江苏省自然科学基金(BK2010171)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 大鼠βB2-晶体蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2011年
- 目的表达并纯化βB2-晶体蛋白,制备其多克隆抗体,用以研究βB2-晶体蛋白聚合的机制。方法用RT-PCR的方法扩增了βB2-晶体蛋白的cDNA并克隆到原核表达载体pMON5473中。用萘啶酮酸诱导recA启动子后,蛋白质在大肠杆菌中得到了高效表达。表达的蛋白质用DEAE纤维素层析和凝胶过滤纯化,SDS-PAGE显示一条带。与佐剂混合后免疫新西兰大白兔。结果纯化了大鼠βB2-晶体蛋白,成功制备了其多克隆抗体。结论制备的多克隆抗体为下阶段的研究提供了重要的实验材料。
- 胡书群裴冬生陆梁赵惠仁
- 关键词：纯化抗体
- TAT—GluR6—9C与pMON原核表达载体重组体的构建
- 2011年
- 目的表达和纯化TAT—GluR6—9C小肽，用于脑缺血细胞信号转导的研究。方法用化学合成的方法获得TAT—GluR6—9C小肽的cDNA；与原核表达载体pMON用T4DNA连接酶连接；连接产物转化大肠杆菌JMl09进行筛选、序列测定。结果①经化学合成并退火得到了TAT—GluR6—9C的双链cDNA；②酶切鉴定能观察到TAT—GluR6—9C和pMON两条带；③TAT—GluR6—9C测序图谱与GenBank报道完全一致。结论获得了含目的基因TAT—GluR6—9C的pMON原核表达载体重组体。
- 胡书群刘东海张光毅
- FoxO3a激活FasL介导肾缺血再灌注中肾小管上皮细胞凋亡的作用及机制被引量：4
- 2014年
- 目的观察叉头框蛋白FoxO3a激活Fas配体FasL介导肾缺血再灌注损伤诱导肾小管上皮细胞凋亡的作用及机制。方法双侧夹闭大鼠肾蒂缺血45min后再灌注建立动物模型。免疫印迹分析FoxO3a、FasL的表达变化;原位缺口末端标记法检测大鼠肾小管上皮细胞凋亡情况;透射电镜观察肾小管上皮细胞凋亡的超微结构变化;生化全自动分析仪检测大鼠肾功能。结果大鼠肾缺血再灌注1 h后,FoxO3a及FasL蛋白表达水平明显增加;再灌注48 h,肾小管上皮细胞凋亡损伤加剧,凋亡数目明显增加,血肌酐及尿素氮水平明显升高,与假手术组相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论大鼠肾缺血再灌注能诱导FoxO3a激活,进而上调FasL的表达,促进肾小管上皮细胞凋亡,加剧肾组织损伤。
- 徐剑王艳姬怀雪胡书群董红艳任玲
- 关键词：FAS缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡
