广东省教育厅自然科学基金(Z03008)
- 作品数：5 被引量：29H指数：4
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- 相关机构：华南农业大学广州市儿童医院江门市动物防疫检疫站更多>>
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- 牛结核病巢式PCR快速检测方法的建立被引量：8
- 2006年
- 根据分枝杆菌(mycobacteria)保守的插入序列IS1081设计4条特异性引物,建立了快速检测牛结核病的巢式PCR方法。该方法一次扩增的敏感性是1.35 pg,二次扩增的敏感性是1.35 fg。在对95份PPD阳性牛临床病料组织和23份血液样本的PCR检测中,用引物TB-Q1和TB-Q2做一次扩增,阳性检出率分别为36/95(37.5%)和5/23(21.7%);用引物TB-B1和TB-B2做二次扩增,阳性检出率分别为81/95(85.3%)和14/23(60.9%)。该方法作为辅助PPD试验的快速检测方法用于牛结核病的流行病学调查,具有重要的实用价值和应用前景。
- 亓文宝陈世灿罗满林方正刚贺东生刘镇明黄毓茂
- 关键词：牛结核病巢式PCRPPD
- 牛结核病两种检测方法的比较被引量：4
- 2006年
- 鲁俊鹏罗满林邹潍力李立霞李瑞亭
- 关键词：牛结核病变态反应结核菌素国际贸易
- 牛结核病诊断方法研究进展被引量：10
- 2006年
- 牛结核病主要是由牛分支杆菌引起的一种人兽共患传染病,近年来发病率有所上升,给奶牛养殖业造成了巨大的危害。目前,牛结核病的诊断仍然以传统的迟发性变态反应试验为主,其他诊断方法有根据临床症状和病理变化诊断、抗酸染色法、细菌分离培养法、PCR法、血清学方法、淋巴细胞转化试验、γ-干扰素试验和菌体成分检测法等。为了净化该病,必须提高诊断方法的敏感性和特异性。文章对这些诊断方法及其优缺点做了概述,并指出结核病普查检测时,比较合理的诊断方式是迟发性变态反应试验和间接ELISA法同时运用。
- 鲁俊鹏邹潍力林彦星常孝勇罗满林
- 关键词：牛结核病牛分支杆菌
- 牛结核病荧光定量PCR快速检测方法的建立及初步应用被引量：6
- 2007年
- 目的建立牛结核病荧光定量PCR快速检测方法。方法根据分枝杆菌的插入序列IS1081设计引物和探针,优化反应条件,建立标准曲线,进行特异性、敏感性、重复性实验,并用所建立的方法对临床样品进行检测。结果该方法的敏感性达到了10个拷贝,且特异性高,重复性好。对30份PPD试验和巢式PCR检测都为阳性的临床样本进行荧光定量PCR检测的结果全部为阳性;而对PPD检测阳性,巢式PCR检测为阴性的15份临床样本进行检测时,2份为阳性;在对2份PPD检测阴性而巢式PCR检测阳性的临床样本的检测结果也为阳性。结论成功建立了牛结核病荧光定量PCR快速检测方法,对临床样品的快速检测和牛结核病的早期诊断具有重要意义。
- 亓文宝罗满林周荣白培胜贺东生刘镇明黄毓茂
- 关键词：牛结核病荧光定量PCR巢式PCRPPD
- 牛分枝杆菌重组MPT83蛋白间接ELISA方法的建立被引量：2
- 2007年
- 以纯化的牛分枝杆菌重组MPT83蛋白为包被抗原,建立了检测牛分枝杆菌抗体的间接ELISA方法。确定了间接ELISA各组分的最适反应条件:抗原包被浓度为1μg/mL,酶标二抗稀释度为1∶1600,血清稀释度为1∶60,抗原和血清、血清和二抗均在37℃反应30 min,底物在37℃显色15 min,D655 nm阴性、阳性临界值为0.5。经阻断试验、交叉试验、重复性试验,表明该方法特异性强、重复性好。用该方法对18份结核菌素试验阳性牛血清和36份结核菌素试验阴性牛血清进行检测,结果显示,阳性血清的符合率为27.8%,阴性血清的符合率为91.7%。
- 鲁俊鹏罗满林邹潍力林琳彭南秀
- 关键词：牛分枝杆菌间接ELISA
