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湖南省科技计划项目(2010FJ6032)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
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蒋艳玲
梁功平
赵明
王利涛
苏玉文
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2013
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1,25-二羟维生素D3对HaCaT细胞增殖活性及基因组DNA和增殖相关基因启动子甲基化水平的影响
被引量:4
2013年
目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对人表皮角质形成细胞株HaCaT细胞增殖活性、基因组DNA总体甲基化水平及增殖相关基因启动子甲基化水平的影响。方法10^-6、10^-7、10^-8mol/L1,25(OH)2D3作用HaCaT细胞24h后,噻唑蓝(MTF)法检测不同浓度1,25(OH)2D3对HaCaT细胞增殖活性的影响;总体DNA甲基化试剂盒检测基因组DNA总体甲基化水平。10mmol/L1,25(OH)2D3作用HaCaT细胞24h后,实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测DNA甲基转移酶(DNMT)和甲基结合蛋白(MBD)mRNA表达水平,甲基化特异性PCR(MS—PCR)检测凋亡相关基因程序化细胞死亡因子5(PDCD5)和基质金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP2)启动子区DNA甲基化状态。结果与溶媒对照组比较,10^-6mol/L1,25(OH)2D3处理组HaCaT细胞增殖活性及基因组DNA总体甲基化显著降低(细胞活力:0.152±0.027比0.290±0.017,P〈0.01;总体甲基化:0.187±0.071比0.316±0.049,P〈0.05),DNA甲基转移酶DNMT3a和DNMT3bmRNA水平显著降低(P值〈0.01或0.05),甲基结合蛋白MECP2和MBD2、凋亡相关基因PDCD5、TIMP2mRNA水平显著升高(P值〈0.01或0.05)。此外,MS—PCR结果显示,1,25(OH)2D3处理组PDCD5、TIMP2基因启动子区DNA甲基化水平(0.380±0.135,0.460±0.172)较溶媒对照组(0.720±0.121,0.680±0.133)显著降低(均P〈0.05)。结论1,25(OH):D,可降低HaCaT细胞基因组DNA总体甲基化水平,调控DNA甲基化修饰基因表达。此外,1,25(OH)2D3可降低凋亡相关基因PDCD5、TIMP2特异性启动子区甲基化水平,诱导PDCD5、TIMP2基因表达增加,抑制HaCaT细胞增殖。
蒋艳玲
赵明
梁功平
王利涛
苏玉文
关键词:
骨化三醇
角蛋白细胞
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