国家自然科学基金(81273754)
- 作品数：8 被引量：24H指数：2
- 相关作者：罗志刚黄江波刘利何群君龙向阳更多>>
- 相关机构：南华大学岳阳市第二人民医院邵阳学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省中医药科研计划项目更多>>
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- 青藤碱的免疫抑制作用机制的研究进展被引量：14
- 2015年
- 器官移植是治疗终末期器官衰竭的最有效手段,但移植后的免疫排斥反应始终是移植面对的难题。目前的免疫抑制剂毒副作用大,明显降低了其治疗效果,寻找更好的防治移植排斥反应的方法是移植界的研究热点。青藤碱是从中药防己科植物青风藤中提取的一种生物碱,具有免疫抑制和抗炎作用,是一种有良好应用前景的新型免疫抑制剂。
- 黎炼罗志刚
- 关键词：青藤碱免疫抑制器官移植
- 大鼠肾移植模型建立的研究进展被引量：1
- 2015年
- 肾移植模型常用来研究肾移植的免疫排斥反应机制,随着转基因技术的日益成熟,建立肾移植模型的手术方法也越来越多样化,成功可靠的肾移植模型是进行肾移植研究的基础条件。由于大鼠的组织相容性抗原与人类的在结构、分布、功能等相似,可最大程度地模拟人体器官,因此利用大鼠建立肾移植模型也成为目前主要的研究方法。因此,本文从选择大鼠肾移植模型的优势、动静脉吻合方法的改良、尿路重建的变化以及术后并发症等几个方面对大鼠肾移植模型的建立进行综述。
- 郑力文罗志刚
- 关键词：显微外科免疫排斥组织相容性抗原动静脉吻合
- 大鼠骨髓来源树突状细胞的体外分离培养鉴定初步研究被引量：1
- 2018年
- 【目的】探讨建立一种简易、高效的体外分离培养、纯化大鼠骨髓来源树突状细胞（DC）的方法。【方法】采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GMCSF）＋白细胞介素4（IL-4）分离诱导大鼠骨髓来源造血前体细胞7d后得未成熟树突状细胞（immature dendritic cell，imDC），流式细胞仪检测免疫磁殊纯化前后imDC表面OX62阳性表达率。然后脂多糖（LPS）作用2d刺激imDC成熟得成熟树突状细胞（maturedendritic cell，mDC），流式细胞仪检测imDC及mDC细胞表面CD86、CDS0、RT1B阳性表达率，ELISA法检测两组细胞的IL-12分泌水平，体外混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction，MLR）测定两组细胞促淋巴细胞增殖的能力。【结果】免疫磁珠纯化后imDC表面OX62阳性表达率为91．9％，明显高于纯化前的82．8％（P〈0．05）；imDC表面CD86、CD80、RT1B阳性表达率分别是11．48％、6．25％、77．2％，经LPS刺激成熟后的mDC表面CD86、cD80和RT1B阳性表达率分别为91．38％、93．54％、98．6％；imDC细胞的IL12分泌水平为（36±9）pg／mL，明显低于mDC（228土27）pg／mL（P〈0．01）；MLR结果中mDC组刺激T淋巴细胞增殖的能力明显高于imDC组。【结论】本实验通过细胞形态观察、表面分子标志和功能状态三方面相结合对所培养细胞进行鉴定。证实联合应用GM—CSF＋IL4可体外诱导出高纯度、数量多的DC；通过免疫磁珠纯化可获得相对数量多、纯度高的DC以满足实验需要。
- 黄江波罗志刚刘宇明刘利何群君言彩红李建军龙向阳
- 关键词：树突细胞细胞培养技术细胞分离
- 树突状细胞诱导移植免疫耐受的研究进展
- 2014年
