四川省卫生厅研究基金(2007-431)
- 作品数：9 被引量：61H指数：4
- 相关作者：刘友平严冬梅李洪段春燕魏嵋更多>>
- 相关机构：泸州医学院泸州医学院附属中医院泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅研究基金国家自然科学基金四川省中医药管理局资助项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 慢性乙型病毒性肝炎湿热中阻证血浆蛋白质组学分析被引量：14
- 2011年
- 目的从蛋白质组学的角度探讨慢性乙型病毒性肝炎(chronic viral hepatitisB,CHB)湿热中阻证的本质内涵。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)技术结合质谱分析等生物信息学分析方法对CHB湿热中阻证组(20例)及健康对照组(5名)的血浆全蛋白进行比较蛋白质组学分析。结果 CHB湿热中阻证组2-DE检测获得8个有明显规律性变化的差异表达蛋白点,通过质谱分析鉴定获得7个蛋白点(有1个蛋白点未检出结果):载脂蛋白C2(apoplipoprotein C2,APO-C2)、玻连蛋白(vitronectin,VN)、结合珠蛋白(haptoglobin,HPT)、甲状腺素结合蛋白(transthyretin,TTHY)、载脂蛋白A1(APO-A1)、血清淀粉蛋白P(serum amyloid Pcomponent,SAMP)、载脂蛋白A4(APO-A4),其中与健康对照组比较,APO-A1、APO-A4蛋白点表达量有所升高,其余5个差异蛋白点表达明显下调。结论差异表达蛋白质APO-A1、APO-A4具有潜在的作为CHB湿热中阻证诊断、预后标记物或治疗靶点的意义。
- 魏嵋刘友平郭芳宏王磊琼王小栋李洪
- 关键词：慢性乙型病毒性肝炎湿热中阻证血浆蛋白蛋白质组学
- 人肾小管上皮细胞蛋白质SDS-PAGE后两种银染方法的比较
- 2011年
- 目的:探讨适合于人肾小管上皮细胞蛋白质SDS-PAGE后的银染方法。方法:人肾小管上皮细胞株(HK-2)常规培养,裂解细胞,提取全细胞蛋白,SDS-PAGE电泳分离后,分别采用银氨法与改良硝酸银法对人肾小管上皮细胞蛋白质进行染色。结果:通过对人肾小管上皮细胞蛋白质染色效果的比较,发现银氨法凝胶背景颜色较深,条带很不清楚;改良硝酸银法凝胶的背景干净,条带清晰,且重复性好。结论:人肾小管上皮细胞蛋白质SDS-PAGE后宜采用改良硝酸银法进行染色。
- 张春燕严冬梅杨烨龚舒刘友平
- 关键词：银染SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
- miR-26a mimics转染人肝癌细胞株HepG2的表达蛋白质组分析被引量：4
- 2011年
- 目的:通过分析microRNA-26a(miR-26a)mimics转染对人肝癌细胞株HepG2表达蛋白质组的影响,以确定miR-26a与肝癌发生发展的相关性。方法:常规培养人肝癌细胞株HepG2,经miR-26a mimics转染48 h后进行细胞周期分析,并裂解转染72 h的HepG2细胞提取蛋白,双向电泳分离,匹配对比各蛋白斑点的表达量,筛选主要差异表达蛋白进行质谱鉴定。结果:HepG2细胞经miR-26a mimics转染后细胞增殖受到抑制;其蛋白2-DE图谱与对照组比较,差异表达超过2倍的蛋白斑点有11个。其中,有3个蛋白斑点为表达上调,有8个蛋白斑点为表达下调。质谱鉴定为:膜联蛋白A1、过氧化物酶4、增殖细胞核抗原、载脂蛋白A1、细胞色素C氧化酶5a、细胞周期蛋白E2、磷酸核糖焦磷酸激酶3、周期素依赖性蛋白激酶1和磷脂酰乙醇胺结合蛋白。结论:miR-26a可能通过影响上述蛋白分子的表达,直接或间接地调控HepG2肝癌细胞的增殖、分化和死亡,以发挥其抗癌作用。
- 刘友平李娟代荣阳段春燕陈绍坤严冬梅陈川宁李洪
- 关键词：MIMICS微小RNAHEPG2细胞蛋白质组
- miR-26a对人肝癌HepG2蛋白表达的影响
- 2012年
- 目的分析mircoRNA-26a(miR-26a)转染对人肝癌HepG2细胞表达蛋白质组的影响,以确定miR-26a与肝癌发生发展的相关性。方法常规培养人肝癌HepG2细胞株,经miR-26a转染72 h后裂解并提取蛋白,双向电泳分离,匹配对比各蛋白斑点的表达量,筛选主要差异表达蛋白进行质谱鉴定。结果 HepG2细胞经miR-26a转染后表达蛋白谱呈现普遍下调的趋势,差异表达超过2倍及以上的蛋白斑点有10个。其中,有3个蛋白斑点为表达上调,有7个蛋白斑点为表达下调。质谱鉴定为:膜联蛋白A1、过氧化物酶4、增殖细胞核抗原、载脂蛋白A1、细胞色素C氧化酶5a、磷酸核糖焦磷酸激酶3、周期素依赖性蛋白激酶1和磷脂酰乙醇胺结合蛋白。结论 miR-26a可能通过调节HepG2肝癌细胞上述蛋白分子的表达,直接或间接发挥其抑癌作用。通过对这些差异表达蛋白分子机制的深入研究,将为阐明miR-26a的抗癌作用提供进一步的线索和依据。
