的生物学特性。结果 小儿睾丸卵黄囊瘤细胞无论形态学观察，还是功能学测定，均符合卵黄囊瘤细胞的特征，染色体众数39-97条，并具有体外分泌AFP功能。其特有表现为：细胞贴壁生长，呈短梭形或多角形，细胞密集时可多层重叠生长，肿瘤细胞表面有明显的微绒毛，细胞核形态怪异，细胞倍增时间较长。结论小儿睾丸卵黄囊瘤细胞在体外生长稳定，增殖活跃，肿瘤细胞的纯度较高，可以用于后续的实验研究。
- 张浩川沈金辉陈聪德包小周李仲荣陈肖鸣
- 关键词：卵黄囊瘤睾丸组织培养技术
- 苦参碱抑制人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的研究被引量：5
- 2010年
- 目的探讨苦参碱(matrine,MAT)对人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的影响。方法体外培养人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1,分组予不同浓度苦参碱作用。MTT法检测0.25、0.50、1.0 mg/mL不同浓度苦参碱对细胞增殖的抑制作用以及药物作用的量效和时效关系;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;半定量RT-PCR检测bcl-2/bax mRNA表达水平的变化。结果MTT法显示药物作用后,细胞有明显的抑制增殖作用,且呈时间依赖性和剂量依赖性;流式细胞仪检测不同浓度的苦参碱作用后PA-1细胞的凋亡率依次上升,并与作用时间正相关;细胞周期结果显示苦参碱对PA-1细胞具有明显的G_1期阻滞作用,且具有剂量依赖性。结论苦参碱能使PA-1细胞bcl-2 mRNA和bax mRNA的比值下调,产生G_1期阻滞,从而调节细胞周期,最终导致PA-1细胞在体外的增殖受到明显抑制。
- 陈聪德李响张浩川陈肖鸣李仲荣
- 关键词：苦参碱细胞周期增殖
- 顺铂诱导体外儿童睾丸卵黄囊瘤细胞凋亡及p53的表达
- 2007年
- 目的:探讨p53在顺铂诱导儿童睾丸卵黄囊瘤细胞凋亡发生过程中的作用机制。方法:通过原代培养儿童睾丸卵黄囊瘤细胞获取实验对象,再用顺铂进行凋亡的诱导,TUNEL法检测凋亡细胞,免疫细胞化学方法检测p53表达的变化。结果:在顺铂作用下,细胞发生圆缩脱壁,凋亡小体形成。凋亡指数随着作用时间延长而增加(P<0.01),p53的表达在早期(12h)即达到高峰,此后未见持续增强情况。结论:顺铂能够诱导儿童睾丸卵黄囊瘤细胞的凋亡,而p53表达的增强可能是其重要的环节。
- 陈聪德刘平陈肖鸣张浩川李仲荣
- 关键词：儿童睾丸卵黄囊瘤顺铂P53
- 儿童睾丸肿瘤P53、端粒酶的表达与凋亡的相关研究被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨儿童睾丸肿瘤P53、端粒酶的表达及其与凋亡之间的关系。方法:通过免疫组化以及TUNEL法分别对35例儿童睾丸肿瘤组织进行P53、hTERT及凋亡细胞的检测。结果:在畸胎瘤、卵黄囊瘤、胚胎癌中,P53的表达指数(P53-LI)、hTERT阳性信号面密度(Sv)随着临床分型和恶性度的升高而增大,而凋亡指数(AI)同样随之增高,统计分析结果提示P53、hTERT以及AI与临床分型密切相关(P值均<0.01)。而P53、hTERT与AI呈正相关(P<0.01)。结论:儿童睾丸生殖细胞肿瘤的凋亡是一个多基因参与的复杂过程,P53、端粒酶的表达与肿瘤病理恶性程度及凋亡指数呈正比。
- 陈聪德张华李仲荣刘平陈肖鸣
- 关键词：儿童睾丸肿瘤P53端粒酶凋亡
- 全反式维甲酸对睾丸卵黄囊瘤细胞VEGF表达的抑制作用被引量：1
- 2011年
- 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对睾丸卵黄囊瘤细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的抑制作用。方法在体外细胞培养的基础上,采用MTT比色法测定不同浓度ATRA对睾丸卵黄囊瘤细胞增殖影响,半定量RT-PCR方法检测VEGF mRNA的表达水平,Western Blot法检测VEGF蛋白表达水平。结果 ATRA能抑制肿瘤细胞增殖,RT-PCR结果显示实验组卵黄囊瘤细胞的VEGF mRNA表达水平下调,Western Blot显示实验组卵黄囊瘤细胞的VEGF蛋白表达水平降低,且两者下调作用均呈较明显的时间-剂量依赖性。结论全反式维甲酸可以抑制睾丸卵黄囊瘤细胞的增殖,抑制肿瘤增殖机制可能与下调VEGF的表达有关。
- 张浩川包小周陈聪德李仲荣陈肖鸣
- 关键词：全反式维甲酸体外培养VEGF