- 树突状细胞(dendritic cell,DC)在移植排斥反应过程中起着至关键性的作用,利用未成熟树突状细胞(immature dendriticcells,imDC)诱导供体特异性免疫耐受已经展现出诱人的前景,有可能成为防治器官移植排斥反应的重要途径,对imDC诱导移植免疫耐受机制及如何有效维持其耐受状态成为当前移植免疫耐受的研究热点,本文主要就近年来国内外DC的体外诱导、培养方法及其诱导移植免疫耐受的相关机制研究作一简要综述。
- 刘宇明黄江波
- 关键词：树突状细胞免疫耐受抗原提呈细胞T淋巴细胞
- 青藤碱对膀胱癌细胞株T24凋亡及EMT转化的影响被引量：6
- 2020年
- 目的细胞凋亡及上皮细胞-间充质转化(EMT)是肿瘤发生、进展以及复发的重要机制之一,已成为研究肿瘤的热点。文中旨在探讨青藤碱对膀胱癌细胞株T24侵袭转移、凋亡以及EMT的影响。方法体外培养膀胱癌细胞株T24细胞,采用不同浓度青藤碱(0、0.5、1.0、2.0mmol/L)处理细胞24h后,分别采用细胞划痕实验及Transwell实验检测青藤碱对细胞侵袭及迁移的影响;同时采用MTT、流式细胞术检测细胞活性以及凋亡,Western blot检测细胞凋亡相关分子B cl-2/Bak的表达以及A kt的磷酸化,EMT相关分子表达水平;采用PI3K/Akt抑制剂处理细胞,Western blot检测EMT相关分子E-cadherin、N-cadherin、Slug和Snial的变化情况。结果MTT检测结果显示,0.5、1.0、2.0 mmol/L的青藤碱处理24h后,膀胱癌细胞株T 24的细胞活性随着青藤碱的浓度升高而逐渐降低[(100.00±2.52)%、(86.5±5.2)%、(64.5±4.5)%、(53.5±7.2)%],差异有统计学意义(P<0.05).0.5、1.0、2.0mmol/L的青藤碱处理48h后,膀胱癌细胞株T24的凋亡率显著增高。划痕实验结果显示,随着青藤碱浓度增加(0~2.0 mmol/L),膀胱癌细胞株T24的迁移水平呈逐渐下降的趋势。Transwell实验结果表明,随着青藤碱浓度增加,膀胱癌细胞株T24的侵袭率呈逐渐下降的趋势。2.0 mmol/L青藤碱处理后,膀胱癌细胞株T24中EMT相关分子E-cadherin表达上调,N-Cadherin、Slug和Snial表达下调。采用PI3K/Akt抑制剂处理细胞结果显示,抑制剂LY294002处理的膀胱癌细胞株T24中E-cadherin表达水平显著升高,而N-cadherin、Slug和Snial的表达水平显著降低。结论青藤碱能够抑制膀胱癌细胞株T24的增殖、侵袭以及迁移,并促进细胞凋亡,同时还能够通过抑制PI3K/A kt信号通路抑制膀胱癌细胞株T24发生EMT,为膀胱癌的临床治疗提供了实验依据。
- 吴磊黎炼罗志刚张涛
- 关键词：青藤碱膀胱癌凋亡
- TLRs信号通路在青藤碱诱导大鼠imDC中的作用
- 2021年
- 目的探讨青藤碱(SIN)在诱导大鼠来源树突状细胞(DCs)中发挥免疫抑制作用的可能机制。方法体外培养Wistar大鼠骨髓来源前体细胞,显微镜下观察青藤碱处理DCs(青藤碱修饰组,SIN组)与常规诱导DCs(常规诱导组,对照组)的形态学差异,利用流式细胞术检测DCs的CD表型特点。以脂多糖(LPS)刺激诱导DCs成熟,采用流式细胞术检测青藤碱对LPS诱导的树突状细胞表面Toll样受体(TLR)2、TLR3、TLR4表达的影响。结果常规诱导组可见细胞呈葡萄串样的细胞集落或悬浮生长,细胞表面颗粒感明显;而青藤碱诱导组细胞集落在一起,细胞体积、形态无明显变化。常规诱导组中DCs表面CD80、CD86的相对表达量为70.7%、71.3%,而SIN组中DCs表面CD80、CD86的相对表达量为51.7%、49.4%。SIN+LPS组DCs表面TLRs相对表达量TLR2(51.2±0.34)%、TLR3(50.3±0.14)%、TLR4(52.1±0.16)%,较单纯LPS组DCs表面相应TLRs相对表达量[(94.35±0.16)%、(97.55±0.16)%、(94.6±0.12)%]明显降低。结论SIN可能可以通过抑制TLRs信号通路抑制DCs成熟,从而诱导免疫耐受。
