国家自然科学基金(31101858)
- 作品数:7 被引量:5H指数:1
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- 相关机构:军事医学科学院吉林农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 蓖麻毒素气源性中毒对小鼠免疫屏障的影响
- 2013年
- 蓖麻毒素来源广、毒性强、性质稳定,可通过注射、口服、气溶胶等多种方式中毒。为进一步优化蓖麻毒素气溶胶中毒模型,探讨蓖麻毒素气溶胶粒子对气—血屏障、血—胸屏障等免疫屏障的损伤过程,以及实质性免疫器官的病理改变,利用军事医学科学院军事兽医研究所五室已经建立的气溶胶暴露系统,对小鼠进行蓖麻毒素气溶胶的暴露,并于气溶胶暴露后12,30,48 h采集小鼠气管、肺脏、胸腺、脾脏制作病理切片,观察病理变化。结果表明:蓖麻毒素气溶胶粒子能够引起间质性肺炎、脾脏及胸腺细胞变性坏死,从而验证吸入蓖麻毒素气溶胶粒子对免疫屏障的强烈损伤。
- 王蒙王全凯钱军赵思言郑关雨刘林娜
- 关键词:蓖麻毒素气溶胶免疫屏障病理变化
- 蓖麻毒素对原代培养小鼠肺泡上皮细胞的影响被引量:1
- 2013年
- 目的探讨蓖麻毒素气源性中毒中的肺损伤机制。方法取BALB/c雌性小鼠,采用心脏灌注排血、胶原酶和胰蛋白酶原位消化法及组织块细胞迁出培养法,分离培养小鼠肺泡上皮细胞,经刮除法及差相消化贴壁法纯化小鼠肺泡上皮细胞,通过兔抗鼠角蛋白单克隆抗体细胞爬片组化染色法对细胞进行纯度鉴定;经不同终浓度的蓖麻毒素(0、0.000 1、0.001、0.01、0.1、1、10、100μg/ml)处理细胞进行毒性分析;倒置显微镜下观察0.05μg/ml蓖麻毒素对细胞的毒性作用。结果获得的小鼠肺泡上皮细胞纯度达90%以上;随着蓖麻毒素浓度的增加,细胞活力降低,蓖麻毒素浓度与肺泡上皮细胞增殖抑制呈正相关;0.05μg/ml的蓖麻毒素即可引起细胞皱缩、空泡化变性。结论蓖麻毒素可引起原代培养肺泡上皮细胞变性损伤,损伤程度随蓖麻毒素浓度增高而加重,为蓖麻毒素气源性中毒中的肺损伤机制提供了理论依据,同时为进一步探讨蓖麻毒素的毒理作用提供了新的思路。
- 王蒙钱军穆成龙赵思言郑关雨付莹莹孙玉成万家余刘文森刘林娜
- 关键词:蓖麻毒素肺泡细胞
- 埃博拉病毒生物学特性研究进展被引量:2
- 2015年
- 埃博拉病毒病是一种能够引发埃博拉出血热的人畜共患烈性传染病。2014年蔓延西非三国的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)已经成为全球性公共卫生新的重大威胁。该文综述了EBOV的结构特征、传播特点、作用方式、动物模型等方面的研究进展,旨在对EBOV生物学特性的全面了解及针对该病新型疫苗和抗病毒药物的研制奠定基础。
- 张毅曲英龙郭振东赵思言付莹莹赵红艳王中一赵宗正刘林娜钱军
- 关键词:埃博拉病毒生物学特性
- 蓖麻毒素气源感染小鼠后炎性因子的定量分析
- 2014年
- 蓖麻毒素会引起机体内蛋白合成终止和细胞凋亡,通过测定组织器官内细胞因子的表达情况可监测机体中毒后免疫应答反应的发生与发展。本试验以气溶胶的方式将蓖麻毒素感染给小鼠,采用荧光定量聚合酶链式反应对攻毒后小鼠的肺脏、脾脏及胸腺中的6种炎性因子进行定量分析。研究结果显示:与对照组(生理盐水组)相比,试验组(蓖麻毒素组)小鼠肺脏、脾脏、胸腺中的趋化因子(CCL2、CXCL2)、白介素2(IL-2)和γ干扰素(INF-γ)的信使RNA(mRNA)表达均显著升高;而白介素1(IL-1)的信使RNA(mRNA)在肺脏、脾脏中高表达,在胸腺中为低表达;白介素4(IL-4)的信使RNA(mRNA)在肺脏、胸腺中高表达,在脾脏中为低表达。由此可知:经毒素气源感染后的小鼠,肺组织及免疫器官组织炎性因子分泌水平发生显著改变,局部及整体免疫调节机能紊乱。
