国家高技术研究发展计划(2011AA100303)
- 作品数：15 被引量：26H指数：3
- 相关作者：张涌权富生刘军胡广东郑月茂更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学中国农业大学中国农村技术开发中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划陕西省农业科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 褪黑素提高热应激猪卵母细胞的质量被引量：3
- 2015年
- 为了研究热应激对猪卵母细胞成熟的影响，以及热应激过程中培养基添加褪黑素是否能够缓解生理过高热对卵母细胞的损伤，试验对体外成熟过程中（0～2h）的卵母细胞进行热应激（41℃），并在成熟培养液（M199）中添加褪黑素（1×10-9mol／L），对其后期发育和囊胚细胞数、囊胚细胞凋亡进行检测。结果表明：热应激能够显著降低猪卵母细胞的囊胚率和囊胚细胞数，囊胚细胞凋亡率显著升高，而添加褪黑素后能够缓解热应激对卵母细胞的影响。说明热应激能够影响卵母细胞的成熟，并对卵母细胞的后期发育产生影响，同时在培养液中加入浓度为1×10-9mol／L的褪黑素能够缓解热应激损伤。
- 张振南陈丹朔任立坤刘鹏杨明瑶吴中红李相运
- 关键词：褪黑素卵母细胞热应激囊胚凋亡
- 玻璃化冷冻对猪MⅡ卵母细胞皮质颗粒分布及其激活后胚胎发育能力的影响被引量：3
- 2012年
- 本实验旨在探讨玻璃化冷冻保存对猪MⅡ期卵母细胞皮质颗粒分布和孤雌激活后早期胚胎发育能力的影响。实验将卵母细胞随机分为对照组、毒性实验组和冷冻组。采用EFS40和EDFS40两种玻璃化冷冻液处理,卵母细胞经恢复后对其进行染色,观察皮质颗粒的分布;并对另一部分卵母细胞实施孤雌激活,观察早期胚胎的发育。结果表明:毒性实验组和冷冻组卵母细胞皮质颗粒部分释放、完全释放的比例无显著差异,但均显著高于对照组(P<0.05)。不同毒性处理组和不同冷冻组间对皮质颗粒的分布无显著差异。与毒性实验组相比,冷冻处理组显著降低皮质颗粒在皮质区分布的比例(P<0.05)。EFS40毒性实验组孤雌激活后的存活率、卵裂率、囊胚发育率均显著高于EDFS40毒性实验组(86.6%vs.75.0%)、(61.8%vs.40.7%)、(30.2%vs.23.5%)(P<0.05)。EFS40冷冻组存活率显著高于EDFS40冷冻组,但均显著低于对照组。结果显示,抗冻保护剂处理和玻璃化冷冻均导致猪卵母细胞皮质颗粒释放,与EDFS40相比采用EFS40较适合猪MⅡ期卵母细胞冷冻保存。
- 郑天威傅祥伟吴国权贾宝瑜朱士恩
- 关键词：卵母细胞皮质颗粒OPS法
- 小鼠早期胚胎线粒体DNA重头甲基化的研究
- ＜正＞引言/目的线粒体是哺乳动物中唯一具有自身遗传物质的细胞器,线粒体DNA（mtDNA）是否存在与核基因组类似的甲基化修饰,一直是生物学领域的热点话题。近年来,许多研究表明不同类型体细胞线粒体基因组中存在甲基化修饰,并...
- 任立坤安磊田见晖
- 动物种业发展现状与对策研究被引量：3
- 2015年
- 中国拥有世界最大的动物产品消费市场,但尚未形成完善的动物种业。随着我国社会经济水平的提高,动物源产品需求不断攀升,农业结构不断调整、科学技术长足进步、动物遗传育种企业蓬勃发展等因素交相汇集,使得我国动物种业迎来关键发展机遇。剖析了动物产业和动物种业的内涵,阐述了发展动物种业的意义,对国内外动物种业的现状进行了分析,提出了科技创新对动物种业发展的重要性,结合实际情况对我国动物种业提出了对策建议。
- 孙康泰贾敬敦魏珣马广鹏葛毅强
- 山羊卵巢间质细胞对小腔卵泡发育的影响
- 2013年
- 为了能有效利用山羊小腔卵泡和研究相关小腔卵泡发育的机理,将山羊小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞、卵泡膜细胞和卵巢髓质间质细胞体外共培养,测定培养第5天卵泡直径、培养液中类固醇激素分泌量、卵母细胞特异性分泌因子gdf9和bmp15基因的表达和卵泡颗粒细胞以及卵母细胞凋亡与抗凋亡基因表达。研究结果显示,山羊小腔卵泡与卵巢间质细胞共培养5d,卵泡直径增加明显大于小腔卵泡单独培养组(P<0.05);小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌的雌二醇激素的量高于小腔卵泡单独培养组(P<0.01),为413.95pg·mL-1;小腔卵泡与卵巢髓质间质细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌孕酮的量(11.695ng·mL-1)极显著高于小腔卵泡单独培养组和其他共培养组(P<0.01),小腔卵泡与卵泡膜细胞共培养5d后,小腔卵泡分泌的孕酮的量高于小腔卵泡单独培养组(P<0.05);小腔卵泡与卵巢皮质间质细胞、髓质间质细胞以及与卵泡膜细胞共培养5d后,其卵母细胞特异性分泌因子gdf9基因和bmp15基因表达显著上调(P<0.01);与卵巢间质细胞共培养5d后,小腔卵泡内卵丘细胞和卵母细胞抗凋亡基因表达上调(P<0.05),小腔卵泡内卵丘细胞和卵母细胞抗凋亡基因表达下调(P<0.05)。表明卵巢间质细胞促进小腔卵泡的生长以及类固醇激素如雌二醇和孕酮分泌,促进小腔卵泡内卵母细胞特异性分泌的生长因子(gdf9和bmp15)基因的表达,同时抑制小腔卵泡的凋亡。尤其是卵巢卵泡膜细胞与小腔卵泡共培养后明显提高小腔卵泡的抗凋亡能力。
