国家自然科学基金(30500254)
- 作品数:3 被引量:8H指数:1
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- 相关机构:北京大学第三医院中日友好医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 基因转染脂肪间充质干细胞作为软骨组织工程种子细胞的研究被引量:1
- 2008年
- 目的观察人转化生长因子(hTGF)β2基因转染诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞的定向分化能力,探讨脂肪间充质干细胞作为种子细胞和在基因增强的软骨组织工程中应用的可行性。方法取3周龄Lewis大鼠的脂肪组织,消化法获得脂肪间充质干细胞,pcDNA3,1(+)/hTGFβ2通过脂质体介导转染脂肪间充质干细胞,用免疫化学染色、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测筛选的阳性克隆细胞中hTGFβ2基因与软骨特异性蛋白-Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的情况;然后将基因转染的脂肪间充质干细胞与PLGA支架体外构建细胞-载体复合物,再将其植入裸鼠体内,12周后观察基因增强的组织工程软骨的形成情况。结果从成体大鼠脂肪组织中培养出脂肪间充质干细胞,能大量稳定增殖传代。hTGFβ2基因在脂肪间充质干细胞内能瞬时及稳定表达,并促使Ⅱ型胶原和蛋白多糖合成;细胞-载体复合物在裸鼠体内经12周的培养,可以形成形态、结构接近正常软骨的组织工程软骨。结论pcDNA3.1(+)/hTGFβ2成功转染脂肪间充质干细胞,诱导其向软骨细胞分化,脂肪间充质干细胞可作为基因增强的软骨组织工程较理想的种子细胞。
- 鞠晓东于长隆王卫国敖英芳王健全余家阔崔国庆胡跃林
- 关键词:脂肪干细胞基因转染软骨
- 人转化生长因子β_2基因转染诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞定向分化的实验研究被引量:1
- 2008年
- 目的:探讨脂肪间充质干细胞作为软骨组织工程的种子细胞和基因增强的组织工程的可行性。方法:取3周龄Lewis大鼠的腹股沟脂肪垫,消化法获得脂肪间充质干细胞,通过脂质体介导,将hTGFβ2基因转染到体外培养的脂肪间充质干细胞中,采用免疫组织化学染色、RT-PCR和Western blotting的方法检测目的基因与软骨特异性蛋白——Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的情况。结果:从成体大鼠脂肪组织中培养出脂肪间充质干细胞,体外培养呈成纤维细胞样,能大量稳定增殖传代。原代脂肪间充质干细胞能自发分化为脂肪细胞,传代细胞在胰岛素和地塞米松的作用下生成脂滴向脂肪细胞分化;hTGFβ2基因转入脂肪间充质干细胞能获得瞬时及稳定表达,并促使Ⅱ型胶原和蛋白多糖合成。结论:从脂肪组织中可获得具有多分化潜能的间充质干细胞,并能在体外稳定增殖传代,可自发或经诱导后分化为脂肪细胞;pcDNA3.1(+)/hTGFβ2真核表达载体成功转染脂肪间充质干细胞,诱导其向软骨细胞分化。
- 鞠晓东于长隆敖英芳王健全余家阔崔国庆胡跃林
- 关键词:干细胞成软骨分化