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电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响被引量：1: 2014年; 目的研究电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响.方法 0、0.5、3和8 Gy60Co γ射线照射A549细胞后,利用JC-1探针检测照射后肺腺癌细胞A549线粒体膜电位的变化；使用ATP试剂盒检测辐射对A549细胞ATP生成的影响；利用实时定量PCR方法检测线粒体拷贝数.结果在照射后24 h,各剂量组A549细胞膜电位出现明显改变（F=243.44,P＜0.05）,与0 Gy照射组相比,0.5和3 Gy照射的A549细胞线粒体膜电位显著升高（t=-10.12、-5.59,P＜0.05）,而8 Gy照射的线粒体膜电位显著降低（t=15.22,P＜0.05）,照后48 h各照射组线粒体膜电位基本恢复正常（F=10.36,P＜0.05）；照射后24 h ATP水平与膜电位变化趋势一致（F=97.08,P＜0.05）,其中0.5和3 Gy A549细胞中ATP水平升高（t=1.66、7.27,P ＜0.05）,8 Gy照射组降低（t=-8.24,P＜0.05）；照射后48 h,ATP水平也发生变化（F =39.49,P＜0.05）,0.5和3 Gy照射后A549细胞中ATP水平显著高于0 Gy组（=4.60、8.53,P＜0.05）.照射后24 h线粒体拷贝数显著增加,其中0.5 Gy mtDNA拷贝数增加至对照组的12倍（t=0.02,P＜0.05）,3和8 Gy组mtDNA拷贝数分别增加至对照组的7和10倍（=9.68、15.10,P＜0.05）.结论大剂量电离辐射会导致A549细胞线粒体膜电位降低,从而影响ATP的生成,中等剂量以下的照射会导致A549细胞线粒体膜电位代偿性增高,从而使ATP的生成增多,8 Gy以内的电离辐射可使mtDNA拷贝数代偿性升高.; 高玲刘巧维冯先武封江彬刘青杰; 关键词：线粒体膜电位三磷酸腺苷

^60Coγ射线诱导人外周血淋巴细胞核质桥的剂量一效应关系研究被引量：1: 2014年; 目的确定核质桥判定标准，建立^60Coγ射线诱导正常人外周血淋巴细胞中核质桥（NPB）的剂量一效应曲线。方法用^60Coγ射线照射3名健康男性离体外周血，照射剂量分别为0、1、2、3、4、5和6Gy，剂量率为1Gy／min，采用胞质分裂阻滞微核（CBMN）法进行细胞培养、收获、制片、染色。在光学显微镜下分析双核细胞中NPB及微核（MN）。结果在0～6Gy^60Coγ射线照射后，人外周血双核淋巴细胞中的NPB符合泊松分布，且NPB频率随吸收剂量增加而增加（H=19．51，P〈0．01），拟合回归方程为线性平方模式Y=（1．39×10-3）x2＋（4．94×10-3）x（R2=0．981，P〈0．01）。结论成功建立0～6Gy^60Coγ射线诱导正常人外周血淋巴细胞中NPB的剂量一效应曲线。; 赵骅陆雪陈德清刘青杰; 关键词：电离辐射微核

