浙江省自然科学基金(399428)
- 作品数：10 被引量：131H指数：6
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- 大弹涂鱼自然种群遗传多样性的RAPD分析被引量：19
- 2004年
- 2002年9月以采自浙江宁海三门湾海区的大弹涂鱼(BoleophthalmuspectinirostrisL.)为材料,对大弹涂鱼自然种群的遗传多样性进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,20个引物共扩增出100个DNA片段,多态位点比例(P)为21%,任意两个个体间遗传相似度(F)最大为0.9938,最小为0.9239,平均为0.9645。任意两个个体间的遗传距离(D)最大为0.0761,最小为0.0062,绝大多数为0.02000～0.0500;大弹涂鱼自然种群的平均杂合度(He)为0.2018,D平均值为0.0355;Shannon多样性指数(HO)和Shannon多样性值(H)分别为5.918和0.0592。研究结果表明大弹涂鱼的遗传多样性水平比较低,应加强大弹涂鱼种质资源的保护。
- 金春华钟爱华黄福勇张春丹李明云
- 关键词：随机扩增多态DNA
- 不同保存方法的大黄鱼肌肉样品基因组DNA提取及RAPD分析被引量：24
- 2002年
- 以 - 2 0℃冷藏、70 %(V/V)乙醇、含 50mmol/dm3EDTA的 70 %(V/V)乙醇和1 0 %(V/V)福尔马林保存等方法处理大黄鱼肌肉样品 ,进行了DNA的提取及RAPD分析 ,并与新鲜样品作了对照 .实验结果表明 ,鲜活样品以及冷冻保存、70 %(V/V)乙醇以及含 50mmol/dm3EDTA的 70 %(V/V)乙醇保存的样品均可得到高质量的DNA ,大小在 2 1kbp左右 ,含量为 1 0 0 μg/cm3左右 .而从 1 0 %(V/V)福尔马林保存样品也能提到DNA ,但其DNA得率低 ,约 1 0 μg/cm3.分别以上述提取的DNA为模板进行RAPD扩增 ,未见有明显的差异 .
- 张海琪薛良义李明云何丰余纪莲
- 关键词：肌肉大黄鱼DNA提取RAPD
- 网箱养殖大黄鱼遗传多样性的同工酶和RAPD分析被引量：27
- 2003年
- 采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳方法(PAGE)和RAPD技术对象山港网箱养殖大黄鱼群体遗传多样性进行检测。结果表明,所分析的12种同工酶共记录了27个基因座位,其中3个基因座位Est 2、Est 3和m Adh 2为多态,其多态座位比例为11.111%,平均杂合度为0.0279。16个RAPD随机引物共检测出119个位点,其中多态位点20个(16.81%),个体间的遗传相似系数为0.844～0.972,遗传变异度为0.0927,Shannon多样性指数为6.326,多样性值为0.0532。不论是同工酶电泳分析结果还是RAPD分析结果,均表明象山港网箱养殖大黄鱼遗传多样性水平较低。
- 李明云张海琪薛良义竺俊全钟爱华
- 关键词：大黄鱼同工酶随机扩增多态DNA
- 大弹涂鱼不同组织器官的同工酶研究被引量：38
- 2004年
- 采用垂直聚丙烯酰胺平板电泳技术 ,对大弹涂鱼(Boleophthalmuspectinirostris)的眼睛、心脏、肝脏、肌肉、脾脏和鳃等6种组织器官中的13种同工酶进行研究 ,并分析了其酶谱表型。结果表明,四唑氧化酶 (TO)和酸性磷酸酶 (ACP)没有检测到酶带 ;三梨醇脱氢酶 (SDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (G -6 -PDH)仅在肝脏中表达 ;超氧化物歧化酶 (SOD)在所有组织中均存在 ,部分组织中存在差异 ;乳酸脱氢酶 (LDH)、苹果酸脱氢酶 (MDH)、苹果酸酶 (MEP)、酯酶(EST)、醇脱氢酶 (ADH)、D -葡萄糖脱氢酶 (GcDH)、甲酸脱氢酶 (FDH)、谷氨酸脱氢酶 (GDH)则具有明显的组织特异性。
- 金春华钟爱华张海琪黄福勇李明云
- 关键词：大弹涂鱼组织器官同工酶组织特异性电泳
- 大黄鱼基因组DNA的提取及其RAPD分析条件的探索被引量：14
- 2002年
- 通过实验筛选出一种快速、简便提取大黄鱼基因组 DNA的方法 .以该法提取的大黄鱼基因组 DNA为模板 ,对大黄鱼 RAPD分析中的 DNA模板浓度、镁离子浓度、d NTPs浓度、引物浓度和 Taq酶浓度进行了研究 ,初步确定了适于大黄鱼 RAPD分析的最佳反应体系 :2 5μL反应体系中 ,含模板 DNA2 5 ng,1 0× PCR缓冲液 2 .5μL,d NTPs1 0 0μmol/L,Mg Cl2 2 .5 mmol/L,引物 0 .2μmol/L,Taq DNA聚合酶 1 .0 μmol/min.
