国家重点基础研究发展计划(2010CB134502) 作品数:9 被引量:81 H指数:5 相关作者: 张和平 包秋华 张家超 于洁 徐洁 更多>> 相关机构: 内蒙古农业大学 沈阳农业大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 长江学者和创新团队发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 化学工程 农业科学 更多>>
益生菌Lactobacillus casei Zhang在酸胁迫下的蛋白质组学研究 被引量:5 2012年 Lactobacillus casei Zhang是1株筛选自发酵酸马奶,并具有耐酸等益生特性的益生乳杆菌。该研究利用蛋白质组双向电泳,比较了其在pH值为7.0和5.5的培养液中分别生长至对数生长期中期的蛋白质组表达差异。结果表明,有11个蛋白质点表达发生明显变化,经过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定,其中有3个表达增强的蛋白质点分别鉴定为翻译因子(EF-Tu),N-乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸脱醛酶(NagA)和小热休克蛋白(sHsp)。酸胁迫可诱导乳酸菌产生复杂的酸应激反应,涉及不同的代谢调控途径。 乌日娜 岳喜庆 张和平关键词:LACTOBACILLUS CASEI ZHANG 蛋白质组 酸胁迫 多项分类方法鉴定西藏地区藏灵菇中的乳酸球菌 2012年 【目的】采用多项分类法对16株分离自藏灵菇中的乳酸球菌进行准确鉴定。【方法】首先应用传统的生理生化试验,之后采用16S-23S rRNA间区序列多态性分析和变性梯度凝胶电泳(DGGE)进行了鉴定,最后,通过16S rRNA基因序列分析进行验证。【结果】将16株菌株初步鉴定为3个菌群:片球菌群、乳球菌群和肠球菌群,进一步鉴定为14株耐久肠球菌,1株乳酸片球菌,1株乳酸乳球菌乳酸亚种,16S rRNA基因序列分析验证的结果与前3种试验方法的结果相一致。【结论】试验结果表明传统的生理生化鉴定和16S-23S rRNA间区序列多态性分析和变性梯度凝胶电泳(DGGE)相结合的多项分类方法有利于乳酸球菌种间的准确鉴定。 孙婷 王芳 李梅花 孙春玲 刘文俊 于洁 张家超 张和平关键词:藏灵菇 利用16S rDNA序列及tuf-RFLP鉴定蒙古国发酵乳中的乳酸菌 被引量:12 2011年 运用16S rDNA序列分析和tuf-RFLP技术对采于蒙古国扎布汗省的25份发酵乳样中分离出的110株乳酸菌进行鉴定。首先将分离的110株乳酸菌的16S rRNA基因进行扩增,测序并构建系统发育树,初步鉴定为41株嗜热链球菌,40株瑞士乳杆菌,11株德氏乳杆菌保加利亚亚种,2株发酵乳杆菌,1株乳明串珠菌,2株肠膜明串肠膜亚种,1株乳酸乳球乳酸亚种和12株属于干酪族的菌株。由于干酪乳杆菌族的16S rDNA序列差异很小,故采用tuf-RFLP技术对这12株进行了进一步的验证,通过分离菌株与模式菌株tuf-RFLP图谱的比较分析,结果表明这12株菌均为干酪乳杆菌。 王宏梅 于洁 包秋华 吕嫱 孟和毕力格 张和平关键词:乳酸菌 RDNA序列分析 系统发育树 干酪乳杆菌群和植物乳杆菌群的分子鉴定技术和分类方法的研究进展 被引量:3 2010年 乳杆菌属是乳酸菌类群中最大的一个属,在乳酸杆菌的研究和应用中,分类鉴定是其中的一个重要领域。由于乳杆菌属内许多种间的表型特征难以区别,利用生理生化实验方法往往无法进行准确鉴定。近几年,随着分子生物学的飞速发展,从分子和基因水平来认识乳酸菌的遗传结构和分类已成为可能,而采用常规的16SrDNA序列同源性分析不能将相近的植物乳杆菌群和干酪乳杆菌群分别鉴定到种及亚种的水平,目前许多新的分子鉴定技术和分类方法被用来进行相近乳酸菌的分类和鉴定。