^60Coγ射线诱导人淋巴细胞线粒体COX基因表达改变的研究被引量：4: 2010年; 目的探讨电离辐射诱导人淋巴细胞线粒体COX Ⅰ、COXⅡ和COXⅢ基因表达的改变.方法用1、3、5、8和10 Gy 60Co γ射线分别照射指数增长期的人淋巴细胞永生化细胞株,8 h后用逆转录PCR（RT-PCR）和实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法检测COX Ⅰ、COXⅡ和COXⅢ基因在mRNA水平上的表达;流式细胞术检测其在蛋白水平上的表达;比色法检测COX活性,来分析辐射诱导线粒体COX Ⅰ、COXⅡ和COXⅢ基因表达改变的量效关系.同时,以5 Gy γ射线照射人淋巴细胞,分别于照后不同时间（0.5、4、8、12、24、48和72 h）,同样通过上述指标来分析3种线粒体基因的表达变化,观察其时效关系.结果在mRNA水平上,线粒体COX Ⅰ、COXⅡ和COXⅢ基因表达总体上调.COX Ⅰ和COXⅢ基因在0～3 Gy剂量范围内具有量效关系,而COXⅡ基因在0～8 Gy剂量范围内具有量效关系（FCOXⅠ=116.62,FCOXⅡ=17.89,FCOXⅢ=8.20,P＜0.05）;5 Gy照后4 h左右COXⅡ和COXⅢ基因表达上调最显著,而COX Ⅰ基因持续低表达（FCOXⅠ=31.99,FCOXⅡ=19.47,FCOXⅢ=20.64,P＜0.05）.在蛋白水平上,不同剂量照射后,COX Ⅰ和COXⅡ蛋白表达先下调后上调,COXⅢ蛋白表达下调（FCOXⅠ=16.96,FCOXⅡ=32.5,FCOXⅢ=6.51,P＜0.05）;5 Gy照后4 h,COX Ⅰ蛋白表达明显增强,达到8 h后出现COXⅡ蛋白表达显著上调,而COXⅢ蛋白表达普遍下调（FCOXⅠ=14.68,FCOXⅡ=17.18,FCOXⅢ=2.52,P＜0.05）.此外,受照后COX活性普遍降低.结论电离辐射可以诱导人淋巴细胞线粒体COX Ⅰ、COXⅡ和COXⅢ基因表达的改变,基因表达总体增强的同时,COX活性普遍降低.; 李玉文封江彬陆雪范莉陈德清刘青杰; 关键词：线粒体 COX 基因表达

Identification of Two Novel Mitochondrial DNA Deletions Induced by Ionizing Radiation被引量：1: 2012年; Objective We identify ionizing radiation-induced mitochondrial DNA (mtDNA) deletions in human lymphocytes and their distribution in normal populations. Methods Long-range polymerase chain reactions (PCR) using two pairs of primers specific for the human mitochondrial genome were used to analyze the lymphoblastoid cell line following exposure to 10 Gy 60 Co γ-rays. Limited-condition PCR, cloning and sequencing techniques were applied to verify the mtDNA deletions detected with long-range PCR. Human peripheral blood samples were irradiated with 0, 2 and 6 Gy 60 Co γ-rays, and real-time PCR analysis was performed to validate the mtDNA deletions. In order to know the distribution of mtDNA deletions in normal population, 222 healthy Chinese adults were also investigated. Results Two mtDNA deletions, a 7455-bp deletion (nt475-nt7929 in heavy strand) and a 9225-bp deletion (nt7714 -nt369 in heavy strand), occurring between two 8-bp direct repeats, were identified in lymphoblastoid cells using long-range PCR, limited-condition PCR and sequencing. These results were also observed for 60 Co γ-rays irradiated human peripheral blood cells. Conclusion Two novel mtDNA deletions, a 7455-bp deletion and a 9225-bp deletion, were induced by ionizing radiation. The rate of the mtDNA deletions within a normal population was related to the donors' age, but was independent of gender.; ZHAO Xiao TaoFENG Jiang BinLI Yu WenLUO QunYANG Xin ChunLU XueCHEN De QingLIU Qing Jie; 关键词：线粒体DNA 电离辐射诱导聚合酶链反应 PCR扩增 MTDNA

细胞核基因组和线粒体基因组的相互作用: 2010年; 线粒体DNA是细胞内唯一的核外遗传物质，线粒体的主要功能是合成ATP，为细胞生命活动提供直接能量。线粒体基因组与核基因组在基因、蛋白以及细胞水平上相互作用，共同保证细胞能量代谢有关的活动，维持着线粒体的正常功能和细胞的正常状态。; 王卉刘青杰; 关键词：线粒体基因核基因基因表达与调控

^60Coγ射线离体照射诱导人线粒体COXI、ND1和ND6基因表达变化的研究被引量：2: 2009年; 目的探讨电离辐射诱导的人线粒体基因COXI、ND1和ND6表达的变化。方法用^60Coγ射线（1、3、5、8和10Gy）照射指数增长期的人淋巴细胞永生化细胞株，8h后用反转录PCR（RT-PCR）和实时荧光定量PCR（Real-timePCR）的方法检测线粒体基因（COXI、ND1和ND6）的表达变化，分析剂量-效应关系；以5Gy剂量照射后，于不同时点（0．5、4、8、12、24、48和72h）分析3种线粒体基因的表达变化，观察时间-效应变化。结果通过量效关系和时效关系方面的研究发现，COXI、ND1和ND6基因表达总体上调，但3种基因又具有其各自的特征：COXI基因除5Gy外，其他剂量照射后与对照组相比表达增强（F=116．62，P〈0．05）；ND1基因经1、8、10Gy剂量照射后，与对照组相比表达增强（F=25．13，P〈0．05），5Gy剂量照射后，除8和48h两组外，其余各组的表达改变与对照组相比，表达增强（F=223．68，P〈0．05）；ND6基因经1、8、10Gy剂量照射后与正常对照组比较，基因表达增强（F=18．51，P〈0．05），5Gy剂量照射后4、8、24、48和72h与对照组相比表达，明显增强（F=138．91，P〈0．05）。结论电离辐射可以诱导人线粒体COXI、ND1和ND6基因表达的改变，总体表达是增强的。; 李玉文封江彬陆雪陈德清刘青杰; 关键词：线粒体基因表达

