国家重点基础研究发展计划(2010CB529203)
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
- 相关作者：糜坚青王瑾李英聂瑞敏刘静静更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院中国科学院中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金上海市教育委员会科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 青蒿素衍生物SM1044诱导弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株SU-DHL-4凋亡的机制研究被引量：2
- 2014年
- 目的:研究青蒿素衍生物SM1044诱导弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株SU-DHL-4凋亡的相关机制。方法:流式细胞术检测SU-DHL-4细胞的凋亡情况;蛋白质印迹(Western blotting)检测凋亡相关蛋白和内质网应激相关蛋白的表达;实时PCR检测内质网应激相关基因的表达;免疫荧光技术检测细胞内钙离子的荧光强度。结果:SM1044可诱导SU-DHL-4细胞凋亡,且具有剂量依赖性(r=0.98,P=0.02);促进胱天蛋白酶3剪切片段及多腺苷二磷酸核糖聚合酶剪切片段的产生,差异有统计学意义(P<0.05);SM1044可使SU-DHL-4细胞中内质网应激相关基因和蛋白的表达显著上调,差异有统计学意义(P<0.05);SM1044可促进细胞内钙离子的水平显著升高。钙离子螯合剂1,2-二(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N’,N’-四乙酸四乙酰氧甲基酯(BAPTA-AM)和SM1044联用组,抗CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)环腺苷酸反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)基因的表达改变是对照组的(2.494±0.289)倍,明显低于SM1044单用组的(4.204±0.429)倍,差异有统计学意义(P<0.01);CHOP的表达也由SM1044单用组(5 734.46±713.66)下调为联用组的(2 006.17±710.43),差异有统计学意义(P<0.01);同时钙离子螯合剂BAPTA-AM也可显著下调SM1044诱导的胱天蛋白酶3剪切片段及多腺苷二磷酸核糖聚合酶剪切片段的表达,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:SM1044可以诱导SU-DHL-4细胞发生凋亡,其机制可能与SM1044促进细胞内钙离子水平升高和内质网应激相关。
- 宋志群赵玲玲崔雯苗圣超王瑾李英糜坚青
- 关键词：青蒿素衍生物弥漫大B细胞淋巴瘤
- 地西他滨抗套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1作用机制的研究被引量：1
- 2011年
- 背景与目的:套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)是一种难治性的恶性肿瘤,预后差。地西他滨对骨髓异常增生综合征及难治性急性髓性白血病的治疗临床上已达成共识,但是目前鲜有地西他滨对MCL作用的报道。本文探讨地西他滨抗MCL细胞的作用机制。方法:以MCL细胞株Jeko-1作为研究对象,采用MTT法检测地西他滨对细胞增殖的影响,Annexin V/PI双重染色法检测其对细胞凋亡的影响,采用DiOC6(3)染色/流式细胞术检测Jeko-1细胞线粒体跨膜电位的丢失,Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及凋亡途径相关蛋白的表达,用亚硫酸氢盐测序(bisulfate sequencing PCR,BSP)技术检测地西他滨作用Jeko-1细胞前后PCDH8基因启动子CpG岛的甲基化水平变化。结果:地西他滨能有效抑制Jeko-1细胞的增殖并诱导其凋亡,凋亡率呈时间和剂量依赖性增加,并引起MCL细胞线粒体跨膜电位丢失,Cyclin D1蛋白表达水平降低,caspase 3、caspase 9表达水平增加。本研究另发现Jeko-1细胞中PCDH8基因启动子CpG岛的甲基化率为76.67%,经过0.5μmol/L低浓度的地西他滨处理72 h后,其甲基化率下降至48.33%。结论:地西他滨在对MCL细胞的作用中,高浓度时起到细胞毒作用,低浓度时则具有去甲基化作用,为今后的临床治疗提供了新的理论依据。
- 耿梅费爱梅刘静静聂瑞敏王瑾糜坚青
- 关键词：套细胞淋巴瘤地西他滨线粒体途径去甲基化
- 三氧化二砷抑制血小板聚集功能的研究被引量：2
- 2014年