- 胡岳武李卷周浩黄江波罗志刚曾顺曾顺何群君
- 关键词：树突细胞TOLL样受体青藤碱免疫耐受
- 青藤碱对大鼠骨髓来源树突状细胞分化成熟的影响
- 2017年
- 背景:利用未成熟树突状细胞诱导供体特异性免疫耐受有可能成为防治器官移植排斥反应的重要途径。目的:探讨青藤碱对大鼠来源骨髓树突状细胞体外分化及成熟的影响。方法:取大鼠股骨、胫骨骨髓来源树突状细胞的前体细胞,经粒-巨噬细胞集落刺激因子及白细胞介素4作用诱导出未成熟树突状细胞,第7天加入脂多糖刺激成熟,在刺激未成熟树突状细胞成熟时,分为对照组和低、中、高不同剂量的青藤碱处理组,作用48 h后收获树突状细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态学特征,流式细胞仪检测细胞表型CD80、RT1B的表达,ELISA检测培养上清白细胞介素12水平,混合淋巴细胞反应检测树突状细胞刺激同种异体T淋巴细胞活化的能力。结果与结论:(1)倒置显微镜下观察,对照组可见细胞符合成熟树突状细胞形态特性;青藤碱低剂量组可见绝大部分树突状细胞成熟;青藤碱中剂量组细胞部分悬浮,成熟度差;青藤碱高剂量组大部分细胞尚未成熟;(2)与对照组相比,青藤碱低、中、高剂量组CD80表达显著降低(P<0.05);与对照组相比,青藤碱中、高剂量组RT1B表达显著降低(P<0.05);(3)与对照组相比,青藤碱中、高剂量组培养上清中IL-12p70水平显著降低(P<0.01);(4)与对照组相比,青藤碱中、高剂量组刺激T淋巴细胞增殖的能力显著降低(P<0.05);(5)结果表明,青藤碱能抑制树突状细胞进一步成熟。
- 黄江波罗志刚高红强刘利何群君李建军言彩红龙向阳
- 关键词：树突细胞免疫耐受分化青藤碱树突状细胞分化成熟国家自然科学基金
- 青藤碱诱导的imDC对同种异基因大鼠肾移植外周血Th1／Th2细胞因子的影响被引量：2
- 2017年
- 目的观察青藤碱（sN）诱导的供体来源未成熟树突状细胞（imDC）对受体鼠静脉血Th1／Th2细胞因子的影响，探讨SN诱导的imDC诱导移植免疫耐受的机制。方法分别选用Wistar和SD大鼠作为肾移植供体和受体，术前受体经静脉输注imDC，利用显微外科血管吻合法建立大鼠单肾移植模型，以ELISA法测定IL-2、IL-4、IL-10及干扰素（IFN）-γ等的水平。结果（1）移植手术成功率89．5％，动脉吻合时间为（12．5±5．7）min，静脉吻合时间为（17．34-3．4）min。（2）SN—imDC10。组IL-2、IFN-γ、IL-4I及L-10含量分别为（17．25±3．41）pg／ml，（239．80±9．06）pg／ml，（337．60±25．07）pg／ml及（1432．00±106．39）pg／ml。同浓度中，SN—imDC组IL4及IL—10水平高于imDC组及对照组（P〈0．05），且SN—imDC10。组高于SN—imDC10^5组（P〈0．05）；同浓度中，SN—imDC组IL-2、IFN-γ水平低于对照组及imDC组（P〈0．05），且SN—imDC10。组低于SN—imDC10^5组（P〈0．05）。结论（1）利用显微外科血管吻合法可以成功地建立起大鼠单肾移植模型。（2）SN诱导的特异性im—DC可使诱导受体大鼠向Th2型免疫应答的偏移，表明由SN诱导的imDC可能可以介导受体发生免疫耐受。
- 黄江波罗志刚陈拓刘利李建军何群君龙向阳
- 关键词：肾移植TH1细胞TH2细胞