- 刘友平严冬梅段春燕郭俊英
- 关键词：蛋白表达
- PBMC参与乙肝自愈免疫反应的蛋白质组学分析
- 2011年
- 目的:通过对比分析乙肝血清标志物全阴者与乙肝自限性痊愈者外周血单个核细胞的蛋白质组表达谱,寻找参与乙肝病毒(HBV)免疫反应的关键蛋白质。方法:采用双向电泳技术结合生物信息学分析方法对乙肝血清标志物全阴者及乙肝自限性痊愈者PBMC进行比较蛋白质组学分析。结果:获得了3个有明显规律性变化的差异表达蛋白点,这三个蛋白点共同表现为在乙肝自限性痊愈者中表达量均高于对照组表达量2倍以上。结论:本研究发现的这三个差异表达蛋白质可能直接或间接参与了HBV免疫应答。
- 刘友平邬勋莲张春燕邹愚
- 关键词：外周血单个核细胞蛋白质组学
- 乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞的蛋白质组学分析
- 2012年
- 乙型肝炎（乙肝）是HBV感染所导致的免疫介导性疾病，即HBV本身并不致病，它对肝细胞的损伤主要是通过人体的免疫应答，如机体免疫反应正常，机体对感染的HBV表现为自限性痊愈（抗-HBs阳性）；如患者免疫调节功能紊乱，致使疾病迁延不愈而成为慢性乙肝^[1。-2。
- 刘友平刘晓燕黄富礼严冬梅何涛
- 关键词：病毒感染者外周血单个核细胞乙型肝炎蛋白质组机体免疫反应抗-HBS阳性
- 慢性乙肝肝郁脾虚证血浆蛋白质组学分析被引量：11
- 2011年
- 目的通过对比分析慢性乙肝肝郁脾虚证与正常健康对照组的血浆蛋白质组表达谱,探讨参与慢性乙肝肝郁脾虚证病理生理过程的分子机制。方法采用双向电泳技术结合生物信息学分析方法对慢性乙肝肝郁脾虚证及正常健康对照组的血浆全蛋白进行比较蛋白质组学分析。结果获得了8个有明显规律性变化的差异表达蛋白点,其中有2个蛋白点表达量有所升高,6个差异蛋白点表现为明显下调趋势。结论研究发现的这些差异表达蛋白质可能直接或间接参与了慢性乙肝肝郁脾虚证病理生理过程的分子机制。
- 刘友平郭芳宏王磊琼王小栋魏嵋
- 关键词：慢性乙肝肝郁脾虚证血浆蛋白质组学
- PI3K/Akt调控内质网应激对GRP78的诱导被引量：32
- 2011年
- 目的:研究内质网应激条件下PI3K/Akt信号通路对HEK293细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平的调控作用。方法:采用PI3K抑制剂LY294002、Akt1失活型突变载体Akt1(K179M)及Akt siRNAs阻断内质网应激介导的Akt活化,采用Akt激活型突变载体Myr-Akt过度激活内质网应激介导的Akt活化,并利用RT-PCR和Western blotting技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt信号途径对HEK293细胞中GRP78表达水平的调控作用。结果:LY294002、Akt1(K179M)及Akt1 siRNA均明显抑制了内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt1明显促进内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt2/3及Akt2/3 siRNA对GRP78的诱导均无影响。PI3K/Akt信号通路阻断或过度激活对GRP78 mRNA水平的诱导无影响,但是对GRP78的降解有显著影响。结论:HEK293细胞中,PI3K/Akt通过蛋白稳定性调节促进内质网应激对GRP78的诱导。
- 刘友平严冬梅陈川宁段春燕陈绍坤李洪代荣阳
- 关键词：PI3K/AKT内质网应激HEK293细胞
- 慢性乙肝脾肾阳虚证血浆蛋白质组学分析被引量：7
- 2011年
- 目的:通过对比分析慢性乙肝脾肾阳虚证与正常健康对照组的血浆蛋白质组表达谱,初步探讨参与慢性乙肝脾肾阳虚证病理生理过程的分子机制。方法:采用双向电泳技术结合质谱分析等生物信息学分析方法对慢性乙肝脾肾阳虚证及正常健康对照组的血浆全蛋白进行比较蛋白质组学分析。结果:获得了8个有明显规律性变化的差异表达蛋白点,通过质谱分析鉴定获得7个蛋白质(蛋白点5、6为同一蛋白质):载脂蛋白C2(APO-C2)、玻连蛋白(vitronectin,VN)、结合珠蛋白(haptoglobin,HPT)、甲状腺素结合蛋白(transthyretin,TTHY)、载脂蛋白A2(APO-A2)、血清淀粉蛋白P(serum amyloid P-component,SAMP)、视黄醇结合蛋白(retinol binding protcin,RBP),其中APO-C2蛋白点表达量有所升高,其余6个差异蛋白点表现为明显下调趋势。结论:以上差异表达蛋白质的组合性变化可能是慢性乙肝脾肾阳虚证的物质基础,具有潜在的作为慢性乙肝脾肾阳虚证诊断、预后标记物或治疗靶点的意义。
- 刘友平刘鹏汪静郭芳宏王磊琼魏嵋
- 关键词：慢性乙肝脾肾阳虚证血浆蛋白蛋白质组学