- 目的:分析三氧化二砷(ATO)对血小板聚集功能的影响。方法:用不同浓度的ATO(0、0.25、0.5、1、1.5、2、2.5、5和10μmol/L)孵育富血小板血浆(PRP)0、3、15、30、45和60 min,在2 mg/L胶原或2μmol/L腺苷二磷酸(ADP)刺激下,检测血小板聚集功能。结果:在刺激剂为2 mg/L胶原时,ATO(≥5μmol/L)孵育PRP 60 min,可显著抑制血小板聚集,在相应的时间梯度实验中,ATO浓度从5μmol/L上升到10μmol/L,抑制血小板聚集所需要的孵育时间从45 min下降到30 min,ATO对胶原诱导的血小板聚集具有浓度(r=-0.902,P=0.001)和时间(r=-0.964,P=0.002;r=-0.910,P=0.032)依赖性;在刺激剂为2μmol/L ADP时,ATO(≥2μmol/L)孵育PRP 60 min,可显著抑制血小板聚集,在相应的时间梯度实验中,ATO浓度从5μmol/L上升到10μmol/L,抑制血小板聚集所需要的孵育时间从45 min下降到15 min,ATO对ADP诱导的血小板聚集亦具有浓度(r=-0.815,P=0.007)和时间(r=-0.921,P=0.009;r=-0.963,P=0.009)依赖性。结论:低浓度的ATO对血小板聚集功能没有明显的作用,但是高浓度ATO(≥2μmol/L)可抑制血小板的聚集功能,并且该抑制作用具有浓度和时间依赖性。
- 聂瑞敏崔雯王学锋奚晓东糜坚青王瑾
- 关键词：三氧化二砷血小板急性早幼粒细胞白血病
- 新型青蒿素衍生物SM1044诱导Kasumi-1细胞凋亡及机制的研究被引量：6
- 2011年
- 本研究探讨新型水溶性青蒿素衍生物SM1044对人急性髓系白血病M2b细胞株Kasumi-1的诱导凋亡作用及其机制。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法观察SM1044对细胞生长的抑制作用;Annexin-Ⅴ/PI双标记流式细胞术、PI单标记流式细胞术分别检测细胞凋亡和细胞周期;Western blot检测加药处理后Kasumi-1细胞凋亡相关蛋白Caspase 3、PARP以及融合蛋白AML1-ETO的变化。结果显示:青蒿素衍生物SM1044可抑制Kasumi-1细胞的增殖,其抑制作用呈时间和剂量依赖性;1μmol/L SM1044作用24小时,生长抑制率达到50%,48小时的IC50值为0.17±0.067μmol/L;SM1044通过Caspase依赖的途径诱导Kasumi-1细胞凋亡,细胞凋亡率随药物浓度的增加而增加。细胞周期测定显示,SM1044阻滞细胞周期于G0/G1期,5μmol/LSM1044作用24小时使G0/G1期细胞由(58.33±4.46)%上升为(71.75±2.24)%;Western blot测定显示SM1044促使凋亡相关蛋白cCaspase 3(cleaved Caspase 3)、cPARP(cleaved PARP)表达水平增加,同时融合蛋白AML1-ETO表达降低。结论 :SM1044可有效抑制Kasumi-1细胞增殖,诱导细胞凋亡,该过程与cCaspase 3、cPARP蛋白的表达上调有关。SM1044还能阻滞细胞周期,将Kasumi-1细胞阻滞在G0/G1期;同时SM1044能明显引起融合蛋白AML1-ETO的表达降低,可作为SM1044作用的胞内靶点。
- 刘静静费爱梅聂瑞敏王瑾李英王振义糜坚青
- 关键词：青蒿素衍生物KASUMI-1细胞细胞凋亡
- 青蒿素衍生物SM1044对急性髓系白血病细胞株HL60作用的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨青蒿素衍生物SM1044对人急性髓系白血病细胞株HL60细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用及其相关机制。方法:细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测SM1044对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测SM1044对细胞凋亡和线粒体跨膜电位的影响;Western blot法检测凋亡相关蛋白表达的变化。结果:SM1044能有效抑制HL60细胞的增殖,且抑制作用明显强于其他几种青蒿素衍生物,作用48 h的半数抑制浓度(IC50)为0.053μmol/L;SM1044能有效地呈剂量依赖性地诱导HL60细胞凋亡及促进线粒体跨膜电位丢失,不同浓度SM1044(0、0.05、0.1和1μmol/L)作用24 h,细胞凋亡率分别为3.15%、16.75%、32.53%和49.33%(r=0.947,P<0.05),线粒体跨膜电位丢失的细胞率分别为10.3%、26.1%、32.7%和51.25%(r=0.963,P<0.05)。SM1044能活化凋亡外在途径和内在途径关键蛋白胱天蛋白酶-8(caspase-8)和胱天蛋白酶-9,进而激活凋亡执行蛋白胱天蛋白酶-3及剪切凋亡底物蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)。结论:SM1044能显著抑制HL60细胞增殖,诱导HL60细胞凋亡,其机制可能与凋亡内在途径和外在途径有关。
- 彭宇宋志群赵玲玲王月英王瑾李英糜坚青
- 关键词：青蒿素衍生物急性髓系白血病HL60细胞细胞增殖细胞凋亡
- 慢性粒细胞白血病对伊马替尼的耐药机制研究进展被引量：4
- 2014年
- 慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）是一种造血干细胞克隆增殖性疾病。95%以上的CML患者可检测到特征性的费城（Ph）染色体和bcr-abl融合基因。该融合基因编码一种具有酪氨酸激酶活性的蛋白,通过一系列复杂的细胞信号转导途径,使造血干细胞发生异常转化而导致CML的发生[1]。伊马替尼是治疗CML的一线药物。
- 苗圣超糜坚青
- 关键词：伊马替尼耐药机制研究移码突变细胞信号转导MYELOID耐药程度
