河北省科技攻关计划(07220410)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：韩福生张富梅李继连李子平韩昱更多>>
- 相关机构：河北北方学院青岛农业大学更多>>
- 发文基金：河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 羊附红细胞体双抗体夹心ELISA诊断方法的建立被引量：2
- 2011年
- 为快速准确诊断和检测羊附红细胞体病,及时采取防治措施,建立了检测羊附红细胞体抗原的双抗夹心ELISA诊断方法。选取规模化养殖场羊,镜检附红细胞体红细胞感染率>90%,无菌采取血液,分离羊附红细胞体抗原,制备纯化兔抗羊附红细胞体抗体,应用辣根过氧化物酶标记抗体,进行双抗体夹心ELISA试验。试验结果表明,双抗体夹心ELISA方法的最佳工作条件为:抗体最佳包被量为82.91μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1∶400,抗原最低检出量为7.81μg/mL;而且与支原体、大肠杆菌、葡萄球菌以及牛、猪、兔附红细胞体均不出现交叉反应,表明该方法具有良好的特异性,可用于羊附红细胞体病的诊断和群体检测。
- 张富梅韩福生李继连李子平
- 关键词：附红细胞体双抗体夹心ELISA
- 羊附红细胞体解离方法的比较研究
- 2012年
- 本试验为建立一种高效的羊附红细胞体解离方法,采集红细胞感染率大于90%的阳性抗凝血,分别应用水浴法和药物体外驱虫法对羊附红细胞体进行解离,观察分离前后附红细胞体感染率、红细胞感染强度、附红细胞体数、杂质含量和附红细胞体的运动性5项指标;提取附红细胞体抗原,制备全蛋白悬液,测定蛋白质含量,比较解离效果。将两种方法制备的羊附红细胞体抗原全蛋白进行SDS-PAGE试验,观察条带是否一致。结果显示,200mL血液中加入1mL双向红莲灭,4℃作用36h,即可达到较好分离效果。与水浴法相比,解离后,红细胞感染率和感染强度明显下降,蛋白含量增加,收率高,纯度好。SDS-PAGE结果显示,体外驱虫法所制的羊附红细胞体抗原全蛋白悬液,其抗原蛋白带与水浴法相同,因此可用于粗制羊附红细胞体抗原。
- 韩福生韩昱
- 关键词：羊附红细胞体SDS-PAGE
