江苏省科技攻关计划(BE2002303)
- 作品数：8 被引量：108H指数：6
- 相关作者：陈功友王金生邹丽芳武晓敏纪兆林更多>>
- 相关机构：南京农业大学扬州大学江苏省农林厅更多>>
- 发文基金：江苏省科技攻关计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水稻内生细菌的分离及其拮抗性与潜在致病性测定被引量：34
- 2007年
- 从江苏省扬州、南通、常州和徐州等地水稻根、茎和种子分离获得内生细菌736个菌株，其中对稻瘟病菌、稻恶苗病菌、稻纹枯病菌和稻白叶枯病菌拮抗的菌株分别占20．7％、5．4％、3．1％和1．1％，且主要来自根和茎，并有24个和3个菌株分别对2种和3种病菌有拮抗活性。对稻瘟病菌和稻恶苗病菌拮抗的内生细菌转管培养20代后，多数菌株拮抗活性稳定，对其他两种病菌拮抗的菌株转管培养后则拮抗能力大都显著下降或丧失。经形态和生理生化鉴定，高拮抗菌株G87（对稻瘟病菌、稻恶苗病菌、稻白叶枯病菌拮抗）和J215（对稻瘟病菌、稻恶苗病菌拮抗）为枯草芽孢杆菌。针刺和剪叶接种试验表明，大多数水稻内生细菌不致病，少数（3．4％～4．8％）在人工接种条件下可有致病能力或潜在致病性。
- 朱凤陈夕军童蕴慧纪兆林徐敬友
- 关键词：内生细菌拮抗性枯草芽孢杆菌水稻
- 中国水稻条斑病细菌avrBs3/PthA家族基因的克隆和序列分析被引量：19
- 2005年
- 水稻条斑病细菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzicola,Xooc)和水稻白叶枯病菌(X.oryzaepv.oryzae,Xoo)是稻黄单胞菌种下的致病变种,是水稻上的模式病原菌。用Xoo无毒基因avrXa3对应的NLS和AD区域的DNA片段构建探针,筛选Xooc基因文库,再通过酶切归类和Southern杂交分析,从Xooc中获得2个avBs3r/PthA家族基因克隆,分别被命名为avr/Pth13和avr/Pth14。序列测定结果显示,它们与avrBs3PthA家族成员,几乎一样的5′端和3′端、1个亮氨酸拉链(leucinezipper,LZ)、3个核定位信号(nuclearlocalizationsignal,NLS)和1个酸性转录活化域(acidictranscriptionalactivationdomain,AD),不同的只是102bp重复单元的重复次数不等:avr/Pth13基因102bp重复5.5次,avr/Pth14基因为19.5次。蛋白质水平上同列比较发现,AvrBs3/PthA家族成员34aa重复单元的第12和第13位氨基酸为HD的至少需要3个,才可能满足毒性或无毒性功能。将avr/Pth13和avr/Pth14基因分别导入Xoo菌株PXO99A中之后,在抗水稻白叶枯病近等基因系上测定其致病性,发现avr/Pth13基因增强了PXO99A的致病能力,而avr/Pth14基因则减弱了PXO99A的致病力。以上结果提示,Xooc与Xoo一样,都存在avrBs3/PthA基因家族的无毒基因。从Xooc中克隆avr/Pth13和avr/Pth14基因在国内外尚属首次,?
- 邹丽芳陈功友武晓敏王金生
- 关键词：基因克隆
- 水稻白叶枯病菌致病性分子遗传学基础被引量：42
- 2004年
- 水稻-白叶枯病原菌互作符合基因对基因关系,是研究禾本科植物-病原菌互作的理想模式系统。目前已鉴定和克隆出许多白叶枯病菌致病相关基因。其它革兰氏阴性植物病原细菌致病性分子遗传学和基因组学研究,为揭示水稻白叶枯病菌致病性分子机理提供了丰富的背景知识,其中以发掘TTSS效应分子的研究备受关注。本文将对白叶枯病菌致病性分子机理进行综述,以期为研究水稻-白叶枯病菌互作的功能基因组学提供科学线索。
- 陈功友邹丽芳王邢平向勇王金生
- 关键词：水稻白叶枯病菌分子遗传学
- 水稻条斑病细菌中新发现的avrBs3/PthA家族新成员avr/pth13基因被引量：9
- 2005年
- 用水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae,Xoo)无毒基因avrXa3对应的核定位信号(Nuclearlocali-zationsignal,NLS)和酸性转录活化域(Acidictranscriptionalactivationdomain,AD)的DNA片段构建探针,筛选水稻条斑病细菌(X.o.pv.oryzicola,Xooc)基因文库,获得avrBs3/PthA家族基因阳性克隆p13。序列测定和分析结果显示,avr/pth13基因长度为2268bp,编码755氨基酸,与avrBs3/PthA家族其他成员一样,具有几乎一样的5’端和3’端、1个亮氨酸拉链(Leucinezipper,LZ)、3个NLS和1个AD区域,不同的是102bp重复单元的重复数为5.5。蛋白质水平上同列比较发现,Avr/Pth13中第3、4和5个34氨基酸重复单元的第12和第13位氨基酸均为HD(组氨酸和天冬氨酸),蛋白质的C-端没有SGSVGGTI残基。目前avr/pth13基因是该家族的最小成员。将avr/pth13基因导入Xoo菌株PXO99A中,在水稻近等基因系上致病性测定结果显示,avr/pth13基因增强了Xoo的致病能力。以上结果证实,水稻条斑病细菌与水稻白叶枯病菌一样,都存在avrBs3/PthA家族基因,决定着Xooc的毒性或/和无毒性。
- 陈功友邹丽芳武晓敏李玉蓉王金生
- 关键词：基因毒性
- 分子组合设计植物抗病免疫和杀菌功能融合蛋白的研究
- ＜正＞HarpinXooc蛋白质可以激发植物产生过敏反应,通过水杨酸（SA）信号传导途径赋予植物系统获得抗病性（Systemic acquired resistance,SAR）,通过乙烯信号传导途径赋予植物促生和增加产...
