广东省自然科学基金(36946)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：广东省口腔医院中山大学四川大学更多>>
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- 人釉原蛋白基因转染对人牙龈成纤维细胞生物学活性的影响被引量：3
- 2006年
- 分析釉原蛋白基因转染对牙龈成纤维细胞生物学活性的影响,为其进一步应用于基因增强牙周组织工程奠定实验基础。[方法]脂质体转染法将人釉原蛋白基因转入人牙龈成纤维细胞内,Zeoin筛选获得阳性克隆。以ELISA法检测重组釉原蛋白在转染细胞内以及培养上清液中的表达;进一步以MTT比色法分析基因转染对细胞增殖和分化的影响。[结果]釉原蛋白基因转染后,人牙龈成纤维细胞可以在胞内合成重组人釉原蛋白并将其分泌至胞外,表达浓度分别为0.277μg/mL和0.147μg/mL;与未转染组相比,釉原蛋白基因转染可显著促进牙龈成纤维细胞增殖(P<0.05),并且差异随时间增大。转染后的牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性也较对照组有显著提高(P<0.05)。[结论]外源性釉原蛋白基因能够在人牙龈成纤维细胞获得表达,并显著促进其增殖以及向成骨细胞方向转化,可以应用于基因增强牙周组织工程。
- 赵川江章锦才徐琛蓉张蕴惠
- 关键词：牙龈成纤维细胞釉原蛋白基因转染分化
- 釉原蛋白基因表达质粒PcDNA3.1-AMG在小鼠肌肉组织中表达的研究
- 2006年
- 目的研究釉原蛋白(amelogenin,AMG)重组质粒PcDNA3.1AMG能否在小鼠肌肉组织中获得正确表达。方法采用裸质粒直接注射法将溶于200μL磷酸缓冲液中的100μg质粒PcDNA3.1(对照组)或PcDNA3.1AMG(实验组)分别导入Balb/C小鼠的胫前肌内,注射后第3、7、14天分批处死小鼠,采用免疫组织化学染色法检测肌肉组织内釉原蛋白的表达。结果注射PcDNA3.1AMG的肌肉组织的肌细胞和细胞间质中均检测到釉原蛋白的表达;而注射PcDNA3.1的肌肉组织的肌细胞和细胞间质中均未检测到釉原蛋白的表达。结论PcDNA3.1AMG成功地转染了肌肉细胞,并且外源基因能够在肌细胞内转录、翻译并正确表达釉原蛋白。
- 赵川江章锦才徐琛蓉张蕴惠
- 关键词：釉原蛋白重组质粒转染基因表达
- 人釉原蛋白重组质粒PsecTaq2A-AMG在COS-1细胞系中表达
- 2005年
- 目的研究人釉原蛋白重组质粒PsecTaq2A-AMG在COS-1细胞系中的表达,为基因工程制备釉原蛋白奠定基础。方法采用脂质体载体法将釉原蛋白重组质粒PsecTaq2A-AMG导入COS-1细胞系,用Zeoin筛选得到稳定转染克隆,并经免疫组化及酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞内和细胞培养液中重组釉原蛋白的表达。结果在未经转染的对照组细胞内和细胞培养液中均未检测到重组釉原蛋白的表达,而经转染的实验组不论细胞内或细胞培养液中均检测到重组釉原蛋白的较高表达,重组质粒PsecTaq2A-AMG转染组ELISA定量检测细胞内重组釉原蛋白浓度达0.877μg/ml。结论PsecTaq2A-AMG具有较强的在真核细胞系中表达和分泌重组釉原蛋白的能力,适宜基因工程体外制备重组釉原蛋白。
- 章锦才赵川江徐琛蓉
- 关键词：釉原蛋白转染真核表达
- 人釉原蛋白真核表达载体体外表达产物生物学活性的检测被引量：1
- 2008年
- 目的探讨人釉原蛋白基因重组质粒PcDNA3.1-AMG的真核细胞转染表达产物是否具有促进牙周组织再生的作用。方法脂质体介导PcDNA3.1-AMG体外转染COS1细胞,ELISA法检测转染细胞内及其培养上清液中重组釉原蛋白的表达;建立犬牙周组织缺损模型,局部使用转染表达产物冻干粉,8周后通过组织学观察牙周组织再生的情况。结果PcDNA3.1-AMG转染的COS1细胞内重组釉原蛋白浓度为(0.253±0.075)μg/ml,培养液中浓度为(0.065±0.011)μg/ml;使用转染表达产物8周后,牙周缺损区牙骨质、牙槽骨均有显著再生,并且新生牙骨质为有胶原纤维穿通的无细胞牙骨质。结论重组质粒PcDNA3.1-AMG在体外转染哺乳动物细胞后能够表达重组人釉原蛋白,并且表达产物具有促进牙周组织再生的生物学活性。
- 赵川江章锦才徐琛蓉张蕴惠
- 关键词：釉原蛋白质粒引导组织再生牙周
- 人釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达
- 2006年
- 目的研究人釉原蛋白(AMG)重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达。方法采用脂质体载体法将釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG导入COS-1细胞系,用Zeoin筛选得到稳定转染克隆,并经ELISA检测细胞内和细胞培养液中重组釉原蛋白AMG的表达。结果在未经转染的对照组细胞内和细胞培养液中均未检测到AMG的表达,而经转染的实验组不论细胞内或细胞培养液中均检测到AMG的较高表达,重组质粒PcDNA3-AMG转染组细胞内AMG浓度达0.253μg/ml。结论PcDNA3-AMG具有较强的在真核细胞系中表达和分泌AMG的能力,适宜基因工程体外制备重组釉原蛋白。
- 章锦才赵川江徐琛蓉
- 关键词：釉原蛋白转染真核表达
