四川省卫生厅科研基金(F0201)
- 作品数：4 被引量：32H指数：4
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- 两株保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶条件的优化及酶活力测定被引量：5
- 2006年
- 目的优化2株保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶的培养条件,测定其在最适于产酶条件下的酶活力,并初步观察酶活力稳定性。方法测定2株保加利亚乳杆菌———来源于酸奶的wch9901和标准菌株1.1480在不同培养时间、培养基碳源、摇床转速、气体环境下产生的β-半乳糖苷酶的活力,优化产酶条件。测定2株菌在其最适产酶条件下的酶活力。将制得的1.1480粗酶液分别置冰浴和20℃水浴,每隔1 h测定一次粗酶液中β-半乳糖苷酶活力,观察酶活力稳定性。结果2株保加利亚乳杆菌的最适产酶条件分别为:1.1480于30℃有氧静止培养36 h;wch9901于37℃厌氧静止培养18 h,培养基含乳糖。在最适产酶条件下,1.1 4 8 0的酶活力为0.3 2 1NLU/m l粗酶液,比酶活为2.469 NLU/mg蛋白;wch9901的酶活力为0.401 NLU/m l粗酶液,比酶活为6.1 6 9NLU/mg蛋白。1.1480粗酶液于冰浴可稳定保存6 h,于20℃水浴可稳定保存5 h。结论wch9901与1.1480的最适产酶条件有所差异,前者产酶迅速,产酶量多。
- 汪川张朝武刘衡川裴晓方
- 关键词：保加利亚乳杆菌Β-半乳糖苷酶产酶条件
- 从人胃肠道源乳杆菌株中初步筛选耐酸耐胆盐优良株被引量：9
- 2006年
- 目的筛选对酸和胆盐耐受性均较强的优良乳杆菌株。方法模拟人体胃酸环境(pH=3)和十二指肠高胆盐环境(胆盐含量=3‰)测定104株人胃肠道源乳杆菌在酸性及高胆盐环境下作用4 h后的存活菌数,并与对照相比较。对结果进行统计学分析。结果16株菌在酸性环境及高胆盐环境下4 h后的活菌下降对数值均小于2。筛选出3株具有较强耐酸耐胆盐能力的乳杆菌株。结论大多数人胃肠道源乳杆菌对酸和胆盐的耐受能力均不强,对酸的耐受性普遍强于对胆盐的耐受性。
- 汪川张朝武刘益山余倩别明江
- 关键词：乳杆菌胆盐
- 非融合表达β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌的构建和性能研究被引量：4
- 2009年
- 目的构建能非融合表达高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,并对其酶活性和分泌性能进行研究。方法提取能在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶的重组质粒pMG36e-lacZ1.1480和pMG36e-lacZwch9901,电转化乳酸乳球菌乳酸亚种MG1363。测定重组菌在不同培养时间和乳糖浓度下的β-半乳糖苷酶活性,及在不同培养条件下的酶分泌率。结果携带pMG36e-lacZwch9901的重组乳酸乳球菌(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)具最高酶活性,其β-半乳糖苷酶活性达(16.95±0.09)U/mgpro,为基因初始菌的2.75倍;重组乳酸乳球菌培养24h产酶达高峰;培养基含乳糖时,重组菌酶活测定结果表现为降低;重组乳酸乳球菌表达的β-半乳糖苷酶可分泌到培养基中,当培养基不含红霉素,而含20g/L乳糖时,分泌率最高,达(27.09±0.05)%。结论获得了能非融合表达和分泌高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,可在此基础上进一步研制β-半乳糖苷酶活菌释放体。
- 汪川刘衡川裴晓方余倩张朝武
- 关键词：Β-半乳糖苷酶乳酸乳球菌乳糖不耐受蛋白表达蛋白分泌
- 表达型质粒载体pMG36e在宿主菌中的遗传稳定性研究
- 目的研究表达型质粒载体pMGB6e在大肠杆菌JM109和乳酸乳球菌MG1363两种宿主菌中的遗传稳定性并观察红霉素对其稳定性的影响。方法按经典质粒遗传稳定性测定方法,在有选择压力(加红霉素)和无选择压力的条件下,测定pM...
- 汪川张朝武杜江吕晓英
- 关键词：质粒红霉素
- 文献传递
- 表达型质粒载体pMG36e在宿主菌中的遗传稳定性研究被引量：14
- 2005年
- 目的 研究表达型质粒载体pMG36e在大肠杆菌JM10 9和乳酸乳球菌MG136 3两种宿主菌中的遗传稳定性并观察红霉素对其稳定性的影响。方法 按经典质粒遗传稳定性测定方法 ,在有选择压力 (加红霉素 )和无选择压力的条件下 ,测定pMG36e质粒在大肠杆菌JM10 9和乳酸乳球菌MG136 3中的遗传稳定率。结果 pMG36e质粒在大肠杆菌JM10 9中连续传至 12 0代时 ,在有选择压力的条件下 ,质粒稳定率保持在10 0 % ;无选择压力的条件下为 96 % ;pMG36e质粒在乳酸乳球菌MG136 3中连续传至 10 0代时 ,在有选择压力和无选择压力的条件下 ,质粒稳定率均为 98%。结论 pMG36e质粒在两种宿主菌中均具有较好的遗传稳定性。红霉素对pMG36e质粒的遗传稳定性无显著影响。
- 汪川张朝武杜江吕晓英
- 关键词：质粒红霉素
