国家自然科学基金(81261120566) 作品数:10 被引量:34 H指数:4 相关作者: 武晓泓 朱嘉瑜 赵馨 徐一力 祝辉 更多>> 相关机构: 江苏省人民医院 南京医科大学 江阴市人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
围妊娠期小鼠胰岛细胞增殖及Survivin表达变化的研究 被引量:1 2014年 目的 观察围妊娠期小鼠胰岛β/α细胞量、细胞增殖、Survivin表达变化以及大鼠胰岛细胞瘤细胞株INS-1干扰Survivin表达后催乳素刺激细胞增殖的变化,探讨Survivin与妊娠期胰岛细胞扩增的关系.方法 采用免疫组化染色法检测C57 BL/6雌性小鼠非妊娠对照组(NP)和妊娠10.5、14.5、18.5 d(P10.5、P14.5、P18.5)、产后4、8 d(AP4、AP8)(每组各25只)胰岛β/α细胞量的变化.采用胶原酶消化法分离纯化小鼠胰岛,以流式细胞术检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应及Western blotting法检测Survivin mRNA和蛋白的表达.采用脂质体转染siRNA方法干扰INS-1细胞Survivin的表达,催乳素刺激后检测细胞周期.多组数据组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小差异显著性分析.结果 妊娠期胰岛β/α细胞量均显著增加,高峰在P18.5,与NP组相比,β细胞量增长2.1倍(3.84±0.38比1.81 ±0.09,t =4.75,P<0.05),α细胞量增长1.6倍(0.92±0.13比0.56 ±0.08,t =2.69,P<0.05),至AP8恢复至NP水平.妊娠期小鼠胰岛细胞增殖显著增加,高峰在P14.5,与NP组相比,增殖指数增长2.7倍(23.07±1.88比7.72±1.12,t=10.89,P<0.05),产后恢复正常.Survivin mRNA表达水平在妊娠期明显增高,高峰在P14.5,与NP组相比,增长6.7倍(6.69±1.61比1.00 ±0.00,t =4.57,P<0.05),产后恢复正常.P10.5时Survivin蛋白开始表达,高峰在P14.5,与P10.5相比增长3.6倍(3.63±0.26比1.00±0.00,t=9.98,P<0.05),P18.5时表达逐渐下降,P20.5时表达消失.催乳素可显著刺激INS-1细胞增殖,而siRNA干扰INS-1细胞Survivin表达后,细胞增殖受阻.结论 妊娠期小鼠胰岛细胞出现明显扩增,并伴有Survivin的动态表达.Survivin介导催乳素刺激的胰岛β细胞扩增作用. 王晓兢 朱嘉瑜 张勤凤 徐一力 吕颖钺 张洁 吴雨洁 武晓泓关键词:胰岛 小鼠 SURVIVIN 肠促胰岛素在糖尿病肾病治疗中的研究进展 被引量:5 2015年 糖尿病肾病为糖尿病常见并发症,约有1/3的糖尿病患者伴有肾脏功能的损害,不仅严重影响患者的长期预后,还给患者带来巨大的经济负担.糖尿病肾病的发病机制较为复杂,目前其治疗方案仍在进一步完善中.肠促胰岛素类药物是近年来运用于临床的一类新型降糖药,主要包括胰高血糖素样肽1(GLP-1)类似物和二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制剂. 赵静 武晓泓关键词:糖尿病肾病 肠促胰岛素 胰高血糖素样肽 常见并发症 肾脏功能 住院糖尿病患者空腹高血糖及其相关因素的分析——一项多中心的临床调查研究 被引量:5 2015年 目的:观察住院糖尿病患者中空腹高血糖的状况并分析其相关因素。方法:选取2013年1月—2014年12月在5家医院行动态血糖监测、资料完整的住院糖尿病患者1 055例。收集性别、年龄、糖尿病分型、病程、体重指数(BMI)、血压、糖化血红蛋白(Hb A1c)、血脂、尿白蛋白、大血管病变等临床资料,分析相关因素。结果:在住院糖尿病患者中,83.9%存在空腹高血糖,其中全天血糖控制不佳占75.2%,黎明现象占15.4%,Somogyi效应占9.4%。1型糖尿病患者Somogyi效应发生率显著高于2型,2型糖尿病患者全天不佳发生率显著高于1型。单因素分析结果显示在3个亚组中年龄、分型、病程、血压、血脂具有差异性(P<0.05)。二分类Logistic分析结果显示年龄越大、病程越长、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)越高,全天血糖控制不佳发生的风险越大(P<0.05),年龄越小、病程越短、收缩压越高、总胆固醇(TC)越高,黎明现象发生的风险越大(P<0.05),TC、TG越低,Somogyi效应发生的风险越大(P<0.05)。