国家自然科学基金(30701001)
- 作品数:10 被引量:12H指数:2
- 相关作者:樊赛军徐加英宁萍焦旸胡旭东更多>>
- 相关机构:苏州大学山东省肿瘤医院苏州市立医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“333高层次人才培养工程”基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- ELAC2对乳腺癌细胞MCF-7浸润转移和放射敏感性的影响
- 2010年
- 为了探讨ELAC2对乳腺癌细胞MCF-7浸润转移和放射敏感性的影响,利用脂质体转染法将ELAC2基因转入MCF-7细胞,Western blot法检测ELAC2、cyclinB、CDC2和P53蛋白表达水平,细胞划痕法和Boyden小室法检测细胞浸润转移能力,集落形成法检测细胞存活分数,流式细胞仪检测细胞周期。结果表明,成功构建了ELAC2高表达的MCF-7/ELAC2细胞株;ELAC2高表达明显抑制细胞的浸润和转移;细胞受X线照射后,ELAC2高表达使细胞放射敏感性增强,G2期细胞比例增多,同时cyclinB表达降低,P53和Tyr-15磷酸化CDC2表达升高。提示ELAC2高表达可明显抑制细胞浸润和转移;ELAC2高表达使细胞辐射敏感性增加很可能与下调cyclinB、上调P53和Tyr-15磷酸化CDC2蛋白水平有关。
- 宁萍焦旸朱巍徐加英胡旭东樊赛军
- 关键词:乳腺癌细胞MCF-7
- ^(99)Tc^m-MIBI显像评价人肺腺癌荷瘤裸鼠多药耐药状态被引量:1
- 2009年
- 目的采用99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)SPECT显像技术在BALB/c裸鼠的SPCA-1人肺腺癌移植瘤模型上观察应用维拉帕米逆转前后的肿瘤细胞摄取显像剂的情况,以探讨应用该方法评价肿瘤多药耐药状态的可行性。方法荷瘤裸鼠随机分为维拉帕米逆转组和对照组,在应用维拉帕米逆转前后分别进行99Tcm-MIBISPECT显像及感兴趣区(ROI)半定量分析,观察肿瘤多药耐药状态变化情况,并将其结果与流式细胞仪检测结果进行对比。结果对照组与逆转组逆转后显像、逆转组逆转前显像与逆转后显像之间15、60、120min的肿瘤摄取比值(TUR)差异有高度统计学意义(P<0.01)。对照组和逆转组滞留率(RI)均与流式细胞仪检测的P-gp蛋白表达阳性细胞的百分率成负相关(P<0.05)。结论99Tcm-MIBI显像与SPCA-1人肺腺癌肿瘤细胞P-gp的表达成负相关,可以较好地显示肿瘤的多药耐药状态,同时也可动态监测维拉帕米对SPCA-1人肺腺癌多药耐药逆转的效果。
- 胡旭东季成王小玥徐加英杨国仁樊赛军
- 关键词:多药耐药P-GP流式细胞术
- 放射性实验室的安全管理被引量:4
- 2011年
- 目的加强放射性实验室的安全管理,确保开展教学工作和完成科研任务。方法依据国家的相关法规和标准,结合高校的放射性实验室的特点和承担的任务。结果建章立制、设立机构、加强建设、严格管理。立措施、抓落实做到"预防为主,防治结合",确保辐射安全。结论放射性实验室的安全是所在高校维护正常教学秩序完成科研工作的重中之重。
- 宁萍许玉杰张友九张保国曹建平胡明江王道锦朱财英
- 关键词:放射性实验室
- 脂质体法pcDNA3-ELAC2质粒转染乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231以及前列腺癌细胞Du-145被引量:2
- 2010年
- 目的:构建稳定、高效表达ELAC2基因的乳腺癌细胞模型MCF-7/ELAC2、MDA-MB-231/ELAC2,以及前列腺癌细胞模型Du-145/ELAC2,为探索ELAC2基因的生物学功能奠定实验基础。方法:将构建pcDNA3-ELAC2的质粒采用脂质体法转染乳腺癌细胞和前列腺癌细胞,用RT-PCR和WesternBlot分别检测ELAC2基因在细胞中的mRNA表达和蛋白表达。结果:pcDNA3-ELAC2质粒构建成功并顺利导入乳腺癌细胞和前列腺癌细胞中,且检测到ELAC2基因的mRNA和蛋白高表达。结论:构建的pcDNA3-ELAC2重组质粒能够在转染的乳腺癌细胞和前列腺癌细胞中稳定、持续和高效地表达,为进一步研究ELAC2基因的生物学功能提供了理想的实验模型。
- 宁萍樊赛军焦旸徐加英胡旭东朱巍
- 关键词:脂质体PCDNA3DU-145
- 浅谈如何安全使用氚实验室被引量:2
- 2011年
- 氚及其标记化合物已成为军事、工业、农业、医学以及各个科学研究领域里重要的研究工具,如何安全使用氚实验室愈来愈受到人们的重视。本文简要介绍了氚的性质、氚的防护、氚污染的处理以及氚废物的处理等,使研究人员了解和掌握氚的相关知识,以保证实验室及实验操作人员的安全。
- 宁萍刘芬菊张友九张保国方菁嶷
- 关键词:实验室管理实验室安全
- 吲哚-3-甲醇新衍生物I3C-6对宫颈癌HeLa细胞生长的影响被引量:3
- 2009年
