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年龄相关性白内障α-晶状体蛋白的分子伴侣功能被引量：3: 2005年; 目的:研究年龄相关性白内障α-晶状体蛋白的分子伴侣功能。方法:使用SephacrylS-300HR分离健康人透明的和年龄相关性白内障混浊的晶状体皮质和核的αL-晶状体蛋白。采用分光光度计测定αL-晶状体蛋白对过氧化氢酶(catalase,CAT)热凝聚的抑制作用。应用SDS-PAGE分析CAT与αL-晶状体蛋白在热凝聚实验中形成的复合物。结果:人αL-晶状体蛋白可特异性地抑制CAT热凝聚。透明晶状体皮质较核的抑制作用明显;白内障αL-晶状体蛋白的抑制作用明显下降,65岁以下与65岁以上、65岁以上白内障Ⅱ与Ⅳ级核之间αL-晶状体蛋白的抑制作用比较,差异均有显著性;65岁以下Ⅱ与Ⅳ级核之间比较,差异无显著性,但Ⅳ级核的抑制作用降低。SDS-PAGE显示热凝聚实验透明晶状体皮质αL-晶状体蛋白的20kDa带在加热后0、40min和2h可溶部分无显著减少,62kDa的CAT带含量逐渐减少。结论:人α-晶状体蛋白具有抑制CAT热凝聚的分子伴侣功能,白内障晶状体核的α-晶体蛋白具有年龄和混浊程度依赖性伴侣功能的降低,这在白内障形成过程中起重要作用。; 严宏惠延年王建伟; 关键词：Α-晶状体蛋白分子伴侣年龄相关性白内障过氧化氢酶

硒性白内障α-晶体蛋白的分子伴侣特性被引量：1: 2001年; 目的:研究硒性白内障α-晶体蛋白的分子伴侣特性。方法:制作SD大鼠亚硒酸钠性白内障模型,分离纯化正常和白内障晶状体α-晶体蛋白。观察α-晶体蛋白对过氧化氢酶（CAT）热凝聚的抑制作用。结果:正常和硒性白内障幼鼠晶状体α-晶体蛋白与对照蛋白比较,具有特异性抑制CAT热凝聚的作用;αH较αL-晶体蛋白伴侣功能降低;硒性白内障α-晶体蛋白的抑制作用下降,正常和白内障晶状体αH和αL-晶体蛋白伴侣功能两者之间分别比较均有显著性差异。结论:硒性白内障α-晶体蛋白抑制CAT热凝聚的分子伴侣活性下降是导致白内障形成的重要环节。眼科学报2001;17:78～81。; 严宏惠延年李明勇张晓楠张延凤武丽华; 关键词：Α-晶体蛋白分子伴侣硒性白内障过氧化氢酶

α-晶状体蛋白分子伴娘功能的初步研究被引量：3: 2004年; α-晶状体蛋白作为晶状体的主要结构蛋白,具有分子伴娘特性,对长期维持晶状体的透明具有重要意义[1,2].为探讨其作用机制,我们对比观察了透明晶状体皮质和核、年龄相关性白内障不同年龄患者晶状体和不同混浊程度晶状体中α-晶状体蛋白对过氧化氢酶热凝聚的抑制作用.; 严宏惠延年李明勇张延凤张晓楠武丽华; 关键词：Α-晶状体蛋白过氧化氢酶白内障