- 李明云张海琪钟爱华
- 关键词：大黄鱼基因组RAPDDNA提取分子遗传标记DNA多态性
- 大黄鱼基因组DNA的不同提取方法及RAPD扩增比较被引量：3
- 2001年
- 采用三种方法提取大黄鱼肌肉基因组DNA,并以所提取的DNA为模板进行RAPD分析比较。结果表明,与传统方法、高盐抽提法相比,星普法具有快速简便、所需样品量少,所提取的DNA质量高等特点。三种方法所得的DNA分子量大小都在20kb以上,且RAPD扩增条带基本一致。
- 李明云张海琪
- 关键词：大黄鱼基因组DNARAPD
- 大黄鱼线粒体DNA的限制性内切酶图谱被引量：3
- 2006年
- 从大黄鱼（Pseudosciaena crocea）肝脏中提取线粒体DNA（mtDNA）。用限制性核酸内切酶酶切后，得到酶切图谱。以1 kb ladder作为相对分子量标准。以电泳迁移率为纵坐标，分子量的对数值为横坐标作标准图，利用电泳迁移率与分子量的对数值的线性关系，计算出各酶切片段的分子量，并推算出大黄鱼mtDNA分子量为27．33×10^6D，大小为16．891kb左右。根据单酶切和双酶切的数据，以及mtDNA是环状分子等特征，建立了大黄鱼的mtDNA酶切图谱。
- 李明云朱俊杰邬勇张春丹黄福勇
- 关键词：石首鱼科大黄鱼线粒体DNA限制性内切酶酶切图谱
- 象山港养殖大黄鱼同工酶的分析被引量：18
- 2003年
- 李明云张海琪竺俊全钟爱华
- 关键词：大黄鱼同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 大斑马鱼5种同工酶表达的初步分析被引量：2
- 2006年
- 采用垂直聚丙烯酰胺平板电泳技术对大斑马鱼的眼、肌肉、鳃、尾鳍、卵巢5种组织器官的5种同功酶进行了研究分析。结果表明脂酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(MEP)在眼、肌肉、鳃、尾鳍、卵巢都有表达;过氧化物酶(POX)仅在眼睛和鳃中表达;三磷酸腺苷酶(ATP)除眼睛外其它4种组织器官中均有表达。
- 刘伟成李明云应中富叶帅东
- 关键词：同工酶
- 大黄鱼肌浆蛋白和肝酯酶同工酶的电泳分析被引量：6
- 2003年
- 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,对大黄鱼肌浆蛋白(Pm)和肝酯酶(EST)同工酶进行研究。结果表明,大黄鱼的Pm电泳酶谱不存在个体间差异,而肝EST酶谱复杂,Est-2和Est-3为多态位点。X2检验表明,这两个多态位点等位基因频率都符合Hardy-Weinberg平衡。
- 张海琪李明云钟爱华
- 关键词：大黄鱼同工酶电泳
