国家自然科学基金(30500423)
- 作品数：67 被引量：167H指数：8
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- 多房棘球绦虫EmⅡ/3抗原研究进展
- 2007年
- 本文综述了多房棘球绦虫EmⅡ/3基因及表达蛋白EmⅡ/3的抗原性和免疫性,为多房棘球蚴病的疫苗研究和免疫诊断研究提供参考。
- 杨梅李文桂
- 关键词：多房棘球绦虫疫苗
- 细菌转基因植物疫苗研究进展被引量：14
- 2006年
- 李文桂陈雅棠
- 关键词：疫苗研究转基因植物活菌苗DNA疫苗分子疫苗破伤风
- 双歧杆菌生物学作用研究进展被引量：24
- 2006年
- 李文桂陈雅棠
- 关键词：双歧杆菌生物学
- 细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察被引量：4
- 2010年
- 目的 动态观察细粒棘球绦虫（Eg）重组双歧杆菌（Bb）-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化.方法 将5×108克隆形成单位（CFU）和5×105 CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔黏膜接种免疫Balb/c小鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原（EgAg）、刀豆蛋白A（ConA）或脂多糖（LPS）刺激培养,同时设有双歧杆菌液体培养基（MRS）对照.收集脾细胞培养上清液,ELISA法检测γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-12、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和IL-10水平.结果 口服灌胃组的IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2～8、2～8、4、6～10周升高,分别在免疫后4、2、4、6周达最高水平,其EgAg刺激组IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别为（700.0±115.5）、（45.0±5.8）、（350.0±57.7）、（112.5±14.4）ng/L,与0周[（35.0±5.8）、（12.5±2.9）、（190.0±11.6）、（25.0±5.8）ng/L]及MRS对照组[（37.5±5.0）、（13.8±2.5）、（195.0±5.8）、（27.5±2.9）ng/L]比较,差异有统计学意义（P＜0.05或＜0.01）;鼻腔接种组的IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2～8、2～8、2～6、6～16周升高,分别在免疫后2、2、4、8周达最高水平,其EgAg刺激组IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别为（700.0±115.5）、（55.0±5.8）、（275.0±28.9）、（140.0±11.6）ng/L,与0周[（35.0±5.8）、（12.5±2.9）、（190.0±11.6）、（25.0±5.8）ng/L]及MRS对照组[（37.5±5.0）、（13.8±2.5）、（195.0±5.8）、（27.5±2.9）ng/L]比较,差异有统计学意义（P＜0.05或＜0.01）.EgAg、ConA、LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的脾细胞悬液组（P＜0.05或＜0.01）,ConA或LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的EgAg刺激组（P＜0.05或＜0.01）.结论 细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗在免疫早期（2～6周）可诱导小鼠脾细胞产生Th1和Th2混合型�
- 周必英陈雅棠李文桂杨梅
- 关键词：细粒棘球绦虫疫苗细胞因子类
- 多房棘球绦虫重组BCG—EmⅡ／3疫苗诱导小鼠脾细胞亚群变化的研究被引量：4
- 2007年
- 目的 探讨多房棘球绦虫重组BCG—EmⅡ／3疫苗免疫和多房棘球绦虫（Em）原头节攻击后小鼠脾CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的变化。方法 Balb／c小鼠随机分为疫苗皮下注射组、鼻腔接种组、空载体对照组、卡介苗（BCG）对照组和磷酸缓冲液（PBS）对照组。疫苗免疫8周时用Em原头节进行攻击，感染后18周杀鼠取脾，分离脾细胞，流式细胞仪检测脾CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的百分比。结果 疫苗皮下注射组和鼻腔接种组的脾CD4^＋T细胞亚群比值分别为0．345±0．018、0．314±0．014，与PBS对照组（0．216±0．027）比较明显增高（q值分别为3．93、3．76，P〈0．01）；CD8^＋T细胞亚群比值分别为0．091±0．005、0．083±0．007，与PBS对照组（0．085±0．018）比较无明显变化（q值分别为0．92、0．89，P〉0．05）；CD4^＋／CD8^＋亚群比值分别为3．81±0．30、3．80±0．44，与PBS对照组（2．75±1．08）比较明显增高（q值分别为3.25、3．06，P〈0．01）。皮下注射组的CD4^＋和CD8^＋T细胞亚群数目显著高于鼻腔内接种组（q值分别为3．52、2．63，P〈0．01或〈0．05）。结论 CD4^＋T细胞亚群在多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ／3疫苗诱导的小鼠抗Em原头节攻击感染的保护性免疫机制中起关键作用。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ/3疫苗促进小鼠脾细胞因子的分泌被引量：5