高相对分子质量α-晶体蛋白分子伴侣活性在年龄相关性白内障中的变化被引量：7: 2006年; 目的研究年龄相关性白内障高相对分子质量α晶体蛋白(αH晶体蛋白)的分子伴侣功能。方法101只白内障晶状体取自年龄相关性白内障(ARC)患者眼,26只透明晶状体取自意外死亡的健康青壮年角膜移植供体眼,使用SephacrylS300HR分离透明和混浊晶状体皮质和核αH晶体蛋白。采用αH晶体蛋白抑制过氧化氢酶(CAT)、βL晶体蛋白的热凝聚,以及糖基化和加热诱导CAT的失活作为分子伴侣的观察指标。结果年龄相关性白内障晶状体含大量αH晶体蛋白,αH晶体蛋白的作用较αL晶体蛋白弱,对CAT和βL晶体蛋白热凝聚的抑制作用相似。透明晶状体与ARC、65岁以上组与65岁以下组、Ⅱ级与Ⅳ级核之间αH晶体蛋白分子伴侣功能差异具显著性。αH晶体蛋白可保护果糖和加热诱导CAT的失活。结论人αH晶体蛋白具有分子伴侣活性。但活性较αL晶体蛋白低。晶状体在老化过程中受翻译后修饰(PTM)的严重影响,形成大量αH晶体蛋白聚合物,导致分子伴侣功能下降,可能是白内障发病的关键因素之一。; 严宏惠延年王建伟王永强丁正华郭勇; 关键词：分子伴侣年龄相关性白内障翻译后修饰

糖基化对α-晶状体蛋白的修饰和分子伴侣活性的降低被引量：28: 2003年; 目的　研究糖基化对 α-晶状体蛋白分子伴侣活性的作用。方法　分离牛晶状体α-晶状体蛋白 ,分别与 0 .5 mol· L- 1 果糖和 0 .5 m ol· L- 1 葡萄糖在 37℃温育 ,在第 0、2 4、32天测定 380 nm的光吸收值和 40 0 nm非色氨酸荧光值 ,高压液相色谱 ( high performanceliquid chrom atography,HPL C)和 SDS- PAGE评价蛋白质交联程度 ,采用过氧化氢酶( catalase,CAT)和βL-晶状体蛋白的热凝聚光散射值 ,作为α-晶状体蛋白的分子伴侣活性指标。结果　果糖和葡萄糖可导致时间依赖性 α-晶状体蛋白在 380 nm吸收值的增加 ,非色氨酸荧光值升高 ;HPL C和 SDS- PAGE提示糖与α-晶状体蛋白形成交联复合物。果糖较葡萄糖作用明显。糖基化导致 α-晶状体蛋白抑制 CAT和 βL-晶状体蛋白热凝聚作用降低 ,孵育第 2 4天 ,葡萄糖组α-晶状体蛋白分子伴侣活性分别降低约 12 %和 19% ,果糖组约7%和 9% .结论　糖基化导致 α-晶状体蛋白形成高分子聚合物、凝聚、交联 ,分子伴侣活性丧失 ,这在老化和糖尿病性白内障形成过程中起重要作用。; 严宏惠延年范建国张延凤武丽华张晓楠; 关键词：Α-晶状体蛋白分子伴侣糖基化白内障糖尿病

老化过程中α-晶体蛋白分子伴侣活性的变化被引量：1: 2003年; 目的:研究老化过程中α-晶体蛋白的分子伴侣功能。方法:使用Sephacryl S-300HR分离幼年、中年和老年兔晶状体皮质和核α-晶体蛋白。测定α-晶体蛋白对加热(60℃)诱导过氧化氢酶(catalase,CAT)和β_L-晶体蛋白凝聚,果糖(37℃)和加热(60℃)诱导CAT失活的保护作用。结果:四种评估伴侣功能的方法有类似的结果。不同年龄兔晶状体皮质α-晶体蛋白的保护作用较核强,α_H-晶体蛋白的伴侣功能均较α_L-晶体蛋白降低;随着老化晶状体皮质α_H-和α_L-晶体蛋白的伴侣功能无显著性降低,但核α_L-晶体蛋白伴侣功能的降低具有显著性。结论:晶状体核α-晶体蛋白年龄依赖性伴侣功能的降低,可以参与老年性白内障的形成。眼科学报 2003;19:239-243。; 严宏惠延年范建国王为农; 关键词：Α-晶体蛋白分子伴侣过氧化氢酶老年性白内障

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教育部留学回国人员科研启动基金(97H26)