广东省科技厅重点引导项目(2005B36001081)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：郁时兵刘尚礼肖建德更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院深圳市第二人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技厅重点引导项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 神经营养因子基因修饰的神经干细胞在脊髓损伤修复中的应用
- 2007年
- 中枢神经系统损伤后的再生修复一直是神经科学领域的前沿研究课题。其中脊髓损（spinal cord injury，SCI）无论是在发生率、还是在给患者造成的痛苦和社会负担方面来说，都使其成为该领域的研究重点。但是长期以来SCI缺乏有效治疗手段，因此探索SCI后的再生修复，使截瘫患者站起来，成为骨科和神经科医生最关注的问题之一。
- 郁时兵肖建德刘尚礼
- 关键词：脊髓损伤修复神经营养因子神经干细胞基因修饰中枢神经系统损伤再生修复
- 人GDNF基因的腺病毒载体构建及其在人神经干细胞中的表达
- 2007年
- 目的:观察构建的含人胶质细胞源性生长因子(GDNF)基因腺病毒载体对人神经干细胞的感染及其基因表达情况,为脊髓损伤的基因及神经干细胞治疗提供前期实验依据。方法:从12周龄流产人新鲜胚胎中提取人神经干细胞并进行培养,行Nestin免疫荧光染色进行检验。将全长558bp编码人GDNF的cDNA克隆到重组腺病毒载体质粒,并在人胚肾细胞(HEK293细胞)中包装出含有目的基因hGDNF的腺病毒,然后用该腺病毒感染人神经干细胞,应用荧光显微镜和Western-blot检测病毒感染及外源基因的表达情况,并进行GFAP和Tubulin免疫荧光染色检测神经干细胞向神经细胞分化情况。结果:Nestin免疫荧光染色显示所培养细胞为阳性染色红色,表明其具有神经干细胞性状;感染48h后观察到神经干细胞中有大量的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达,以及hGDNF蛋白高表达;感染后的神经干细胞有长的伪足伸出,呈GFAP和Tubulin染色阳性,表明促进了神经干细胞向神经元的分化。结论:腺病毒对神经干细胞具有较高感染效率,可作为一种良好的基因导入载体,实现外源基因hGDNF在神经干细胞内的有效表达,并可为神经干细胞分化为神经元提供更有利条件。
- 郁时兵肖建德刘尚礼
- 关键词：胶质细胞源性神经营养因子神经干细胞基因腺病毒