- 张兵肖友伦赵梅勤车亦舟邹丽芳陈功友
- 文献传递
- 大豆斑疹病菌harpin编码基因的克隆与特性研究被引量：6
- 2005年
- 根据黄单胞菌harpin编码基因的同源性,设计简并引物,采用PCR方法从大豆斑疹病菌(Xanthomonasaxonopodispv.glycines,Xag)中克隆了402bp的hpa1同源基因,构建于表达载体pET30(a)上经转化大肠杆菌BL21菌株,获得基因工程菌BHR-3。基因工程菌诱导表达后经收集菌体和破碎细胞,得到表达产物为15.1kD的蛋白质。该蛋白质富含甘氨酸,不含半胱氨酸,对热稳定,对蛋白酶K敏感,可在非寄主烟草上激发过敏反应。激发的过敏反应需要植物体内水杨酸的积累,还可被真核生物代谢抑制剂抑制。序列比较显示,该基因与Xag中hpaG基因相同,与其它黄单胞菌中的hpa1基因有51.4%～93.8%的同源性,与其它革兰氏阴性植物病原细菌的harpin编码基因无同源性。据此把该基因产物鉴定为harpinXag。黄单胞菌harpin蛋白质序列比较发现,GG-GGG基序的多少并不是harpin蛋白的唯一特性。这为利用harpin蛋白开展植物病害控制的基因药物学设计提供了科学线索。
- 陈功友张兵武晓敏赵梅琴
- 水稻内生联合固氮细菌阴沟肠杆菌生长条件及其在植株体内定殖的研究被引量：2
- 2010年
- 阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)G161和J115是自水稻根和茎内分别分离获得的联合固氮细菌。其最适生长条件:培养时间为36 h左右,生长温度为27～30℃,培养液pH值为6～7,适当通气即振荡培养(120 r.min-1)。通过含药培养基梯度筛选,获得抗利福平350μg.mL-1标记菌株,以此测定2株菌在水稻植株体内的定殖动态。结果表明:该2株菌经喷雾和蘸根接种均能进入水稻根、茎、叶内,向下或向上移动,以及较好地定殖。以菌液(109cfu.mL-1)喷雾后,细菌在水稻叶和根内存在20 d以上,而在茎内存活时间较短(5～11 d);菌液(109cfu.mL-1)蘸根后,细菌能在水稻根、茎和叶内分别存在40 d以上、20～30 d和8～11 d。这表明2株菌在水稻不同器官内的定殖量与接种方法有关,也可能细菌在水稻根内的定殖能力要强于在茎、叶内。
- 纪兆林何平平童蕴慧陈夕军徐敬友
- 关键词：阴沟肠杆菌水稻内生细菌定殖
- 植物抗病激活蛋白harpin_(Xooc)防治水稻病害的研究被引量：12
- 2006年
- 植物抗病激活蛋白harpinXooc由水稻条斑病细菌hrp基因簇中hpa1基因编码。用构建于表达载体pET21a(+)上的hpa1诱导表达产物harpinXooc处理烟草,可激发烟草产生过敏反应,以及激活与烟草抗病信号途径相关的基因PR-1a、hin1和hsr203J的表达;处理水稻后,NPR1、OsPR1a、OsPR1b和PAL被激活。表明harpinXooc蛋白与植物互作后,通过水杨酸信号传导途径激活病程相关蛋白等防卫反应基因的转录表达,从而使植物产生系统获得抗病性。harpinXooc经加工后制成含量达1%的可溶性微颗粒制剂在水稻上进行应用,试验结果显示,harpinXooc蛋白可诱导水稻产生抗病性,防治水稻稻瘟病效果与杀菌剂稻瘟必克(三环唑)相当,防治水稻纹枯病和稻曲病效果与井冈霉素效果相当。对水稻增产的效果主要表现在增加粒实重上,增产达6%以上。
- 赵梅勤王磊张兵王金生陈功友
- 关键词：水稻过敏反应抗病性
- BV生物复合剂对菜青虫的室内外药效试验
- 2009年
- BV(苏云金杆菌与斜纹夜蛾核型多角体病毒)生物复合杀虫剂为金陵科技学院园艺学院生物农药研究室研制的用于防治叶菜类鳞翅目害虫的生物制剂,试验测定了该生物制剂对菜青虫的室内外药效。结果表明BV生物复合杀虫剂的贮藏期可长达3年。不同虫龄的室内药效试验结果表明:该药剂对各龄期的菜青虫幼虫均有较高的防效,其防治效果好于常规的化学农药高效氯氰菊酯和生物农药青虫灵的田间推荐剂量,且BV生物复合剂有防治高龄幼虫的优势;剂量对该药剂的持效期有明显影响,200～300倍液(处理浓度5IU/μL+50PIB/μL和3.33IU/μL+33.3PIB/μL)与其他剂量相比有明显的后效作用。BV生物复合剂不同时间喷药的田间药效结果表明该药剂在傍晚喷药的药效和持效期都好于早晨喷药。
- 侯建文朱丽梅刘海荣童梅李红芹曹正群
- 关键词：菜青虫杀虫活性