本文结合自己的试验归纳出如蛋白酶编码基因序列分析、扩增片段长度多态性分析、种间特异性PCR等九种用于区分和鉴定植物乳杆菌群和干酪乳杆菌群的分子技术和方法,对乳酸菌的多相分类学研究和工业化生产具有的重要意义。 王芳 包秋华 徐海燕 于洁 张家超 张和平关键词:干酪乳杆菌 植物乳杆菌 一种快速定性和定量检测发酵乳中L.fermentum的方法 被引量:4 2011年 通过比对发酵乳杆菌(L.fermentum)与其他乳酸菌的16S rRNA基因序列的异同,设计出L.fermentum的种属特异性引物,应用此引物进行种属特异性PCR和实时荧光定量PCR反应,通过琼脂糖凝胶电泳图谱和实时荧光定量PCR图谱分析,建立一种快速检测发酵乳中L.fermentum的定性和定量测定方法。 包秋华 陈永福 张家超 孙志宏 包艳 张和平关键词:乳酸菌 发酵乳杆菌 PCR 实时荧光定量PCR 益生乳酸菌Lactobacillus casei Zhang从基础研究到产业化开发 被引量:11 2011年 2001年-2009年,内蒙古农业大学"乳品生物技术与工程"教育部重点实验室从采集自中国西部7个省市及蒙古国14个省市不同少数民族地区951份自然发酵乳制品等样品中分离鉴定出3 388株乳酸菌,建立了中国首个原创性乳酸菌菌种资源库;从菌种库中分离自传统发酵酸马奶(koumiss)的243株乳杆菌中筛选获得1株性能优良的乳酸菌—Lactobacillus casei Zhang(L.casei Zhang)。采用5种动物模型和人体试验进行了功能评价,并利用基因组学和蛋白质组学研究技术对L.casei Zhang益生分子机制进行了深入剖析。经过多年系统的基础研究,自主解决了其产业化的关键技术问题,包括其直投式发酵剂、发酵乳制品和发酵豆乳益生菌饮料的研发并实现了产业化。 张和平关键词:CASEI ZHANG 干酪乳杆菌对数生长期与稳定期蛋白质组比较分析 被引量:6 2012年 研究建立干酪乳杆菌Lactobacillus casei XM2-1的蛋白质组双向电泳表达图谱,比较其在对数生长中期与稳定期初期的图谱差异。结果表明:有16个蛋白质点表达发生明显变化,经过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定,其中有7个蛋白质点鉴定为应激蛋白质,分别为GroEL、DnaK、Hsp 20-1、Hsp 20-2和UspA蛋白质。可见,应激蛋白质可能在L.casei XM2-1稳定期对外界环境的抵御能力增强起到重要作用。 乌日娜 岳喜庆 张和平关键词:干酪乳杆菌 蛋白质组 实时荧光定量PCR中内参基因的选择 被引量:33 2010年 实时荧光定量PCR技术是分析基因表达谱的一种常用方法,在分析中选择合适的内参基因对数据进行校正是得到可信数据的关键。以Lactobacillus helveticus H9为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术,评价了5种常用内参基因ldh、recA、rpoB、gapdh和16S rRNA的表达稳定性,通过geNorm和NormFinder程序进行数据分析,结果表明5个候选内参基因在菌株不同的发酵时间点表达相对都较为稳定,结合两种分析得到其中最为稳定的基因是ldh,适合于用作后续实时荧光定量PCR试验中的内参基因。 赵文静 徐洁 包秋华 陈永福 张和平关键词:实时荧光定量PCR 内参基因 GENORM NORMFINDER 一种检测发酵乳中嗜酸乳杆菌的定量定性方法 被引量:9 2012年 根据乳酸菌的16S rDNA基因序列设计嗜酸乳杆菌种特异性引物,应用种特异性PCR和实时荧光定量PCR反应,通过琼脂糖凝胶电泳图谱和实时荧光定量PCR图谱分析,建立快速、准确地检测发酵乳中L.acidophilus的定量和定性方法。 包秋华 李梅花 徐洁 张家超 张和平关键词:益生菌 嗜酸乳杆菌