- 目的研究吲哚-3-甲醇(I3C)的一种新衍生物I3C-6对人类宫颈癌HeLa细胞生长的影响。方法采用MTT法和体外划痕法检测HeLa细胞的生长和浸润;采用流式细胞术检测对细胞周期的影响;采用DNA梯带凝胶电泳法检测细胞凋亡,采用Westernblot方法检测蛋白表达。结果I3C-6呈现剂量依赖性抑制HeLa细胞的生长,IC50剂量约为10μmol/L。I3C-6处理HeLa细胞后出现显著的细胞凋亡峰(SubG1峰)。DNA凝胶电泳结果也提示I3C-6处理的细胞出现明显的凋亡DNA片段。I3C-6可下调Bcl-2蛋白的表达,并上调Bax蛋白的表达。结论I3C-6可以抑制人类宫颈癌HeLa细胞生长,这与其诱导的细胞凋亡、细胞周期抑制以及凋亡蛋白调节有关。I3C-6可能是一种有效的抗宫颈癌药物和辅助治疗药物。
- 戈畅徐加英焦旸樊赛军
- 关键词:宫颈癌细胞生长
- 谷胱甘肽S转移酶π高水平表达抑制人类宫颈癌HeLa细胞的生长、转移和浸润
- 2009年
- 目的研究胎盘型谷胱甘肽S转移酶π(GSTπ)在宫颈癌细胞中的高表达对其生物学特性的影响。方法通过脂质体介导转染,在人类宫颈癌HeLa细胞建立GSTπ基因高表达稳定转染株;采用细胞计数和MTT法测定细胞的生长;采用划痕法和Boyden小室法检查细胞的转移、浸润能力;采用RT-PCR和Western blot技术检测宫颈癌细胞中相关mRNA和蛋白的表达水平。结果成功构建了GSTπ高表达和空质粒转染的HeLa细胞株;GSTπ基因高表达明显地抑制HeLa细胞的生长、转移和浸润。结论GSTπ可以明显抑制HeLa细胞的生长、转移和浸润,为GSTπ作为一种新的抑癌基因提供了临床前实验数据和依据。
- 杨倞乔惠萍焦旸徐加英樊赛军
- 关键词:谷胱甘肽S转移酶Π宫颈癌
- UHRF1的高表达降低人乳癌细胞对X射线敏感性的研究
- 2010年
- 目的:了解基因UHRF1的高表达对乳癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响。方法:利用克隆形成实验观察细胞存活;流式细胞术测定细胞周期;利用DNA片段分析和Annexin V试剂盒测定细胞凋亡;Western blot测定蛋白表达变化;利用经典的染色体分析,观察染色体畸变(着丝粒环和双着丝粒)。结果:与对照相比,UHRF1转染可明显降低MDA-MB-231细胞对X射线的敏感性。利用UHRF1-si RNA抑制UHRF1的表达,可显著增强细胞的辐射敏感性。UHRF1的高表达,可诱导G2/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和Ku80的表达水平,而且,能抑制X射线诱导的染色体畸变。结论:UHRF1可能通过影响凋亡和DNA损伤修复成为乳癌放疗的新靶标。
- 李新莉樊赛军
- 关键词:X射线敏感性
- ELAC2对前列腺癌细胞Du-145生长影响的体内外实验研究
- 2011年
- 目的研究ELAC2在体内外对前列腺癌生长的影响。方法利用脂质体转染法将ELAC2基因转入Du-145细胞,建立稳定表达ELAC2的细胞株,同时设立未转染Du-145和转染空载体的Du-145/pcDNA3作为对照。采用RT-PCR和Western blot法检测转染前后ELAC2的mRNA和蛋白表达水平;MTT法检测细胞生长和增殖情况。采用BALB/c裸鼠建立Du-145前列腺癌移植瘤动物模型,检测在体内ELAC2对前列腺癌生长的影响。结果 RT-PCR检测结果显示,ELAC2在Du-145/ELAC2细胞中mRNA表达明显增加,Western blot法检测同样发现ELAC2蛋白表达水平显著升高。MTT检测结果表明,Du-145/ELAC2细胞增殖较对照组细胞明显减缓(P<0.05)。在体内,Du-145/ELAC2组平均瘤质量和瘤体积均较对照组明显降低(P<0.05)。结论提高ELAC2基因表达水平能明显抑制体内外前列腺癌细胞Du-145的生长,提示ELAC2可作为前列腺癌治疗的一个新基因。
- 宁萍焦旸胡旭东朱巍徐加英薛景樊赛军
- 关键词:前列腺癌细胞生长稳定转染裸鼠
- 集落形成法和Western Blot法研究ELAC2的辐射增敏作用
- 2010年
- 目的研究ELAC2基因对乳腺癌细胞MCF-7辐射敏感性的影响。方法利用脂质体转染法将ELAC2基因转入MCF-7细胞,同时设立未转染MCF-7和转染空载体的MCF-7/pcDNA3作为对照。RT-PCR法检测ELAC2基因的mRNA表达;集落形成法检测ELAC2基因对肿瘤细胞辐射敏感性的影响;Western Blot法检测ELAC2、FEN-1、MGMT、MRE11及Ku-70基因的蛋白表达水平。结果 ELAC2基因的mRNA和蛋白水平在转染细胞中表达明显增高。细胞接受0、0.5、1、2、4、6Gy的X射线照射后,ELAC2基因高表达使MCF-7细胞的剂量-效应曲线左移,细胞辐射敏感性增强。细胞经5Gy的X射线照射,ELAC2基因高表达未使MGMT蛋白和MRE11蛋白表达发生明显变化,而FEN-1蛋白及Ku-70蛋白表达水平显著下降。结论 ELAC2基因高表达使细胞辐射敏感性增高,其涉及的分子机制可能与ELAC2下调FEN-1蛋白及Ku-70蛋白表达水平有关。
- 宁萍焦旸胡旭东朱巍徐加英樊赛军
- 关键词:乳腺癌MGMT