- 邱明宁韩成全杨忠财刘军权富生张涌
- 关键词：小腔卵泡共培养细胞凋亡山羊
- 猪繁殖与呼吸综合症病毒结构蛋白GP5-M腺病毒载体的构建及其在山羊乳腺中的表达被引量：2
- 2016年
- 猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)是严重威胁养猪业的病毒性疾病,疫苗免疫是预防该病的最有效途径,PRRSV糖蛋白GP5和基质蛋白M融合后制成的基因工程疫苗能够有效激发机体产生免疫应答。通过在GP5和M基因的5′端依次加上组氨酸标签序列、信号肽序列,利用Linker(GP)序列将GP5和M基因连接构建融合表达GP5和M蛋白的重组质粒pMD18T-SignalP-His-GP5-M。以该质粒为模板,构建重组腺病毒载体并包装腺病毒。结果表明,用包装的腺病毒感染乳腺上皮细胞,测得最佳感染复数(MOI)为25,定量PCR和Western blot方法均检测到GP5-M的表达。大量扩增腺病毒并使用不连续氯化铯浓度梯度离心纯化病毒,使用纯化的病毒灌注山羊乳腺,采用Western blot在收集的乳汁中也检测到GP5-M蛋白的表达。结果证实,利用腺病毒载体作为基因转导的媒介,在山羊乳腺中可以表达GP5-M融合蛋白。
- 兰辉卓伟伟刘军罗艳权富生华松
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合症腺病毒载体山羊乳腺
- BoLA-Ⅰ类基因在牛体细胞克隆胚早期发育中的表达被引量：1
- 2015年
- 体外培养成熟的卵母细胞,通过核移植(Nuclear transfer,NT)技术,构建体细胞克隆(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)胚胎,以体外受精胚胎作为对照组。收集MⅡ期卵母细胞、2细胞胚胎、4细胞胚胎、8细胞胚胎、16细胞胚胎、桑椹胚和囊胚,采用实时荧光定量PCR的方法检测经典BoLA-I基因和非经典BoLA-I基因在MⅡ期卵母细胞及各期胚胎中的相对表达量。结果显示,BoLA-I类基因在在牛MⅡ期卵母细胞中的相对表达量显著高于其在其他各时期胚胎的相对表达量(P<0.05);BoLA-I类基因在牛SCNT胚和IVF胚中相对表达量随胚胎发育的变化趋势类似,随着第1次及随后的卵裂,经典BoLA-I、NC1、NC2基因mRNA的表达下降到极微的水平;NC3、NC4在整个发育阶段均表达很低甚至难以检测到它们表达。结果表明,本试验通过在体外制备及培养SCNT胚胎,初步建立BoLA-I类基因在其的表达模式,为BoLA-I类基因参与母胎免疫机制的研究奠定基础,为进一步寻找评估胚胎质量的标志物提供依据。
- 王勃贺晓丽王勇胜王雪娇张涌郑月茂
- 关键词：SCNTQRT-PCR
- SAHA处理供体细胞对山羊克隆胚胎早期发育的影响被引量：2
- 2015年
- 为探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂羟肟酸(SAHA)对体细胞和山羊核移植胚胎早期发育的影响,采用不同浓度SAHA处理山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblasts,GEFs),并检测其AcH3K9水平、细胞增殖能力、细胞周期及胚胎发育情况、乙酰化水平、多能性基因的表达水平。结果显示,SAHA处理后GEFs的AcH3K9水平显著上升(P<0.05),2.5μmol/L SAHA处理浓度即可显著提高GEFs组蛋白H3K9的乙酰化水平;浓度≤2.5μmol/L时,对细胞增殖能力无明显影响;浓度为5.0μmol/L和10.0μmol/L时,细胞活力显著下降(P<0.05)。AcH3K9上调会引起G0/G1和S期的细胞比例下降(P<0.05)。因此,选择经2.5μmol/L SAHA处理的供体细胞进行核移植。试验组的胚胎卵裂率和囊胚率显著高于对照组(P<0.05),其卵裂率接近于卵胞质单精子注射(ICSI)组。试验组的囊胚率乙酰化水平显著高于对照组,且低于ICSI组(P<0.05)。与对照组相比,试验组囊胚的Oct4、Sox2和Nanog的mRNA表达水平均上升(P<0.05),且均接近于ICSI组。说明,选用2.5μmol/L SAHA处理供体细胞可提高体细胞核移植效率和胚胎品质。
- 魏丽晓刘军张一军权富生郑月茂张涌
- 关键词：羟肟酸克隆胚胎胎儿成纤维细胞山羊
- TALENs mediated human α-lactalbumin gene insertion into the goat β-lactoglobulin locus
- <正>Introductionβ-Lactoglobulin(BLG)is a dominant allergen in goat milk.Here,we applied transcription activator...
- 朱红梅Xin LiuBeifen YanBiao WeiJun Liu靳亚平
- 文献传递
- t-10,c-12CLA促进猪卵母细胞脂质分解提高玻璃化冷冻保存效果
- 本实验拟以猪卵母细胞为材料，成熟过程中添加t-10，c-12 CLA，观察成熟后卵母细胞内脂肪颗粒形态，探讨t—10，c-12 CLA对卵母细胞冷冻保存效率的影响，为进一步优化猪卵母细胞冷冻保存方案提供参考。
- 贾宝瑜吴国权莫显红郑天成傅祥伟朱士恩
- 关键词：胚胎学猪卵母细胞冷冻保存