- 郑关雨王全凯王蒙钱军刘林娜
- 关键词:蓖麻毒素炎性因子荧光定量聚合酶链式反应小鼠
- 蓖麻毒素基本生物学特性分析被引量:1
- 2011年
- [目的]对蓖麻毒素分子量、等电点和氨基酸序列等基本生物学特性进行分析。[方法]以内蒙古通辽地区所产蓖麻哲蓖2号为对象,利用毛细管电泳技术、分子生物学技术、毒性检测等免疫学技术对其毒素基本生物学特性进行检测分析。[结果]试验中所用蓖麻毒素的等电点为6.49,分子量为61.9kD,其氨基酸序列与网上公布序列相比,A链有22个位点发生变异,B链无变异;小鼠口服LD50为5.0mg/kg,腹腔注射LD50为4.6μg/kg,淋巴细胞IC50为3μg/ml。[结论]该研究为深入了解蓖麻毒素生物学性质提供依据,同时为不同产地蓖麻毒素毒性及其他性质的差异比较奠定基础。
- 刘林娜董瓛董瓛高宏伟孙玉成李吉平万家余孙玉成
- 关键词:蓖麻毒素分子量等电点氨基酸序列毒性
- 重组蓖麻毒素A链表达及其与天然蓖麻毒素毒性比较研究被引量:1
- 2015年
- 本试验旨在制备有高生物活性的重组蓖麻毒素A链(r-RTA)并与天然蓖麻毒素(n-RT)进行毒性比较。根据NCBI公布的RTA序列合成基因片段,并将其克隆于pET-28a载体后,利用大肠杆菌进行原核表达,镍柱亲和层析纯化上清,500mmol/L咪唑溶液洗脱获得可溶性r-RTA蛋白,通过SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定并用ELISA测定其免疫原性后,对r-RTA与n-RT进行动物和细胞试验毒性比较研究。结果显示,该r-RTA在上清中表达率为31.2%;每升细菌培养物纯化后可得20mg目的蛋白,纯度≥90%,大小为32ku。其免疫原性约为n-RT的1.27倍;通过获取的n-RT细胞半抑制浓度(IC50为0.01μg/mL)及动物半数致死量(LD50为(3.27±0.44)μg/kg),以相同浓度进行细胞感染和动物攻毒试验,结果显示,同等剂量下,在细胞试验中,n-RT毒力是r-RTA的2 700倍;在动物试验中,n-RT组对动物致死率为40%,r-RTA组动物无死亡。结果表明,单独RTA,在没有RTB协助下,具有一定的毒性作用,但毒力将显著降低。该结果将为开发基于RTA的蓖麻毒素疫苗提供重要数据和理论支撑。
- 曲英龙钱爱东钱军计越郑关雨郭振东赵思言付莹莹张毅赵红艳陈龙刘林娜
- 关键词:原核表达毒性比较
- 重组蓖麻毒素A链与天然蓖麻毒素毒性与免疫效果比较
- 2015年
- 为比较分析重组蓖麻毒素A链(r-RTA)、重组突变蓖麻毒素A链(m-RTA)和天然蓖麻毒素(n-RT)毒性及免疫效果。在鼠巨噬细胞(RAW264.7)试验中,n-RT毒力约是m-RTA与r-RTA的2 700倍。腹腔注射免疫无佐剂的r-RTA、m-RTA和n-RT,免疫过程中小鼠体重均有所减轻,相较于r-RTA组和n-RT组,m-RTA组小鼠体重变化最小。间接酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示:4次免疫以后血清抗体效价均达到10-4以上,以6 mg/kg m-RTA免疫小鼠可对20×LD50剂量蓖麻毒素提供完全保护。该结果表明r-RTA、m-RTA和nRT对小鼠均有一定毒性,m-RTA对小鼠刺激小,免疫鼠可获得较好的免疫保护。
- 曲英龙钱军郭振东赵思言钱爱东刘林娜
- 关键词:突变蓖麻毒素免疫效果