- 2007年
- 目的动态观察多房棘球绦虫重组BCG—EmⅡ／3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化。方法采用鼻腔内接种疫苗免疫BALB／C鼠，在免疫后0、2、4、6、8和10周各剖杀4只小鼠取脾，分离脾细胞，用EmAg或ConA刺激培养，收集脾细胞培养上清液，检测脾细胞培养上清液中的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平，同时设有PBS对照。结果疫苗接种组中IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4分别在免疫后2～6、2～6、2—10和8～10周升高，分别在免疫后4、4、8和10周达最高水平。结论多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ／3疫苗在免疫早期（2～8周）即可诱导小鼠产生一个TH1型保护性免疫反应。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫
- 加强囊型棘球蚴病Eg95疫苗的研究
- 2015年
- 囊型棘球蚴病（cysticechinococcosis，CE）又称囊型包虫病，是细粒棘球绦虫（Echinococcusgrantltlosus,125，Eg）的续绦期幼虫引起的一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。棘球蚴病呈全球性分布，主要流行于牧区和半牧区。我国棘球蚴病主要流行或散发在西北、华北、东北以及西南广大农牧区，约23个省、市和自治区，以新疆、甘肃、宁夏、青海、西藏、
- 李文桂
- 关键词：囊型棘球蚴病
- 多房棘球绦虫重组Bb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗的构建及鉴定被引量：20
- 2007年
- 目的构建和鉴定多房棘球绦虫(Em)重组双歧杆菌(Bb)-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗。方法通过PCR扩增EmⅡ/3和Em14-3-3抗原编码基因,然后采用基因拼接法(geneSOEing)剪接EmⅡ/3和Em14-3-3,得到EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因;将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-EmⅡ/3-Em14-3-3;用电穿孔法将该质粒导入Bb,构建多房棘球绦虫重组Bb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗。结果PCR成功扩增出2554bp的EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因;双酶切证实EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因成功插入pGEX-1λT中;PCR证实rBb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗构建成功。结论成功构建了多房棘球绦虫重组Bb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗,为该疫苗的开发和利用打下了坚实的实验基础。
- 杨梅李文桂朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫
- 粪肠球菌介导的细粒棘球绦虫重组Efs-Eg95-EgA31疫苗的构建、鉴定及表达被引量：5
- 2022年
- 目的构建粪肠球菌(Efs)为载体的细粒棘球绦虫重组Efs-Eg95-EgA31疫苗,并研究其表达效率。方法采用电穿孔技术将重组质粒pGEX-Eg95-EgA31转化粪肠球菌ATCC47077株,构建rEfs-Eg95-EgA31疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定;经IPTG诱导后进行10%SDS-PAGE和Western blot等分析和鉴定表达产物。结果以从rEfs抽提的质粒为模板进行PCR可扩增出约1016 bp的Eg95-EgA31融合基因片段,SDS-PAGE显示表达产物为62.5 ku的重组蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的11%;Western blot表明重组蛋白能被细粒棘球蚴感染的鼠血清识别。结论成功构建了细粒棘球绦虫rEfs-Eg95-EgA31疫苗,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。
- 李文桂欧兴坤何爱琳
- 关键词：粪肠球菌细粒棘球绦虫EG95EGA31
- 多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察被引量：4
- 2007年
- 目的:动态观察多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/C鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平,同时设有PBS对照。结果:疫苗接种组的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4分别在免疫后4～8周、2～8周、2～8周和6～10周升高,分别在免疫后6、6、4～6和8周达最高水平。结论:多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗在免疫早期(2～8周)即可诱导小鼠产生一个TH1型保护性免疫反应。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫重组BCG-EM14-3-3疫苗细胞因子
