博士科研启动基金(F-460)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 相关作者：李丽娟徐海燕王树人杨艳唐薇薇更多>>
- 相关机构：遵义医学院四川大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胰岛素样生长因子2和H19基因印迹的机制及其印迹异常与疾病的关系被引量：2
- 2015年
- 胰岛素样生长因子2(IGF2)和H19是连锁交互印迹的基因,二者对细胞的增殖发挥重要的调控作用。IGF2和H19的印迹控制区包括IGF2基因内的差异甲基化区(DMR)和H19上游的DMR,这些DMR甲基化状态改变所导致的IGF2和H19印迹表达紊乱是肿瘤等增殖性疾病的重要发病机制;另外,绝缘蛋白CCCTC结合分子(CTCF)及类CTCF(BORIS)也参与了IGF2和H19的印迹调控,二者的表达紊乱同样也可造成IGF2和H19的印迹改变及表达紊乱。无论IGF2的印迹丢失还是H19的印迹丢失都参与了肿瘤等增殖性疾病的发生,该机制对这些疾病的影响越来越受到关注。本文总结了近年来的资料,阐述了IGF2和H19印迹的机制,分析了IGF2和H19的印迹状态改变与疾病的关系。
- 徐海燕王树人李丽娟
- 关键词：印迹基因胰岛素样生长因子2H19
- 同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞增殖周期的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究表明,动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的独立危险因子,同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy),能通过促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖而影响AS的发生,但Hcy与VSMCs增殖之间的关系,目前并不清楚。本研究采用不同浓度的Hcy刺激原代培养的脐静脉VSMCs,分析Hcy对VSMCs增殖周期的影响。方法常规培养人脐带VSMCs,将培养的VSMCs分为,0、50、100、200、500及1000μmol/L Hcy组,其中0μmol/LHcy组为对照组。当VSMCs细胞长满80%瓶底时,各组加入不同浓度的Hcy,继续培养细胞24h和48h,采用倒置显微镜观察细胞的生长状态,采用MTT法检测VSMCs的增殖活力,采用流式细胞技术分析VSMCs的增殖周期。结果当Hcy刺激VSMCs 24h和48h后,VSMCs的数目增多,细胞的活力增加(P<0.05);同时VSMCsS期细胞减少,G2/M期细胞增多,G0/G1细胞基本不变。结论 1.Hcy可直接诱导VSMCs的增殖;2.Hcy促进VSMCs从S期向G2/M期转变。
- 李丽娟徐海燕杨艳王树人
- 关键词：动脉粥样硬化同型半胱氨酸血管平滑肌细胞细胞增殖细胞周期
- 同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞CTCF表达的影响
- 2010年
- 目的以动脉粥样硬化(AS)的独立危险因子同型半胱氨酸(Hcy)处理人脐静脉血管平滑肌细胞(VSMCs),观察Hcy对VSMCs多价核因子CTCF表达的影响,探讨Hcy致AS发病的可能机制。方法 将培养的VSMCs分为0、50、100、200、500及1000 mol/L Hcy处理组,以0 mol/L Hcy组为空白对照。在VSMCs覆盖瓶底70%时,将不同浓度的Hcy加入培养液,继续培养VSMCs 48 h,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组织化学方法分别检测VSMCsCTCF的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,Hcy刺激48h后,VSMCs CTCF的mRNA和蛋白表达皆明显增加,以高浓度组为著(500、1000 mol/LHcy,<0.05)。CTCF免疫组织化学阳性染色以细胞核为主。结论 Hcy升高可诱导VSMCs CTCF的表达上调。
- 李丽娟徐海燕唐薇薇刘佳云张冬
- 关键词：同型半胱氨酸血管平滑肌细胞CTCF动脉粥样硬化DNA甲基化
- 同型半胱氨酸干扰胰岛素样生长因子2和H19的印迹表达及其与血管平滑肌细胞增殖的关系被引量：2
- 2010年
- 目的采用动脉粥样硬化的独立危险因子同型半胱氨酸刺激脐静脉血管平滑肌细胞,观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2和H19表达的干扰作用,分析二者与血管平滑肌细胞增殖的关系及其在动脉粥样硬化发病中的可能作用。方法将培养的脐静脉血管平滑肌细胞分为0、50、100、200、500及1000μmol/L同型半胱氨酸组,以0μmol/L同型半胱氨酸组为空白对照组。用不同浓度的同型半胱氨酸刺激血管平滑肌细胞48 h后,MTT法检测血管平滑肌细胞的增殖水平;半定量逆转录聚合酶链反应法检测血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2和H19的mRNA表达水平,Western Blotting法检测血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子2的蛋白表达水平。结果与空白对照组相比较,同型半胱氨酸各浓度组血管平滑肌细胞的增殖活力明显增加,以高浓度(500及1 000μmol/L)组为著(P<0.05)。同时,同型半胱氨酸组血管平滑肌细胞H19的mRNA表达水平增加,500及1000μmol/L浓度组(0.548 6±0.063 3及0.733 3±0.049 6)明显高于空白对照组(0.202 2±0.012 4)(P<0.05);胰岛素样生长因子2的mRNA和蛋白表达均下降,尤以高浓度组为著,500及1 000μmol/L浓度组的mRNA(0.258 8±0.024 8及0.168 9±0.069 6)和蛋白(0.116 7±0.015 5及0.083 7±0.018 0)表达水平均明显低于空白对照组(0.515 8±0.018 9和0.244 3±0.042 3)(P<0.05)。结论同型半胱氨酸能干扰胰岛素样生长因子2和H19的表达,并可能进一步促进血管平滑肌细胞的增殖。
- 李丽娟杨艳徐海燕唐薇薇刘佳云王树人
- 关键词：同型半胱氨酸血管平滑肌细胞基因印迹胰岛素样生长因子2H19
- Ox-LDL对VSMCs增殖及H19和IGF2表达的作用被引量：1
- 2015年
- 目的采用不同浓度的氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)刺激脐静脉血管平滑肌细胞(VSMCs),观察H19和胰岛素样生长因子2(IGF2)的表达改变,分析二者在VSMCs增殖中的可能作用。方法将原代培养的脐静脉VSMCs分为对照组(未加Ox-LDL)、低浓度Ox-LDL(20 mg/L)组和高浓度Ox-LDL(50 mg/L)组。采用不同浓度的Ox-LDL分别刺激VSMCs 12和24 h后,用倒置显微镜观察VSMCs的生长状态;用MTT法检测VSMCs的细胞活力;用半定量RT-PCR法检测VSMCs H19和IGF2的mRNA表达水平。结果各组Ox-LDL刺激VSMCs 12和24 h后,细胞数明显增加,以高浓度组较显著;低浓度Ox-LDL组VSMCs的细胞活力明显增加(P<0.05),而高浓度Ox-LDL组VSMCs的细胞活力有所下降,在Ox-LDL刺激24 h时较为显著(P<0.05);Ox-LDL刺激脐静脉VSMCs后,随着刺激浓度的增加及时间的延长,H19mRNA表达增加(P<0.01),而IGF2表达下降(P<0.05)。结论 Ox-LDL可诱导脐静脉VSMCs H19的mRNA表达增加,IGF2的表达下降,二者可能参与脐静脉VSMCs增殖的发生。
- 徐海燕张宽琳王曜晖段畅李丽娟
- 关键词：H19IGF2氧化型低密度脂蛋白增殖动脉粥样硬化