结论:住院糖尿病患者中普遍存在空腹高血糖现象,原因依次为全天血糖控制不佳、黎明现象、Somogyi效应。1型糖尿病更容易发生Somogyi效应。年龄、病程、TG、LDL-C为全天血糖控制不佳的危险因素,年龄、病程、收缩压、TC为黎明现象的危险因素,TC、TG为Somogyi效应的危险因素。 许琳 钟绍 潘颖 方玲娜 卢冰 唐伟 高远 许岚 姚丽君 武晓泓关键词:空腹高血糖 黎明现象 新生期小鼠胰岛细胞凋亡及其机制的研究 2014年 目的 观察新生期小鼠胰岛细胞凋亡的变化特点并分析细胞凋亡相关基因的表达差异,初步探讨相关机制.方法 采用胶原酶消化法分离纯化第1、3和8周小鼠胰岛细胞,以磷脂结合蛋白V-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测细胞凋亡率.透射电镜观察胰岛细胞凋亡形态,原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(Tunel)/胰岛素免疫荧光双染法检测凋亡.采用实时定量PCR技术检测凋亡相关基因mRNA的表达.采用Western blotting技术检测促凋亡基因和抗凋亡基因的表达.多组间统计数据比较采用单因素方差分析.结果 (1)新生期小鼠胰岛细胞凋亡率在3周时显著增加,明显高于1周和8周[分别为(10.53±2.61)%、(1.80±0.69)%、(3.26±0.94)%,F=32.09,P<0.01].透射电镜结果显示新生第3周小鼠胰岛细胞核出现凋亡早期改变.3周时Tunel/胰岛素双阳性细胞数明显高于1周和8周.(2)新生期小鼠胰岛细胞凋亡相关基因的表达呈动态变化,3周时,促凋亡基因Fas和FasL的mRNA表达均明显高于1周和8周(分别为1.53±0.21、1.00±0.00、0.46±0.24,F=24.85,P<0.01;2.63±0.56比1.00±0.00、0.52±0.14,F=32.77,P<0.01),抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达明显低于1周和8周(分别为0.30±0.23、1.00±0.00、1.71±0.00,F=78.06,P<0.01).(3)3周时,Fas、FasL和裂解的Caspase-3蛋白表达均明显高于1周和8周(分别为2.05±0.16、1.00±0.00、0.59±0.24,F=61.47,P<0.01;3.54±0.86、1.00±0.00、0.72±0.26,F=27.04,P<0.01;5.74±0.59比1.00±0.00、3.11±0.20,F=128.79,P<0.01);Bcl-2蛋白表达明显低于1周和8周(0.62±0.13比1.00±0.00、1.90±0.10,F=151.08,P<0.01).结论 Fas/FasL以及Bc1-2介导的细胞凋亡信号通路可能参与新生期小鼠胰岛细胞凋亡的调控. 高莉 徐一力 朱嘉瑜 张于芝 赵静 章辉 武晓泓关键词:胰岛 凋亡 基因 BRAF^(V600E) vs. TIRADS in predicting papillary thyroid cancers in Bethesda system Ⅰ, Ⅲ, and Ⅴ nodules 被引量:11 2019年 Objective: Bethesda System for Reporting Thyroid Cytopathology(BSRTC) categories Ⅰ, Ⅲ, and Ⅴaccount for a significant proportion of fine needle aspiration cytology(FNAC) diagnoses. This study aimed to compare the diagnostic efficacy of BRAF^(V600E) mutation and the Thyroid Imaging Reporting and Data System(TIRADS) classification in differentiating papillary thyroid cancers(PTCs) from benign lesions among BSRTC I, III, and V nodules.Methods: A total of 472 patients with 479 nodules were enrolled in this prospective study. Ultrasound, BRAF^(V600E) mutation