放射生物剂量学研究的新进展被引量：2: 2015年; 放射生物剂量学方法在历次放射事故应急处置中起到非常重要的作用，主要采用非稳定性染色体畸变和微核分析。最近的研究关注快速高通量的生物剂量计的探索，不仅涉及上述方法的自动化，还涉及DNA双链断裂、基因表达等分子生物学剂量计的研究以及代谢组学和血清学指标的筛选。笔者主要就2012—2014年放射生物州量学研究的新进展进行综述。; 蔡恬静刘青杰; 关键词：细胞遗传学分子生物学

^(60)Co γ射线诱导线粒体复合体Ⅰ亚基因表达改变的研究被引量：2: 2010年; 为探讨电离辐射对人淋巴细胞线粒体复合物Ⅰ亚基因表达的影响,采用1、3、5、8和10Gy^(60)Co γ射线分别照射指数生长期的人淋巴细胞永生化细胞株,8h后利用逆转录PCR(RT-PCR)摸索各基因的最佳实验条件,进而利用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)方法定量检测各基因表达变化,观察辐射对复合物Ⅰ基因表达影响的剂量效应关系;同时以5Gy^(60)Co γ射线照射人淋巴细胞后,分别于不同时间点(0.5、4、8、12、24、48和72h),同样通过RT-PCR和Real-timePCR方法检测各基因表达的变化,观察其时效关系。结果表明,在mRNA水平上,线粒体复合物Ⅰ基因表达总体上调。剂量效应关系方面,ND2基因在8Gy剂量范围内呈现出随剂量增加基因表达增强的趋势;时效关系方面,7种亚基均在5Gy剂量照射后4h左右表达增强最显著,且大部分基因可持续高表达至48或72h左右。说明电离辐射可以诱导人淋巴细胞线粒体复合物Ⅰ基因表达的改变,表达总体上调。; 李玉文封江彬陆雪范莉陈德清刘青杰; 关键词：Γ射线线粒体 NADH脱氢酶基因表达

用FISH技术对忻州事故宫内受照者进行回顾性剂量重建被引量：3: 2010年; 目的对忻州事故中宫内受照者＂京＂进行回顾性剂量重建.方法受照后16年取＂京＂及其母亲＂芳＂的外周静脉血,用常规方法分析非稳定性染色体畸变,用CB法分析双核淋巴细胞微核;用全染色体探针的FISH方法分析染色体易位,参照本实验室建立的全基因组易位率与吸收剂量之间的剂量-效应曲线进行剂量估算.参照＂芳＂的剂量校正系数推算＂京＂在宫内的受照剂量.结果受照16年后未观察到两位受照者的外周血非稳定性染色体畸变,淋巴细胞微核率在正常范围内.参照本实验室建立的吸收剂量与全基因组易位率之间的剂量-效应曲线,＂芳＂在16年后用FISH方法估算的剂量为0.76（0.41～1.00）Gy,而＂芳＂在事故后短期内估算的生物剂量为2.30（2.07～2.50）Gy,其剂量校正系数为3.03;＂京＂在16年后估算的剂量为0.61（0.44～0.86）Gy,推算＂京＂在宫内受照的剂量为1.85（1.33～2.61）Gy.结论 16年后用FISH方法对宫内受照者进行剂量重建,参照受照母亲的剂量校正系数,可推算出胎儿宫内受照的大致剂量,为临床提供依据.; 陆雪赵骅梁莉张淑兰封江彬张照辉陈德清马力文贾廷珍刘青杰; 关键词：荧光原位杂交

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国家自然科学基金(30870749)

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