testing, and FNAC were performed in each nodule, followed by surgery or regular ultrasound examination.Results: In the BSRTC I category, BRAF^(V600E) showed similar sensitivity, higher specificity, and lower accuracy when compared with TIRADS. In the BSRTC III/V category, the sensitivity, specificity, and accuracy of BRAF^(V600E) were similar to those of TIRADS. In comparison to BRAF^(V600E) alone, the combination of the two methods significantly improved sensitivity(BSRTC Ⅰ:93.6% vs. 67.7%, P < 0.01; BSRTC Ⅲ: 93.8% vs. 75.0%, P < 0.01; BSRTC V: 96.0% vs. 85.3%, P < 0.001). When compared with TIRADS alone, the combination improved sensitivity in BSRTC Ⅰ nodules(93.6% vs. 74.2%, P < 0.05), increased sensitivity and decreased accuracy in BSRTC III nodules(93.8% vs. 75.0%, P < 0.01, 91.0% vs. 93.6%, P < 0.01), and improved both sensitivity and accuracy in BSRTC V nodules(96.0% vs. 82.0%, P < 0.001; 94.2% vs. 81.3%, P < 0.001).Conclusions: BRAF^(V600E) exhibited higher specificity and lower accuracy compared with TIRADS in BSRTC Ⅰ nodules, while the two methods showed similar diagnostic value in BSRTC Ⅲ/Ⅴ nodules. The combination of the two methods distinctly improved sensitivity in the diagnosis of PTCs in BSRTC Ⅰ, Ⅲ, and Ⅴ nodules. Ya Wu Ting Xu Xingyue Cao Xin Zhao Hongyan Deng Jianxiang Wang Xiao Li Qing Yao Xinhua Ye Meiping Shen Xiaohong Wu关键词:PAPILLARY THYROID FINE-NEEDLE THYROID BETHESDA 围妊娠期小鼠胰岛细胞视网膜母细胞瘤蛋白的表达及其与β细胞扩增的关系 被引量:1 2018年 目的观察围妊娠期小鼠胰岛细胞视网膜母细胞瘤(Rb)蛋白的表达变化,探讨其与妊娠期胰岛13细胞扩增的关系。方法将适合繁衍的6-8周龄体重20-25g的C57BL/6小鼠合笼配繁,检测阴栓形成,留取未孕(NP)、孕14.5d(P14.5)、孕18.5d(P18.5)、产后4d(AP4)、产后8d(AP8)等围妊娠期天数的小鼠。采用胶原酶消化法分离纯化小鼠胰岛,Westernblot法检测Rb、磷酸化Rb(p-Rb)及转录因子E2F1的蛋白表达,免疫荧光技术检测Rb和p-Rb的分布。配繁胰腺特异性Rh基因敲除小鼠,留取NP、P14.5和P18.5的小鼠。以腹腔葡萄糖耐量试验评估小鼠P14.5时的糖耐量变化。体内及体外试验检测葡萄糖刺激下的胰岛素分泌。免疫组化法检测基因敲除小鼠胰岛B细胞量、数目及面积的变化,免疫荧光法检测Ki67阳性β细胞比例变化。各组间比较采用独立样本t检验。结果(1)小鼠胰岛细胞RI)、p-Rb和E2F1在妊娠期表达显著升高,高峰出现在P14.5,表达量分别为NP组的2.16、2.96和2.09倍(£=9.31、24.23、8.31,均P〈0.叭),均于分娩后逐渐恢复至孕前水平;Rb主要表达于胞核,而p-Rh主要表达于胞浆。(2)NP时基因敲除小鼠糖耐量优于野生型小鼠,血糖曲线下面积(AUC)显著降低[(1343±19)比(1511±16)mmol·L^-1·min^-1,t=10.48,P〈0.01];P14.5d时基因敲除鼠糖耐量仍优于野生型孕鼠,AUC显著降低[(1073±117)比(1359±101)mmol·L^-1·rain^-1,t=3.71,P〈0.01];P14.5d时,基因敲除孕鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌在2rain和30rain时显著高于野生型孕鼠[分别为(0.69±0.10)比(0.55±0.10)ng/ml、(0.46±0.08)比(0.36±0.08)ng/ml,t=2.40、2.30,均P〈0.051,体外葡萄糖刺激下基因敲除孕鼠的胰岛素分泌水平也高于野生型孕鼠[低糖和高糖状态下分别为(233±48)比(93± 赵馨 徐一力 吴亚 章辉 石厚霞 刘翠萍 祝辉 武晓泓关键词:视网膜母细胞瘤蛋白 胰岛 催乳素调控胰岛β细胞功能的研究进展 被引量:5 2018年 催乳素是调控细胞生长发育的一种多肽激素。近年来的研究表明催乳素还参与糖代谢调控,与血糖稳态密切相关。本文就催乳素与胰岛β细胞的相关研究进展进行综述,包括对催乳素及其受体的认识、催乳素与糖代谢调控、催乳素与胰岛β细胞增殖、凋亡和分泌的关系。 赵馨 吴亚 祝辉 武晓泓关键词:催乳素 催乳素受体 糖代谢 胰岛Β细胞 新生小鼠胰岛增殖及口袋蛋白家族、E2F转录因子表达变化 被引量:4 2013年 目的 观察新生小鼠胰岛细胞、细胞周期和视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)、视网膜母细胞瘤样蛋白1(p107)、视网膜母细胞瘤样蛋白2(p130)及E2F转录因子的变化特点,探讨其与胰岛细胞增殖的关系.方法 采用免疫组化法检测出生第1、3和8周小鼠胰岛β/α细胞量、单个细胞面积和细胞数量的变化.采用胶原酶消化法分离纯化小鼠胰岛,以流式细胞术检测细胞周期,实时定量PCR及蛋白印迹技术检测Rb、p107、p130和E2F转录因子mRNA和蛋白表达.结果 (1)小鼠3周和8周胰岛β/α细胞量显著高于1周(P<0.05);单个β/α细胞面积在3周时无明显差异,8周时扩大1.7倍(P<0.01);而β/α细胞数量在3周增加约3.5/3.7倍(P<0.01),8周与3周无明显差异.(2)1周和3周时G0/G1期细胞比8周明显减少(81.3±1.2、82.8±3.3比92.6±1.3,F=6.5,P<0.05),而G2/M期显著增多(13.4±1.4、12.2±1.8比5.5±0.5,F=6.3,P<0.05),细胞增殖指数明显增加(P<0.05).(3)8周时Rb mRNA表达明显低于1周和3周(P<0.01);3周和8周时p107 mRNA显著低于1周(P<0.05),而p130 mRNA显著高于1周(P<0.05),E2F-1、E2F-2 mRNA均显著低于1周(均P<0.01);8周时E2F-3 mRNA显著低于1周(P<0.05);而E2F-4、E2F-5 mRNA在3周和8周时表达增加.(4)8周时Rb和p107蛋白表达均比1周明显降低,p130表达显著增高,3周和8周时E2F1表达显著降低(均P<0.05).结论 新生小鼠胰岛细胞量扩增明显,以细胞数量增加为主,细胞增殖显著.Rb、p107、p130及其相关E2F转录因子的表达存在动态变化,可能参与细胞增殖的调控. 朱嘉瑜 王晓兢 张勤凤 徐一力 吕颖钺 张洁 吴雨洁 武晓泓关键词:胰岛 增殖 KCNJ11基因V59A和V59M突变导致的新生儿糖尿病临床特点 被引量:2 2017年 选取经基因检测分别为KCNJ11V59A和V59M突变的2例新生儿糖尿病患儿,回顾分析其临床资料。结果显示,V59A突变的患儿于3月龄时以痉挛发作、高血糖起病.初次转换格列本脲治疗不成功,遂长期予胰岛素治疗。随访中患儿出现肌无力、生长发育迟缓的症状,2岁时再次尝试格列本脲治疗,所需药物剂量大,血糖控制一般。V59M突变的患儿于2月龄时以腹泻、高血糖、酮症起病,转换为口服药物格列本脲治疗,血糖控制稳定,所需药物剂量小。提示KCNJ11基因V59M突变在临床表型上轻于V59A突变.格列本脲的治疗效果也优于V59A突变。 赵馨 顾威 章辉 倪世宁 武晓泓关键词:新生儿糖尿病 格列本脲 新生期胰岛β细胞重塑阶段的分子调控机制 被引量:3 2013年 新生期是胰岛β细胞数量剧增和功能完善的重要时期。β细胞通过增殖、新生、凋亡等途径共同调控细胞量的扩增,机制涉及细胞周期相关蛋白、促有丝分裂信号通路等。此重塑阶段对于今后机体适应代谢需要和调节血糖内环境稳态具有深远影响。 朱嘉瑜 武晓泓关键词:胰岛Β细胞